川陈皮素对糖尿病肾病大鼠AMPK和eNOS表达的影响研究

【摘要】目的 观察川陈皮素对糖尿病肾病大鼠的治疗作用，并从腺苷酸蛋白活化激酶（AMPK）和内皮型一氧化氮酶（eNOS）途径探讨其作用机理。方法 采用高脂高糖饲料喂养+链脲佐菌素（STZ）腹腔注射复制2型糖尿病肾脏损害大鼠模型，模型构建成功后，将其随机分为正常组、模型组、贝那普利干预组以及川陈皮素低、中和高剂量治疗组（n=20）。实验中密切监测大鼠一般情况，治疗期结束后收集尿液检测24h蛋白尿，收集血液检测肾功能指标、抗氧化指标，收集肾脏观察肾脏病理学，同时检测肾脏组织中AMPK及eNOS蛋白和mRNA的表达结果。结果 正常组肾小球正常，无明显病理特征；模型组出现肾小球增大，系膜和肾间质纤维组织增生；贝那普利组和川陈皮素三个剂量组相较于模型组明显减轻。与正常组相比，模型组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显升高(P＜005)；SOD和GSH明显降低(P＜005)，与模型组相比，贝那普利和川陈皮素三个剂量组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显降低(P＜005)，SOD和GSH明显升高(P＜005)。与正常组相比，模型组p AMPK、AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达均明显降低(P＜005)；与模型组相比，贝那普利组和川陈皮素低、中和高剂量组AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达明显升高(P＜005)。结论 川陈皮素可保护肾功能，提高血清和肾脏抗氧化指标，同时增加AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达，最终保护糖尿病肾脏损害。     

9 Survivin反义寡核苷酸对人肝癌细胞的抑制作用

目的:探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对人肝癌细胞HepG2的抑制作用。方法:采用免疫组织化学法检测肝细胞癌（HCC）组织中survivin的表达。采用脂质体介导survivin ASODN体外转染人肝癌细胞株HepG2，Western blot检测细胞survivin蛋白的表达，FCM检测细胞的凋亡率，观察细胞在软琼脂中的集落形成能力。建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型，观察survivin ASODN的体内抑癌作用。 结果:（1）肝癌组织中survivin表达阳性率为75.8％(25/33)，明显高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.01);（2）survivin ASODN体外转染可明显下调HepG2细胞survivin蛋白表达，ASODN组HepG2细胞凋亡率明显高于空白对照组和SODN组(P<0.01)，ASODN组HepG2细胞在软琼脂中形成的集落数目明显少于空白对照组和SODN组(P<0.01);（3）ASODN组瘤体生长速度较空白对照组和SODN组明显减慢(P<0.01)，ASODN组瘤体重量较空白对照组和SODN组明显减轻(P<0.05)。结论:Survivin在HCC组织中高表达;survivin ASODN可以诱导HepG2细胞凋亡，在体外实验和动物实验中对HepG2细胞生长都有抑制作用。     

不阻断肝门的肝切除术63例治疗体会

回顾性分析不阻断肝门行肝叶切除治疗63例良恶性肝病患者的临床资料，对术中出血量、手术时间、术后肝功能和并发症与阻断肝门的患者进行对比分析，结果示未阻断肝门组均能成功完成手术，术中出血量、手术时间和并发症与阻断肝门组无明显差别（P＞0.05）。作者认为，只要病例选择适当，术者切肝技术熟练，大部分病例不需阻断肝门亦能顺利完成肝切除手术。     

实验性急性胰腺炎肺内细胞凋亡状况及其意义的初步探讨

目的：探讨重症急性胰腺炎时肺内细胞凋亡的状况及其在肺损伤发病机制中的意义。方法：以不同浓度牛磺胆酸钠液逆行胰胆管注射造成大急急性水肿性胰腺炎（AEP)与急性坏死性胰腺炎(ANP)两种模型，测定血浆TNF-α与内毒素水平的动态变化，免疫组化检测肺内TNF-α的表达，并以TUNEL法结合激光扫描共聚焦显微镜检测肺组织切片内细胞凋亡的情况。结果：正常时大鼠肺内偶见淋巴细胞及纤维母细胞等发生凋亡，诱导AEP或ANP后凋亡细胞数量无明显变化。随着肺损伤的出现，少许浸润的炎细胞、肺泡上皮细胞及血管内皮细胞等发生了凋亡。凋亡指数(‰)在ANP组呈一过性下降，在ANP组表现为持续下降，在6h后各时点均显著低于AEP组相应值(P＜0．05)。分析表明，ANP组血中TNF-α、内毒素含量的增加与凋亡指数的变化存在负相关(P＜0.05)。结论：ANP时肺内浸润的以中性粒细胞为代表的大量炎细胞出现延迟凋亡，这种现象可能是肺损伤发生的重要前提，同时内毒素血症及TNF-α的过度合成可能是中性粒细胞延迟凋亡的部分原因。     

Dr. Zhang Zhijun＇S Experience in Treating Stroke with Medicinal Insects

Dr. Zhang Zhijun, father of the authors, had rich experience in treating senile cardiovascular diseases with integrated TCM and western medicine. The following is an introduction to his experience in the treatment of stroke with medicinal insects.     

胆囊良恶性病变中胆囊星形细胞标记物及其调控因子的表达研究

目的 探讨胆囊腺癌、癌旁组织和慢性胆囊炎组织中GSCs和其调控因子TGF β1mRNA和CTGFmRNA表达水平及其临床病理意义。方法 108例胆囊腺癌、46例癌旁组织和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规石蜡包埋切片，GSCs染色方法为平滑肌肌动蛋白（α SMA）单抗EnVisiomTM免疫组化法，TGF β1mRNA和CTGFmRNA染色方法为原位杂交法。结果 胆囊腺癌α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA表达阳性率及其评分明显高于癌旁组织和慢性胆囊炎（P<0.05或P<0.01）；但腺瘤癌变、肿块最大径<2cm、无淋巴结转移和未侵犯周围组织者的α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA表达阳性率及其评分明显高于低分化腺癌、肿块最大径≥2cm、淋巴结转移和侵犯周围组织器官者（P<0.05或P<0.01）；胆囊腺癌中α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA表达评分之间均呈高度密切正相关（α SMA vs TGF β1mRNA, r=0.82; α SMA vs CTGFmRNA r=0.75; TGF β1mRNA vs CTGFmRNA, r=0.78）结论 α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA均为反映胆囊腺癌进展、生物学行为及预后的重要生物学标记物，TGF β1和CTGF在活化GSCs方面可能具有重要调控作用。     

染色体1pter-p36.21杂合性缺失与瘢痕疙瘩的关系

目的寻找瘢痕疙瘩1pter-36.21中可能存在的肿瘤抑制基因的杂合性丢失(LOH)区域,为发现和定位瘢痕抑制基因提供线索和依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对25例瘢痕疙瘩组织和外周静脉血标本进行微卫星分析。结果瘢痕疙瘩组织在所选的位点上的LOH发生率为60%(15/25),明显高于正常对照组织的4%(1/25,P<0.05),在所选的位点上均未发现微卫星不稳定性(MSI)。D1S243位点、D1S468位点、D1S507位点、D1S199位点的LOH发生率分别为28%(7/25)、40%(10/25)、52%(13/25)、12%(3/25),其中D1S243、D1S468、D1S507的LOH发生率比较具有统计学意义(P<0.05)。结论发生在D1S243-D1S468-D1S507位点的LOH存在与瘢痕疙瘩有关的潜在瘢痕抑制基因(SSG),而1pter-36.21上LOH微卫星不稳定性与瘢痕疙瘩发生的关系不大。     

胰腺和胰肾联合移植的进展

胰腺移植和胰肾联合移植已经成为治疗终末期患者器官衰竭的有效方法，尤其是近年来的一些重大进展明显改善了移植的效果。笔者就移植胰腺胰液引流选择、供胰静脉回流的方式、免疫抑制方案等方面进行综述。     

牙片中骨量与灰度的关系及灰阶的改进

本文对较小厚度范围内颌骨、金属铝在X片上的灰度水平与厚度变化关系进行了探讨,提出在数字减影牙片中以金属铝制成均匀楔形灰阶,代替传统金箔制成的台阶式灰阶.     

外伤性脾破裂37例保脾手术体会

脾脏是腹部内脏中最易受损的器官，在闭合性腹部损伤中，脾破裂占20％-40％。传统治疗脾破裂是不分原因及程度一律施行脾切除术；现在，随着对脾脏免疫功能的深入研究及外科技术的快速发展，各种保脾手术应运而生，并广泛应用于临床。我院自1998年起，开展保脾手术37例，疗效满意，报告如下。