海藻糖在气管低温保存中的保护机制

目的探讨海藻糖在气管低温保存中的保护作用和机制。方法新鲜配制4组保存液，其中：Ⅰ组LPD；Ⅱ组LPD 10％DMSO；Ⅲ组LPD 0．15M海藻糖；Ⅳ组LPD 10％DMSO 0．15M海藻糖。切取SD大鼠气管后立即分别放入含上述4种溶液的冻存管，在程序降温仪降至-80℃后投入液氮中保存。20d后对气管标本进行HE染色和Bcl-2、Pax蛋白检测(免疫组化)，并将其异位移植到Wistar大鼠腹腔，15d后取出移植气管，观察组织学变化。结果4种保存液低温保存气管20d后，Ⅲ组和Ⅳ组气管结构完整，软骨细胞Pax蛋白表达较低，尤其Ⅳ组保存效果最好，同种异体异位移植后生长良好。各组Bcl-2蛋白表达无明显区别。结论在气管低温保存中海藻糖的保护作用主要是通过对软骨细胞的保护实现的，抑制软骨细胞Pax基因的表达是其中的保护机制之一。海藻糖和DMSO合用保护作用更好。     

CO2对犬缺血心肌侧支循环形成的影响及对心功能的保护作用

目的：观察经冠状动脉注入缺血心肌内CO2对犬缺血心肌侧支循环形成的影响反对心功能的保护作用。方法：采用健康杂种犬，建立犬急性心肌缺血模型。将模型犬分成两组，实验组10只，每日注射95％的CO2（2ml／kg）；对照组9只，每日只注射与实验组等量的肝素生理盐水，共14d；另选5只为空白对照组。两周后行冠状动脉造影、超声心动图、病理学、免疫组化染色检查．评价各组心功能及侧支血管形成状况。结果：实验组较对照组心脏缺血部位微血管明显增多，侧支循环形成，心功能改善。结论：CO2能加速扩张冠状动脉侧支血管，加速缺血区冠状动脉侧史循环的建立，增加心肌缺血区微血管的密度，改善缺血区的血液供应，并有效地保护心功能。     

缺血再灌注对血管内皮细胞功能的影响及药物干预作用观察

目的:探讨缺血再灌注(缺氧再给氧)对内皮细胞免疫功能的影响及川芎醇的干预效果.方法:用人脐静脉内皮细胞株ECV304缺氧再给氧模型模拟体内缺血再灌注对血管内皮细胞的损伤,并用川芎醇干预其缺氧再给氧过程.间接免疫荧光染色显示胞内核因子-κΒ(ΝF-κΒ),流式细胞术检测细胞表面HLA-ABC,HLA-DR,CD86和CD54,并将内皮细胞与同种异体淋巴细胞混合培养(MELR),检测淋巴细胞增殖程度、IL-2的产生及凋亡淋巴细胞百分率.结果:缺氧再给氧使ECV304细胞变圆、收缩、脱落,胞浆NF-κB表达增高,且由胞浆阳性为主转为胞核阳性为主,细胞表面HLA-ABC,HLA-DR,CD86增高,CD54无显著变化,MELR中3H-TdR掺入量、IL-2生成量显著增多,凋亡淋巴细胞百分率降低.川芎醇干预后ECV304细胞形态基本恢复正常,NF-κB表达未下调,但核阳性细胞百分率降低,以核浆阳性为主,其他多项检测指标的改变得以逆转.结论:缺氧再给氧影响了 ECV304细胞几种重要免疫相关分子的表达,川芎醇可发挥拮抗作用,使内皮细胞保持相对正常的免疫学功能.     

TGF-β1mRNA与大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的关系

目的:研究TGF-β1mRNA与大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的关系.方法:试验分2组,Ⅰ组:Wistar→SD小肠移植;Ⅱ组Wistar→SD小肠移植 CsA.术后3,5,7d观察病理学改变并用半定量RT-PCR方法检测IFN-γ、IL-2、TGF-β1mRNA.结果:病理改变:Ⅰ组术后3d出现排斥反应,7d最重,Ⅱ组术后7d部分出现轻度排斥反应.Ⅰ组IFN-γ、IL-I mRNA术后明显增高,Ⅱ组术后略升高,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).Ⅰ组TGF-β1mRNA术后增高,Ⅱ组TGF-β1mRNA术后增高大于Ⅰ组,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论:TGF-β1mRNA转录水平增高可抑制大鼠小肠移植急性排斥反应.     

兔在体肺保存模型的建立及其意义

目的　建立一种能筛选和鉴定肺保护液保护效果的兔在体肺保存模型。方法　新西兰白兔 40只 ,经左侧开胸 ,掀开胸壁 ,游离左上肺动脉 ,穿刺置管 ,切除左肺上叶 ,经左心房置管入左肺下静脉。阻断左肺根后 ,自肺动脉灌注肺保护液 ,经肺静脉管引流 ,完毕后将左肺下叶放入特制的肺保存器内低温冷藏 2h ,移去肺保存器 ,开放肺门再灌注 3h。在实验过程中取标本观察肺保存效果。结果　在预实验阶段 ,10只动物因出血死亡 ,或因出血导致的后续操作无法进行而致失败 5只 ,成功率 5 0 %。经过改进后在正式实验阶段 ,3 0只动物模型均制作成功 ,术中血压、心率及体温等各项生理指标稳定 ,与开胸前相比 ,无统计学意义差异 (P <0 .0 5 ) ,动物对手术的耐受性好。结论　兔在体肺保存模型制作简单 ,过程符合生理 ,模型稳定、安全、实用 ,是研究肺灌注液保存效果的理想的急性和慢性实验动物模型。     

一氧化氮合酶抑制剂对创伤性休克的干预作用

目的：评价选择性诱导型一氧化氮合酶（iNO）抑制剂氨基胍（AG）和非选择性一氧化氮合酶抑制剂L-N位硝基精氨甲酯（L-NAME）对创伤性休克的治疗效果。方法：40只Wistar大鼠制作创伤性休克动物模型。双侧股骨干砸伤后并经股动脉放血至平均动脉压（MAP）35～45mmHg（4．67～6.00kPa），维持30min，然后回输失血和等量的林格式液。随机分为休克组（10只）,AG组（根据复苏时静脉注射AG含量为10，50mm／kg。则分为AGⅠ，AGⅡ各10只），L-NAME组（10只，复苏时静脉注射LNAME10mg/kg），观察休克前后血浆NO浓度的动态变化及24h大鼠存活率。并留取肺、肝、肾、小肠组织，观察病理改变。结果：大鼠创伤性休克后，血浆NO水平明显高于休克前；AG各组动物复苏后血浆NO的水平明显降低，各脏器的病理损害亦显著减轻，存活率明显提高，AGⅡ组效果最好；L-NAME组动物复苏后血浆NO的水平也明显降低，各脏器的病理损害无明显变化，存活率无明显提高。结论：NO在创伤性休克的病理发展过程中起着重要作用，应用AG有助于创伤性休克的改善；L-NAME能降低NO的水平，但对休克的预后无明显改善。     

E1AF基因对大肠癌细胞侵袭力的影响及其作用机制

E1AF基因是ETS(E26 transforming specific or E twenty six specific)癌基因家族的新成员,是鼠PEA3癌基因的同源类似物.以往研究发现,E1AF基因对恶性肿瘤的进展有促进作用,其作用可能与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)有关.本研究的目的在于阐明E1AF基因对大肠癌侵袭能力的影响,并同时研究E1AF对MMP-2和MMP-7的调控,以明确E1AF基因促进大肠癌侵袭能力的机制.     

气管低温保存液中海藻糖浓度的选择

海藻糖是广泛存在于海藻、酵母等生物体内的非还原性双糖，是生物大分子天然非特异性保护剂，广泛应用于病毒、疫苗等保存。但其在气管保存中的应用，目前国内研究较少。我们在动物实验中使用海藻糖保存气管，探讨其在低温时对气管组织细胞的影响及与浓度的关系。     

IL-10对大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的影响

目的:研究IL-10对大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的影响。方法:将18只供体Wistar大鼠和18只受体SD大鼠分为3组,每组各有6只Wistar大鼠和SD大鼠。Ⅰ组:Wistar→SD小肠移植;Ⅱ组:Wistar→SD小肠移植 CsA;Ⅲ组:Wistar→SD小肠移植 rrIL-10。术后3、5、7d观察病理学改变并用半定量RT-PCR方法检测IFN-γ、IL-2mRNA。结果:Ⅰ组术后3 d出现排斥反应,第7 d时最重;Ⅱ组术后7d部分出现轻度排斥反应;Ⅲ组术后5d出现轻度排斥反应,术后7d出现中度排斥反应。Ⅰ组IFN-γ、IL-2mRNA术后明显增高;Ⅱ组术后略升高,与Ⅰ组差异有统计学意义(P<0.01);Ⅲ组术后升高,较Ⅰ组升高程度低,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-10可抑制大鼠小肠移植急性排斥反应。     

海藻糖对低温保存的气管组织细胞活力的影响

目的探讨海藻糖对低温保存的气管组织细胞活力的影响。方法新鲜配制两组保存液，其中：Ⅰ组LPD DMSO，Ⅱ组LPD DMSO 海藻糖(0．10mol．L^-1)。切取SD大鼠气管后立即分别放入含上述两种溶液的冻存管，在程序降温仪降至-80℃后投入液氮中保存．分别在1，15，30，60，120d后对气管组织体外培养。并加入^3H—TdR做标记，检测细胞掺入率。结果采用^3H—TdR体外组织培养，低温保存后Ⅰ组气管^3H—TdR掺入率(88．72％～78．21％)明显高于Ⅱ组(80．99％～70．75％)，这种趋势可长时间持续(共120d)。结论含有海藻糖的LPD溶液在低温下对气管组织细胞有明显的保护作用；^3H—TdR体外组织培养的方法可以比较客观地反映了器官保存后的活力。