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目的构建间质细胞双尾C(Bicc1)基因条件性敲除小鼠模型, 并对其表型进行分析。方法将CRISPR Cas9方法构建的Bicc1f/+小鼠子代与Pdgfra启动子驱动的Cre小鼠进行杂交, 获得子代小鼠, 饲养1～2周后提取其脚趾及鼠尾组织基因组DNA, 经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳后, 在DNA水平检测小鼠基因型;选取经鉴定后生长至3周龄的Bicc1基因条件性敲除小鼠(实验组)、野生型小鼠(对照组)各3只进行后续实验:通过腹腔注射他莫昔芬进行诱导敲除Bicc1基因, 于1周后取小鼠肾脏、骨骼肌、皮肤及脂肪组织, 一部分组织通过实时定量PCR(RT-qPCR)鉴定其中的Bicc1 mRNA表达水平;另一部分组织以10%多聚甲醛固定, 随后进行HE染色和Masson染色, 在光镜下观察分析。应用SPSS 28.0软件对数据进行分析, 组间比较采用t检验, P<0.05表示差异有统计学意义。结果通过繁育获得间质细胞Bicc1基因条件性敲除小鼠, 基因型为Bicc1f/fCre+/-, 野生型小鼠基因型为Bicc1f/fCre-/-;RT-qPCR检测结果显示, 实验组小鼠肾脏、骨骼... 相似文献
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