红景天苷对小鼠原代T淋巴细胞体外行为的影响

目的:分析红景天苷(Sal)对小鼠原代T淋巴细胞体外行为的影响。方法:无菌分离并培养BALB/c近交系小鼠淋巴结细胞,MTT比色法检测并分析Sal对小鼠T淋巴细胞活力的影响;荧光染料标记的单克隆抗体染色结合流式细胞术(FCM)检测刀豆蛋白A(Con A)诱导作用下Sal对T淋巴细胞活化抗原CD69表达水平的影响。羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色分析T淋巴细胞体外增殖情况。2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(H2DCFDA)荧光染色检测小鼠T淋巴细胞胞内活性氧簇(ROS)生成。Di OC6(3)染色检测Sal对T淋巴细胞胞内线粒体活性的影响以及地塞米松(DEX)诱导作用下Sal对T淋巴细胞线粒体膜电位的影响。制备小鼠胸腺T淋巴细胞悬液,FCM检测DEX诱导作用下胸腺T淋巴细胞的凋亡率。结果:终浓度为80、160和320μmol/L的Sal均能提高T淋巴细胞活化抗原CD69的表达水平(P0.05)。Sal能促进Con A诱导72 h条件下T淋巴细胞体外增殖(P0.01),且能减少T淋巴细胞胞内ROS生成量(P0.05),对T淋巴细胞线粒体膜电位有保护作用(P0.01)。Sal能明显降低DEX诱导条件下的胸腺T淋巴细胞凋亡率(P0.01)。结论:Sal能够促进T淋巴细胞的体外活化和增殖,减少T淋巴细胞内ROS的产生,维持细胞内线粒体膜电位稳定性,抑制DEX诱导条件下胸腺T淋巴细胞的凋亡。     

连翘提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响

目的:分析连翘(FS)提取物对小鼠淋巴结T细胞的体外活化与增殖的影响,初步探讨其免疫抑制作用机制.方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)进行刺激,利用荧光标记的单克隆抗体(mAb)染色结合流式细胞术(FCM),检测小鼠T淋巴细胞的表达的活化抗原CD69、CD25、CD71的表达情况;以羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色,以FCM分析FS对淋巴细胞体外增殖的影响.结果:终浓度为40、80、160 mg/L的FS均对ConA刺激诱导的T细胞CD69、CD25和CD71的表达有降低作用(P＜0.05).CFDA-SE染色分析显示,上述浓度的FS对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖具有抑制作用(P＜0.05).结论:FS对ConA诱导的T细胞早、中、后期活化和体外增殖有抑制作用.     

漆黄素对淋巴细胞和巨噬细胞分泌NO的免疫调节作用(英文)

目的探讨漆黄素(fisetin)在体外对小鼠T淋巴细胞增殖、活化、凋亡、ROS的释放和巨噬细胞NO释放功能的影响。方法 CFDA-SE标记技术结合流式细胞术检测漆黄素对T淋巴细胞增殖及增殖指数(PI)的影响。荧光抗体染色结合流式细胞术分析漆黄素对T淋巴细胞在Con A的刺激下CD25的表达水平的影响。DIOC染色检测细胞线粒体膜电势的变化情况,H2DCFDA染色检测细胞ROS释放的变化。Griess试剂盒用以检测巨噬细胞NO释放功能。结果漆黄素(2.5,5和10μmol/L)明显抑制T淋巴细胞增殖,增殖指数(PI)降低并具有剂量依赖性。漆黄素可明显抑制CD25的表达(P<0.01)及ROS的释放。DiOC6(3)染色分析显示,漆黄素可促进细胞的凋亡。巨噬细胞在LPS和IFN-γ的刺激下的NO释放量明显增加,而在漆黄素作用下NO释放量明显下降(P<0.01)。结论漆黄素是一种潜在的免疫调节剂。     

红景天苷对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、ROS和NO产生的影响

目的:研究红景天苷(Sal)对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、胞内活性氧簇(ROS)及分泌一氧化氮(NO)的影响,初步探讨其对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。方法:无菌分离小鼠腹腔巨噬细胞,并制备单细胞悬液,以不同终浓度(80μmol/L、160μmol/L及320μmol/L)的Sal和巨噬细胞共培养4 h,再以脂多糖(LPS)和γ-干扰素(IFN-γ)进行共刺激。利用MTT比色法检测Sal对巨噬细胞体外增殖的影响。用放线菌酮(CHX)诱导巨噬细胞凋亡,用Sytox G reen染色结合荧光酶标仪检测Sal对CHX诱导巨噬细胞凋亡的影响。用流式细胞术(FCM)检测Sal对巨噬细胞吞噬功能的影响。用2-7-二氯氢化荧光素乙二脂(H2DCFDA)染色法结合荧光酶标仪检测Sal对胞内ROS产生的影响;用G riess反应检测Sal对巨噬细胞分泌NO的影响。结果:MTT比色法检测显示,终浓度为80、160、320μmol/L的Sal均可显著促进LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞增殖(P<0.05)。荧光酶标仪检测Syto xG reen染色法的结果显示,160μmol/L的Sal可抑制CHX诱导的巨噬细胞凋亡(P<0.01)。FCM结果显示,各浓度的Sal均能促进单纯药物组和实验药物组LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞的吞噬功能(P<0.05)。用荧光酶标仪检测DH2DCFDA染色结果表明,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激的巨噬细胞胞内ROS的产生均具有显著的抑制作用(P<0.01)。Griess反应检测NO含量的结果显示,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞产生NO均具有促进作用(P<0.05)。结论:Sal对LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞增殖具有显著的促进作用,对CHX诱导的巨噬细胞凋亡具有显著的抑制作用,对静息态和活化态的巨噬细胞的吞噬功能均有增强作用,并能减少LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞胞内ROS的产生;但能促进LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞NO的分泌。     

信息动态

1 临床资料 患者一,女性,51岁,发现甲状腺结节半年余人院.术前超声检查示:左叶上极结节约17 mm×16 mm,低回声,边界欠清,内探及穿支动脉走行,右叶下极可探及大小约5 mm×4 mm无回声结节,左气管食管沟淋巴结转移可能性大.术前甲状腺功能及PTH正常,甲状腺左叶结节FNAC:查到癌细胞.电子喉镜检查未见异常.     

连翘提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬和NO释放的影响

目的:分析连翘(FS)对小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和体外NO释放的影响.方法:无菌收集小鼠腹腔巨噬细胞和羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记大肠杆菌DH5α,短期培养3 h后流式细胞术(FCM)分析FS对腹腔巨噬细胞体外吞噬的影响.用LPS体外刺激活化腹腔巨噬细胞,Griess Reagent试剂盒检测并分析FS对巨噬细胞体外释放NO的影响.结果:FCM分析显示,终浓度为40、80、160 mg/L的FS对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬具有明显的促进作用(P<0.05).不同终质量浓度的FS对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞体外NO的释放均有抑制作用(P<0.05).结论:FS可以促进小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和抑制NO体外的释放.     

达芬奇机器人甲状腺手术中甲状旁腺的损伤因素及保护

目的分析达芬奇机器人甲状腺手术中甲状旁腺损伤的相关因素,探讨甲状旁腺保护的方法,避免永久性甲状旁腺功能减退的发生。 方法回顾性分析2014年1月至2016年5月在济南军区总医院甲状腺乳腺外科行达芬奇机器人甲状腺手术的190例患者的临床资料,统计术后患者出现低甲状旁腺激素(PTH)及低血钙的发生率,分析术后发生甲状旁腺功能减退的相关因素,探讨术中如何保护甲状旁腺及其功能。 结果患者术后暂时性低PTH的发生率为20.53%(39/190),暂时性低血钙的发生率为23.68%(45/190),术后随访无永久性甲状旁腺功能减退发生。甲状腺全切术后低PTH、低血钙的发生率高于腺叶 ＋ 峡部切除术者(χ²＝14.789,11.604;P＝0.000,0.001)。行中央区淋巴结清扫的患者术后低PTH、低血钙的发生率高于未清扫者(χ²＝11.200,17.771;P＝0.001,0.000)。甲状旁腺原位保留者术后低PTH、低血钙的发生率低于切除后自体移植者(χ²＝5.536,4.851,6.140,5.453;P＝0.019,0.028,0.013,0.020)。 结论在达芬奇机器人甲状腺手术中,甲状腺全切除、中央区淋巴结清扫、甲状旁腺切除后自体移植是造成患者术后暂时性甲状旁腺功能减退的重要影响因素。在达芬奇机器人手术系统下,准确识别甲状旁腺,精细化手术操作,原位保护甲状旁腺及血供,是预防永久性甲状旁腺功能减退的有效方法。     

清开灵注射液对小鼠T细胞行为和DTH的影响

 【目的】 研究清开灵注射液(QKL)对小鼠T细胞体外活化&#65380;增殖&#65380;细胞周期和迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫调节作用及机制&#65377;【方法】 不同浓度的QKL作用于小鼠淋巴细胞4 h后,加入刀豆蛋白A (ConA)刺激,于不同时间点收获细胞,利用流式细胞仪检测T细胞的活化&#65380;增殖和细胞周期分布情况;将小鼠分为正常对照组&#65380;二硝基氟苯(DNFB)诱导的DTH模型组和QKL治疗组,通过分析小鼠脾脏指数和耳朵肿胀率评价QKL对DTH的影响&#65377;【结果】 ConA刺激12 h后,T细胞表面CD69表达率为63.1% ± 1.3%,QKL下调CD69的表达,加入浓度为1/1280&#65380;1/320和1/80的QKL后,CD69表达率依次降为56.2% ± 2.4%&#65380;51.9% ± 2.8%和39.1% ± 1.4%,与ConA对照相比,差异有统计学意义(P < 0.05);各浓度QKL明显降低ConA刺激的细胞增殖指数,且呈一定的浓度依赖性&#65377;对细胞周期分布的影响表现为:QKL增加ConA激活的细胞中处于S期和G2/M期的细胞数目,降低处于G0/G1期的细胞数目;体内应用QKL治疗小鼠DTH的结果为:QKL治疗组小鼠脾脏指数为4.96 ± 0.90,与模型组(脾脏指数为5.78 ± 0.85)相比, P < 0.05; 发病耳的肿胀率为28.4% ± 4.2%,与模型组(肿胀率为42.4% ± 4.6%)相比,P < 0.01&#65377;【结论】 QKL是一种有效的负向免疫调节剂,能抑制体内外的免疫反应,抑制T细胞的活化和增殖可能是其作用机制之一&#65377;     

雷帕霉素对小鼠星形胶质细胞体外诱导凋亡的影响

目的:探讨雷帕霉素(rapamycin,Rapa)对小鼠星形胶质细胞体外凋亡的影响。方法:无菌分离并体外培养C57BL/6J幼鼠脑组织星形胶质细胞。通过MTT比色法测定并分析Rapa浓度对幼鼠星形胶质细胞存活的影响;SYTOXGreen荧光染色联合荧光酶标仪检测并分析Rapa对H2O2、ionomycin、deferorxamine等诱导剂作用一定时间内细胞存活的影响;Di OC6(3)染色分析Rapa在H2O2氧化应激损伤条件下对星形胶质细胞线粒体膜电势的影响;分别采用H2DCFDA和Mito SOXTMRed荧光染色联合流式细胞术检测Rapa预适应对星形胶质细胞ROS生成以及线粒体内ROS含量的影响。结果:Rapa能促进H2O2以及ionomycin联合deferorxamine损伤作用下的星形胶质细胞的存活,对线粒体膜电势有保护作用,可降低H2O2损伤作用下星形胶质细胞ROS的产生并可以维持胞内线粒体ROS的含量在较低水平。结论:Rapa能够减少细胞内ROS的生成量并降低胞内线粒体内ROS水平;能够减轻H2O2对细胞线粒体膜的损伤破坏,维护线粒体膜电势的稳定性,进而对氧化应激损伤介导细胞凋亡有一定的抑制作用。     

清开灵注射液对小鼠T细胞行为和DTH的影响

【目的】研究清开灵注射液（QKL）对小鼠T细胞体外活化、增殖、细胞周期和迟发型超敏反应（DTH）的影响,探讨其免疫调节作用及机制。【方法】不同浓度的QKL作用于小鼠淋巴细胞4h后,加入刀豆蛋白A（ConA）刺激,于不同时间点收获细胞,利用流式细胞仪检测T细胞的活化、增殖和细胞周期分布情况;将小鼠分为正常对照组、二硝基氟苯（DNFB）诱导的DTH模型组和QKL治疗组,通过分析小鼠脾脏指数和耳朵肿胀率评价QKL对DTH的影响。【结果】ConA刺激12h后,T细胞表面CD69表达率为63．1％&#177;1．3％,QKL下调CD69的表达．加入浓度为1／1280、1／320和1／80的QKL后．CD69表达率依次降为56．2％&#177;2．4％、51．9％&#177;2．8％和39．1％&#177;1．4％,与ConA对照相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;各浓度QKL明显降低ConA刺激的细胞增殖指数,且呈一定的浓度依赖性。对细胞周期分布的影响表现为：QKL增加ConA激活的细胞中处于S期和G2／M期的细胞数目,降低处于G0／G1期的细胞数目;体内应用QKL治疗小鼠DTH的结果为：QKL治疗组小鼠脾脏指数为4．96&#177;0．90,与模型组（脾脏指数为5．78&#177;0．85）相比,P〈0．05;发病耳的肿胀率为28．4％&#177;4．2％,与模型组（肿胀率为42．4％&#177;4．6％）相比,P〈0．01。【结论】QKL是一种有效的负向免疫调节剂,能抑制体内外的免疫反应．抑制T细胞的活化和增殖可能是其作用机制之一。