NT-3转染的SC对坐骨神经缺损大鼠腓肠肌细胞的影响

目的观察神经营养因子-3(NT-3)基因修饰的施旺细胞(SC)对大鼠坐骨神经缺损模型腓肠肌细胞的影响。方法取3 d龄Wistar大鼠2只,分离、培养SC。将重组人真核细胞质粒(pcDNA3)-NT-3通过阳离子脂质体转染SC,用免疫组化染色观察转染前后SC的生长速度,测定SC含量。Wistar成年大鼠80只制成坐骨神经缺损模型,向坐骨神经断端分别注入ECM凝胶(A组)、SC-PLGA ECM凝胶(B组)、NT-3基因-PLGA ECM凝胶(C组)、NT-3基因修饰SC-PLGA ECM凝胶(D组)各20μL,每组20只。分别于术后1、4、8、12周每组各取5只大鼠,制作腓肠肌标本,常规HE染色,测量肌纤维横截面积。采用Tunel法对肌细胞凋亡率进行检测。结果 NT-3经阳离子脂质体转染SC后3、5、7、9、14、21 d SC细胞数、纯度与转染前相比,P均<0.05。术后12周腓肠肌纤维横截面积B、C、D组与A组相比,B、C组与D组相比,P均<0.05。转染后12周A、B、C、D组腓肠肌细胞凋亡率分别为32.09%±1.02%、15.84%±0.63%、11.67%±0.48%、6.83%±0.25%,A组>B组>C组>D组,P均<0.05。结论 NT-3基因经阳离子脂质体转染SC能促进SC的分泌,修复损伤神经,防止失神经肌细胞凋亡。     

NT-3转染骨髓间充质干细胞对脑缺血再灌注的机制研究

目的研究神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)转染的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法制作脑缺血再灌注损伤模型,将60只大鼠根据注射物不同分为3组:生理盐水对照组、BMSCs组和NT-3+BMSCs组(n=20),观察不同时间3组大鼠的神经学功能评分、脑组织光镜观察、TUNEL法检测神经元细胞的凋亡及丙二醛含量情况。结果 BMSCs+NT-3组移植后大鼠神经学功能评分较BMSCs组低,而BMSCs组较NS组较低,两组间比较均有统计学意义(P0.05);BMSCs+NT-3组脑组织光镜观察细胞形态学变化最轻;BMSCs组神经元凋亡较NS组减少,BMSCs+NT-3组的神经元凋亡数量较BMSCs组减少,两组间比较均有统计学意义(P0.05);NS组丙二醛(MDA)含量明显高于BMSCs组(P0.05);而BMSCs+NT-3转染组明显低于BMSCs组(P0.05)。结论大鼠BMSCs经NT-3转染后相互促进,移植于急性脑缺血再灌注损伤通过减缓神经元细胞凋亡、降低丙二醛含量抑制自由基的脂质过氧化反应进行修复。     

交锁髓内钉固定加骼骨植骨结合中药治疗胫骨骨不连

目的探讨和总结骼骨植骨结合中药治疗胫骨骨折术后骨不连的可行性与临床意义。方法采用交锁髓内钉内固定、髂骨块或条周围填塞植骨结合中药治疗胫骨骨折术后骨不连18例。结果术后8～24个月(平均15个月)均达到骨折良好愈合,术后患肢功能好。无术后严重感染,无其他并发症发生。结论骼骨植骨结合中药治疗胫骨骨折术后骨不连方法可行,临床疗效可靠。     

培养规范化的临床医学研究生的教学管理

临床医学研究生教育是为医学领域培养教学、科研和临床多方面的高层次专业人才,制定规范化、系统化的教育管理,在着重培养学生研究问题和分析问题能力的基础上,调整教学安排,加强临床技能和实践的培养;扩大轮转科室范围,按主治医师的标准培养,使他们成为临床和科研工作中的主要骨干力量及学术带头人.研究生更注重的是培养学生研究问题和分析问题的能力,特别是从事该学科科研教学的能力.     

阳离子脂质体介导神经营养因子-3在大鼠雪旺细胞中的表达

目的观察阳离子脂质体转染神经营养因子-3（Neurotrophin-3,NT-3）基因在大鼠雪旺细胞（schwann cell,SC）的表达和提高SC细胞分泌NT-3的能力。方法采用阳离子脂质体介入法,将脂质体转染酶介导的NT-3转染至SC细胞,以转染后及未转染作为实验组和对照组,于转染后1、2、4、8周用ELISA双抗体夹心法测定NT-3蛋白的表达,采用DNA酶切鉴定转染后NT-3的DNA,免疫组化S-100染色法检测转染前后SC纯度。电镜下观察转染后SC细胞结构。结果转染后2、4、8周NT-3蛋白表达量与转染前比较差异有统计学意义（P〈0.05）。转染后NT-3的DNA酶切鉴定结果与NT-3基因片段相符。转染前后SC纯度分别为（94.1±2.3）%及（95.8±2.1）%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 NT-3基因可转染培养的SC并高效表达。SC作为受体细胞易于获取并能在体外大量培养繁殖,能较长时间稳定大量表达所携带基因而不衰减。     

同侧股骨干股骨颈骨折的诊断与治疗

目的：探讨同侧股骨干、股骨颈骨折的诊断与治疗。方法对2002年8月～2008年11月期间治疗的初诊时未诊断出股骨颈骨折的16例同侧股骨干骨折病人,2例用逆行带锁髓内钉＋空心螺钉,8例用股骨重建钉,4例用钢板＋空心螺钉,2例带锁髓内钉固定后股骨颈骨折保守治疗。结果术后随访15～36月,平均21月。股骨干骨折均愈合。1例股骨颈骨折出现股骨头坏死,余均愈合,2例髋及3例膝关节功能障碍,1例出现膝关节切口延迟愈合,无股骨干再骨折及内固定松动断裂,无感染及骨髓炎形成。结论股骨干合并同侧股骨颈骨折相对较少,漏诊率较高且治疗复杂,治疗应根据股骨干骨折的部位、是否为开放性骨折和股骨颈骨折的类型及移位程度来确定内固定的方式。     

LISS接骨板在复杂胫骨骨折中的应用

目的 探讨AO微创内固定系统(LISS)治疗复杂性胫骨近端及胫骨干多段粉碎性骨折的临床疗效.方法 对16例复杂性胫骨近端及胫骨干多段粉碎性骨折采用AO微创内固定系统治疗,对术前及术后X线片检查、术后伤口愈合及膝踝关节功能进行随访.结果 随访13～24个月(平均17个月).14例切口一期愈合,2例延迟愈合;1例内固定断裂,再次手术植骨内固定,于术后18个月愈合;15例X线片显示骨折愈合时间为术后6～15个月.无明显短缩、成角及旋转畸形.对照测试膝踝关节功能,按Johner-Wruhs方法评价,优10例、良4例、中2例、差0例,本组优良率为87.5%.结论 AO微创内固定系统具有创伤小、并发症少、骨折愈合率高等优点,是治疗复杂性胫骨近端及胫骨干多段粉碎性骨折的一种有效治疗方法.