单侧液压脑损伤对大鼠双侧海马GFAP表达和CA1区突触传递的影响

目的研究单侧液压脑损伤(FPI)对大鼠双侧海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达和CA1区突触传递的影响。方法建立大鼠单侧液压脑损伤模型,脑标本分为对照组(包括正常对照和假手术对照)、FPI损伤同侧组和FPI损伤对侧组。免疫组化法检测海马水平切片GFAP表达,对海马CA1区锥体神经元进行细胞内记录。结果FPI大鼠双侧海马齿状回门区和CA1区GFAP表达均比对照组明显增强。FPI损伤同侧组兴奋性输入-输出关系曲线的斜率比其他两组显著增大(P<0.05);FPI损伤同侧组和对侧组双脉冲易化(PPF)比值和抑制性突触后电位(IPSP)幅值均比对照组显著减小(P<0.05);FPI损伤同侧组和对侧组双脉冲抑制(PPD)比值均比对照组显著增大(P<0.05)。结论大鼠单侧液压脑损伤对双侧海马均可产生影响,导致双侧海马CA1区兴奋性突触传递增强,抑制性突触传递减弱。     

针对MAGE-1基因RNAi在恶性胶质瘤SHG-44细胞中的作用研究

目的构建抑制黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)的siRNA表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系SHG-44细胞中对MAGE-1基因表达的干涉作用。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE-1基因寡核苷酸链,克隆到经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建RNA干涉(RNAi)质粒载体。利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后SHG-44细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干扰效果。结果重组构建的pSUPER-MAGE-1载体经双酶切电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成功插入到预计位点,并且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的SHG-44多克隆细胞MAGE-1的表达经RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干涉作用。结论成功构建了针对MAGE-1基因的siRNA表达载体,抑制SHG-44细胞中的MAGE-1分子的表达。     

RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究

目的：通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸（siRNA）表达载体，鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系U87细胞中对MAGE．1基因表达的干涉作用。方法：化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE—1基因寡核苷酸链，克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上，重组构建核糖核酸干扰（RNAi）质粒载体。利用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜，检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达，以了解siRNA的干涉效果。结果：重组构建的pSUPER—MAGE—1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析，表明寡核苷酸链成功地插入至预计位点，且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达经RT—PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测，2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论：载体的成功构建并能对U87细胞中的MAGE—1分子进行RNAi，为进一步研究MAGE—1在肿瘤中的作用，分析基因功能，展开肿瘤基因治疗奠定了基础。     

补阳还五汤临证新用三则

补阳还五汤 ,出自清·王清任《医林改错》 ,其具有益气活血、化瘀通络的功效。笔者应用此方治疗多种疑难杂症疗效显著。现将临床治验举例如下 :1　短暂性脑缺血发作〔例一〕李某 ,女 ,58岁。头晕半年 ,加重伴发作性半身麻木 10天 ,于 2 0 0 2年 2月 16日就诊。自述 10天前午睡起床后突然发作眩晕、恶心欲吐 ,伴右半身麻木不适 ,约半小时后自行缓解 ,此后间断发作。查体 :BP14 0 / 95mmHg ,心肺未见明显异常 ,舌质暗淡 ,苔薄白 ,脉沉细缓。作脑彩超示 :两侧椎动脉、基底动脉、两侧大脑前动脉供血不足。本病属中医学“中风先兆”之范畴 ,证…     

神经干细胞移植治疗脑缺血的实验模型

目的：建立一个方便、有效的动物实验模型以研究神经干细胞移植治疗脑缺血的可行性。方法：实验于2004—09／2005—10在第四军医大学全军神经外科研究所完成。健康家猫12只，随机分为缺血再灌注组（10只）和假手术组（2只），参照四血管阻塞法制作猫全脑缺血模型。先用显微手术的方法分离家猫双侧椎动脉并电凝，永久性闭塞双侧椎动脉。24h后再分离双侧颈总动脉，用动脉夹阻断血流。用含表皮生长因子的无血清培养基原代分离培养小鼠神经干细胞。将原代培养的小鼠神经干细胞移植到全脑缺血再灌注损伤模型的一侧大脑皮层中，假手术组猫大脑皮层注射同量的磷酸盐缓冲溶液；用免疫荧光技术检测移植1个月后的小鼠神经干细胞。结果：实验家猫12只，进入结果分析9只。（1）缺血再灌注组10只家猫经缺血再灌注损伤后死亡2只，1只夹闭血管后始终未出现静息脑电波，模型制作成功7只，成功率70％。假手术组家猫全部存活。缺血再灌注损伤后的家猫均出现不同程度的肢体瘫痪及平衡失调表现。饲养1周后，肢体瘫痪及平衡失调表现均逐渐有所改善。②原代培养细胞在无血清培养基中生长2—3d后，大部分细胞死亡，只有少数以单细胞形式悬浮生长。部分细胞分裂形成几个到几十个细胞的细胞团。到7—10d时可生长成有数十个到数百个细胞的细胞团，也呈悬浮生长。这些悬浮生长的细胞在含血清培养基中能够贴壁生长并部份分化成神经微丝抗原阳性的神经元及胶质纤维酸性蛋白抗原阳性的神经胶质细胞。（3）细胞移植后，家猫症状有所改善，但移植侧与对侧肢体瘫痪及平衡失调表现改善无明显差别。④免疫荧光方法检测小鼠神经干细胞移植到猫前脑后1个月仍有大量存活，部份细胞分化为神经元及神经胶质细胞，部份细胞向猫脑组织中迁移。迁移深度0．1—0．2mm。呈弥散性分布。沿针道侧壁贴附的细胞呈圆形，迁移到脑组织深部的细胞大多呈梭形。海马及对侧脑皮层等远隔部位未检测到阳性细胞存在。不同个体间未发现明显差异。⑤缺血再灌注组脑皮层及海马CA1区苏木精-伊红染色示典型的迟发性神经元坏死。结论：小鼠神经干细胞在猫全脑缺血模型中能够存活、迁移并分化；成功建立一个神经干细胞移植治疗脑缺血的实验模型。     

小鼠神经干细胞对胶质瘤趋向性实验研究

目的 探讨小鼠神经干细胞（NSCs）在体外和体内对胶质瘤细胞的趋向性。方法 将原代培养6d的小鼠NSCs悬液离心、收集备用。制备C6胶质瘤细胞、3T3成纤维细胞爬片，随后与NSCs共同培养3d。用荧光染料Hoeehst33342标记NSCs，借助立体定向技术于胶质瘤动物模型内接种NSCs，观察NSCs在胶质瘤动物模型脑内的分布情况。结果 小鼠NSCs对C6细胞有明显的趋向性。体内实验见肿瘤组织内满布标记的NSCs。结论 小鼠NSCs无论在体外或体内对胶质瘤细胞均有一定的趋向性。     

藻酸双脂钠治疗肺心病难治性心衰89例临床观察

目的：观察藻酸双酯钠(PSS)对肺心病难治性心衰的治疗作用。方法：选择89例经常规治疗无效或效果不佳的肺心病心衰病人给予PSS0．1-0．15g入液静滴10—15d。结果：PSS可降低血黏度、肺动脉压，减轻心脏负荷、改善心衰。结论：PSS为治疗肺心病难治性心衰的可行药物之一。     

红蓼果实化学成分的研究

 目的对红蓼果实的化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱及聚酰胺柱色谱的方法进行分离，化合物的结构通过光谱解析及理化性质鉴定。结果从中分离到6个化合物，分别鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)，3，5，7-三羟基色原酮(Ⅱ)，阿魏酸-对羟基苯乙醇酯(Ⅲ)，槲皮素(Ⅳ)，花旗松素(Ⅴ)，对香豆酸-对羟基苯乙醇酯(Ⅵ)。结论3，5，7-三羟基色原酮、阿魏酸-对羟基苯乙醇酯和对香豆酸-对羟基苯乙醇酯为首次从红蓼果实中分到。     

Toll样受体在寄生虫引起的肝胆管纤维化中的作用

Toll样受体是先天免疫系统中一类重要的跨膜受体。它可识别几乎所有的病原体,包括各种细菌、真菌、病毒和寄生虫。病原体相关性肝胆管纤维化是一种由各种细菌、真菌、病毒和寄生虫导致的胆管细胞损伤和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积在胆管周围而形成的一种肝脏纤维化。最近研究表明,Toll样受体在各种肝纤维化中起重要作用,包括寄生虫引起的肝胆管纤维化。本文对Toll样受体在寄生虫引起的肝胆管纤维化中作用的新进展作一概述,并对Toll样受体可能作为一个潜在的药物靶点治疗寄生虫引起的肝胆管纤维化进行讨论。     

护理干预对牙颌面畸形术前患者焦虑情绪影响研究

目的探讨护理干预对牙颌面畸形术前患者焦虑情绪的影响。方法将82例牙颌面畸形手术患者随机分为干预组(41例)和对照组(41例)。对照组行常规术前准备,以宣教方式为主;对干预组进行知识讲解、心理沟通、术前准备等护理干预措施。采用焦虑自评量表进行问卷调查。结果两组术前SAS评分明显高于常模(P0.05);手术前一天晚,干预组SAS评分明显低于对照组(P0.05)。结论根据牙颌面畸形患者的心理特点实施有针对性的、科学的护理干预措施可有效降低患者术前的焦虑情绪,提高治疗效果。