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1.
新生鼠胰岛干细胞分离、培养和分化的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探索新生鼠胰岛干细胞体外分离鉴定、培养以及体外分化的方法。方法 用胶原酶消化新生大鼠胰腺 ,将消化的组织碎片在pH7.4~ 7.6条件下经含血清RPMI 164 0及无血清RPMI164 0 (添加bFGF ,EGF ,N 2 )培养液中培养 ,观察形成类胰岛样细胞团的全过程。用胰岛素释放实验检测胰岛功能 ,免疫荧光法检测nestin的表达。结果 胰腺消化碎片培养 3 6h内 ,可见nestin阳性细胞贴壁 ,添加bFGF ,EGF ,N2后nestin阳性细胞快速增长 ,18~ 2 4d形成类胰岛样细胞团 ,并可表达胰岛素。结论 胰腺细胞中nestin阳性细胞具有胰岛干细胞特点 ,经体外培养可获得类胰岛样细胞团 相似文献
2.
重症急性胰腺炎的诊治进展 总被引:5,自引:2,他引:3
急性胰腺炎是一种常见急腹症 ,近年来发病率呈上升趋势 ,其中相当一部分发展成为重症急性胰腺炎 (severeacutepancreatitis) ,或一开始即为重症胰腺炎。重症胰腺炎病情凶险 ,病死率高。多年来对重症胰腺炎的诊断及治疗一直深受国内外学者的重视 ,现将近年来重症胰腺炎的诊治进展介绍如下。1 重症急性胰腺炎的诊断标准及严重程度评估1 .1 诊断标准 关于急性重症胰腺炎的诊断标准 ,1 996[1 ] 年贵州第六届全国胰腺外科学术会议提出定义如下 :指急性胰腺炎伴有脏器功能障碍或出现坏死、脓肿或假性囊肿等局部并发症或两者兼有。腹部体征有明… 相似文献
3.
目的:探讨精索内动静脉高位结扎术后,诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase.iNOS)的表达与生精细胞增殖和凋亡的关系。方法:免疫组化结合计算机图像分析系统检测iNOS阳性细胞光密度值;免疫组化方法检测并计算PCNA增殖指数(PCNA-Labeling index,PI);原位末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick-endlabeling method,TUNEL)检测生精细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)。分析iNOS的表达与增殖、凋亡的相关性。结果:iNOS在术后3-15d表达增强,第7d呈强阳性表达。结扎组生精细胞PCNA增殖指数(PI)明显低于对照组(P〈0.01),凋亡细胞指数(AI)明显高于对照组(P〈0.01)。结论:精索内动静脉高位结扎,iNOS的表达与生精细胞PCNA增殖指数呈负相关,与生精细胞凋亡指数呈正相关。iNOS基因表达增强是生精细胞增殖减少和凋亡增加的重要原因。 相似文献
4.
目的:探讨慢性胰腺炎K-ras基因突变的临床病理学意义。方法:9例手术切除的慢性胰腺炎的石蜡标本,用微解剖法分离慢性胰腺炎的胰导管上皮粘液细胞增生灶,提取,扩增DNA,用ASO斑点杂交检测K-ras基因第12密码子的碱基序列。对9例接受手术治疗的病人进行长期随访,结果:9例慢性胰腺炎中4例有明显的胰导管上皮粘液细胞增生,其中2例被检出GAT型突变,分别占全组和有胰管上皮粘液细胞增生的22%和505,两个突变病例分别是接受了胰体尾切除和胰头十二指肠切除手术,术后分别随访17年和10年,没有发现任何恶变迹象,结构:慢性胰腺为可以检出K-ras基因突变,发生了K-ras基因突变的慢性胰腺炎上皮粘液细胞增生灶,未必一定发生为胰腺癌,胰液、粪便、末梢血液和尿液的检测,以及胰腺组织细针刺液检出K-ras基因突变,对胰腺癌的诊断有重要参考价值,但不应视为胰腺癌的确诊依据。 相似文献
5.
肿瘤热休克蛋白70-多肽复合物诱导特异性细胞毒T淋巴细胞产生的实验研究 总被引:20,自引:1,他引:19
目的 研究肿瘤细胞的热休克蛋白 70多肽复合物 (heatshockprotein 70peptide complexes ,HSP PC70 )诱导活化肿瘤特异性细胞毒T淋巴细胞 (cytotoxicTlymphocytes,CTL)的作用及该CTL的杀瘤效应。方法 利用细胞培养 ,流式细胞技术 ,蛋白质的分离纯化技术 ,电泳技术 ,Western blot检测方法 ,T淋巴细胞的诱导及体外扩增 ,酶标技术等 ,测定肿瘤HSP70 多肽复合物诱导活化小鼠体内CTL产生的作用。结果 HcaF细胞HSP PC70的自然表达率为 6 3.5 % ,热诱导后为 75 .5 % ;HcaF细胞的HSP PC70能够诱导活化肿瘤特异性的CTL ,该CTL在效靶比例为 5 0∶1、2 5∶1、12 .5∶1时于体外对HcaF细胞的杀伤效率分别为 84.2 %± 3.2 %、47.9%± 2 .6 %和 14.8%± 3.0 % ;该CTLCD3、CD8的阳性率分别为 93%± 7% ,92 %± 8% ;将活化的CTL注入荷瘤小鼠体内可见明显的治疗作用 ,注入 10 7CTL 4次后 ,10 0 %的小鼠获长期生存。结论 肿瘤来源的HSP PC70具有强大的免疫原性 ,可活化CD8 T淋巴细胞成为肿瘤特异性的CTL ,该CTL具有较高的体外杀瘤活性和良好的治疗作用。 相似文献
6.
目的 :探讨环氧合酶 -2 (COX 2 )和P -耐药糖蛋白 (P gp)在胆囊癌组织中表达的临床病理意义和相关性。方法 :采用免疫组织化学方法 (SP法 )检测64例胆囊癌组织标本中COX 2和P gp蛋白的表达。结果 :胆囊癌组织中COX 2和P gp蛋白的阳性率分别为 71 9% ( 4 6/ 64 )和 65 6% ( 4 2 / 64 ) ,显著高于癌旁正常组织中两者的阳性率 4 8% ( 2 / 42 )和 7 1%( 3 / 42 ) ,P <0 0 5 ,P =0 0 0 6。COX 2的表达与胆囊癌临床分期、淋巴结转移及患者的预后密切相关 ,P <0 0 5 ,P =0 0 0 0、0 0 0 0、0 0 1,而与组织学分级无关 ;P gp的表达与淋巴结转移及患者的预后密切相关 ,P <0 0 5 ,P =0 0 0 2、0 0 0 1,而与组织学分级、临床分期无关 ;二者的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的大小均无关。COX 2与P gp的表达调控呈正相关 ,两者的表达水平呈正相关性 ,r =0 42 5 ,P<0 0 5。结论 :在胆囊癌中 ,COX 2、P gp参与肿瘤发生发展过程并与患者的预后有关 ,COX 2和P gp的协同作用在肿瘤多药耐药的形成中起着重要作用 ,选择性COX 2抑制剂的应用会预防肿瘤耐药并提高化疗的疗效 相似文献
7.
【目的】探讨地塞米松治疗重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰性脑病的治疗效果。【方法】将实验用大鼠随机分成3组,采用改良AhoS法制作SAP模型。A组为地塞米松治疗组:SAP制模后3h给予大鼠地塞米松治疗;B组为SAP大鼠空白对照组、C组为假手术组。分别检测各组模型制作成功后24h的血清髓鞘碱性蛋白(MBP),血清淀粉酶(AMS)、白细胞介素-6(IL-6)水平及脑水含量和脑组织细胞超微结构的变化。【结果】B组中大鼠血清AMS、MBP、IL-6、脑水含量水平显著高于C组与A组,且差异均有显著性(P均〈0.05)。C组大鼠脑细胞超微结构正常,无病变;B组大鼠神经元细胞核出现明显的边集现象,线粒体、内质网均出现不同程度的变性;A组大鼠脑细胞线粒体有轻度肿胀,细胞核、内质网无异常。【结论】地塞米松可有效的控制SAP炎症的发生扩散,降低胰性脑病发生率。 相似文献
8.
目的观察三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养的形态学变化,并对其功能进行测定。方法采用改良原位两步法门静脉胶原酶灌注分离单肝细胞,台盼蓝拒染实验观察细胞活力,利用三明治培养构型培养成年大鼠原代肝细胞,倒置显微镜下连续观察肝细胞的形态学变化,定期收集培养细胞上清液,检测所培养肝细胞的分泌及生物转化功能,并与单层胶原培养肝细胞比较。结果平均每个鼠肝可获取(2~3)×108个肝细胞,存活率为(93±3)%;体外肝细胞培养第3天,细胞活力、清蛋白分泌功能恢复到最佳状态;三明治构型培养第7天,地西泮24h代谢量达到最高峰。三明治构型培养的肝细胞形成肝索样结构,并逐渐形成胆小管网络;在培养的21d内,清蛋白分泌、地西泮代谢始终维持较高的水平;肝细胞形态维持可达28d以上。结论三明治构型肝细胞培养体系更接近于肝细胞体内生长环境,肝细胞可在较长时间内保持良好的形态结构和功能。三明治构型不仅可以应用于肝细胞的基础研究,而且为肝细胞移植和生物人工肝治疗肝衰竭奠定了一定的基础。 相似文献
9.
目的 探讨肺源性一氧化氮(NO)过度表达对急性坏死性胰腺炎(ANP)肺损伤的影响。方法 将72只成年SD大鼠随机分为三组各24只。ANP组、ANP预处理组(预处理组)逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型,对照组注射等量生理盐水。造模前30min,预处理组腹腔注射N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)10mg/kg。造模后1、3、6、12h分别处死大鼠各6只,取肺泡巨噬细胞(AM)检测NO水平及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)mRNA表达情况及TNF-a水平,并行肺组织病理学检查。结果 ANP组肺损伤随时间延长而逐渐加重;AM分泌TNF-a,NO水平逐渐升高,至6h达到高峰,12h回落。AMiNOS mRNA的表达情况与NO的变化趋势相似。预处理组各指标变化趋势与ANP组相似,但各指标均低于ANP组(P均〈0.05);肺组织髓过氧化物酶(MPO)、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量、肺组织湿/干重值逐渐升高,12h达最高值.动脉血氧分压值逐渐降低。结论 ANP发生后肺泡AM的iNOS表达增强,肺源性NO过量表达,并促进TNF-a大量分泌,加重肺损伤,应用iNOS抑制剂则能减轻肺损伤。 相似文献
10.
胰腺损伤65例临床分析 总被引:12,自引:0,他引:12
目的:探讨胰腺损伤的诊断方法和治疗原则。方法:回顾性分析了1950-2000年收治的65例胰腺损伤病人临床资料,总结了胰腺损伤的诊断和处理方法,并对术后并发症进行了分析。结果:胰腺损伤中86.15%是多发伤和腹部多脏器损伤,病情复杂,术前诊断困难,100%开放性胰腺损伤和72.5%闭合性胰腺损伤是经开腹探查证实,其治疗是针对胰管损伤的治疗。结论:对于开放性胰腺损伤、有明显腹部症状的闭合性胰腺损伤、CT检查疑有Ib、Ic、Ⅱ型胰腺损伤均应及时的开腹探查,根据胰腺损伤的程度选择合理的术式,减少术后并发症的发生。 相似文献