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目的 观察淫羊藿甙对成骨细胞中核心结合因子α1(cbfa1)蛋白和活性表达的调节,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与此过程.方法 用酶消化法分离24 h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养,经鉴定后用于实验.设立对照组、淫羊藿甙组(10 ng/ml)以及雌二醇组(10-8mol/L),分别用药物干预24 h,抽提核蛋白.利用转录因子活性ELISA法检测成骨细胞cbfa1与DNA结合的活性,Western印迹法检测成骨细胞中cbfa1蛋白的表达.将MAPK信号转导通路抑制剂U0126和SB203580分别与淫羊藿甙或雌二醇共同加入培养液中,培养24 h,同上法检测Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的变化.结果 淫羊藿甙和雌二醇均可以促进成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的提高(P<0.05).加入细胞外信号调节激酶(ERK)途径的抑制剂UO126后,可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).加入p38MAPK途径的抑制剂SB203580后,也可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).结论 淫羊藿甙和雌激素均可上调体外培养大鼠成骨细胞转录因子Cbh1的蛋白表达和结合活性.MAPK信号转导通路抑制剂可以部分阻断淫羊藿甙和雌激素对成骨细胞转录因子Cbh1蛋白表达和活性的上调作用,说明MAPK可能是淫羊藿甙发挥抗骨质疏松作用的信号转导通路之一. 相似文献
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目的 观察淫羊藿甙对成骨细胞中核心结合因子α1(cbfa1)蛋白和活性表达的调节,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与此过程.方法 用酶消化法分离24 h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养,经鉴定后用于实验.设立对照组、淫羊藿甙组(10 ng/ml)以及雌二醇组(10-8mol/L),分别用药物干预24 h,抽提核蛋白.利用转录因子活性ELISA法检测成骨细胞cbfa1与DNA结合的活性,Western印迹法检测成骨细胞中cbfa1蛋白的表达.将MAPK信号转导通路抑制剂U0126和SB203580分别与淫羊藿甙或雌二醇共同加入培养液中,培养24 h,同上法检测Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的变化.结果 淫羊藿甙和雌二醇均可以促进成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的提高(P<0.05).加入细胞外信号调节激酶(ERK)途径的抑制剂UO126后,可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).加入p38MAPK途径的抑制剂SB203580后,也可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).结论 淫羊藿甙和雌激素均可上调体外培养大鼠成骨细胞转录因子Cbh1的蛋白表达和结合活性.MAPK信号转导通路抑制剂可以部分阻断淫羊藿甙和雌激素对成骨细胞转录因子Cbh1蛋白表达和活性的上调作用,说明MAPK可能是淫羊藿甙发挥抗骨质疏松作用的信号转导通路之一. 相似文献
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淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨组织Ⅰ型胶原代谢及组织蛋白酶K表达的影响 总被引:12,自引:4,他引:12
目的 观察淫羊藿总黄酮(HEF)对去卵巢大鼠骨组织中Ⅰ型胶原蛋白代谢及组织蛋白酶K表达的影响。方法 54只雌性SD大鼠随机分成6组。假手术组为阴性对照组,其余各组切除卵巢后分别不给予或给予HEF(每日40,80和160mg/kg)和尼尔雌醇(每日0.1mg/kg)治疗12周。测定大鼠全身骨密度和尿NTx/Cr比值,采用免疫组化法和Western印迹测定Ⅰ型胶原蛋白和组织蛋白酶K的含量。结果 12周后,HEF可以增加去卵巢大鼠的全身骨密度(均P〈0.05)。HEF各组Ⅰ型胶原的表达升高,组织蛋白酶K的表达及尿中NTX/Cr水平明显下降,并呈剂量依赖关系,以高剂量组最为显著(P〈0.01)。结论 HEF可能通过促进大鼠骨Ⅰ型胶原蛋白的合成、抑制其水解吸收从而提高大鼠骨密度,改善骨质量。 相似文献
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目的 探讨雌激素和维生素D对成骨细胞MC3T3-E1增殖和分化的协同调节作用及其机制.方法 小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞用无酚红α-MEM完全培养基培养;用MTT法检测细胞增殖率;用实时荧光定量PCR法检测干预前后MC3T3-E1细胞中细胞周期相关基因[细胞周期素E( cyclin E)、增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期素依赖性激酶抑制物(Cdkn2b)]和成骨细胞分化标志物[Ⅰ型胶原( COL Ⅰ)、碱性磷酸酶(ALP)和骨桥蛋白(OPN)]基因的表达.ALP活性染色用BCIP/NBT显色法.结果 单用雌激素17β-雌二醇(E2)可促进MC3T3-E1细胞的增殖,尤其在生理浓度时作用最强,单用维生素D活性产物1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH) 2D3]对MC3T3-E1细胞的增殖无影响,1,25 - (OH)2 D3不影响E2对MC3T3-E1细胞的促增殖作用.E2上调MC3T3-E1细胞中cyclin E和PCNA的表达,同时下调Cdkn2b基因的表达,1,25-(OH)2D3单独应用不能影响上述基因表达的变化,也不影响E2对上述基因的调节作用.E2可促进MC3T3-E1细胞中分化标志物(COLⅠ、ALP和OPN)基因的表达,加用1,25-(OH)2D3后可增强此作用.结论 雌激素和维生素D作为两种重要的调节骨代谢的激素,在促进成骨细胞增殖方面可能无协同作用,而在促进其分化方面可能有协同作用. 相似文献
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宋利格 《国外医学:内分泌学分册》2005,25(5):319-321
SOST是新近发现的基因,该基因突变可导致其编码蛋白Sclerostin的异常表达,引起严重的骨代谢性疾病——Sclerosteosis和Van Buchem病。Sclerostin作为骨形态发生蛋白(BMP)的抑制物,通过竞争性与BMP受体结合,下调BMP的活性而抑制成骨,并通过与核结合因子α1(Cbfal)osterix(Osx)之间的相互作用,协调骨代谢过程。由于Selerostin抑制骨形成,今后有望成为骨质疏松的治疗靶点。 相似文献
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目的探讨绝经后2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并骨质疏松(osteoporosis,OP)患者的糖代谢、骨代谢、骨密度(bone mineral density,BMD)与饮食及运动管理的相关性。方法选择562例绝经后妇女T2DM合并OP患者,分为严格管理组(管理组)278例;一般指导组(对照组)284例。分别给予严格管理和一般管理,所有患者均为口服降糖药物,同时每天口服钙尔奇D600mg和骨化三醇0.25μg,在0、24、48 w测定糖代谢指标HbA1C、FPG,和骨代谢指标血清25羟基维生素D3(VitD3)、骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphate,BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TrAP-5b)、血清骨钙素(osteocalcin,OT),用双能X线仪测定不同部位BMD等指标,探讨经过严格管理后各指标的变化情况。结果在24w时,管理组与基线、对照组相比血糖均明显下降,48 w时更加显著,血清HbA1C管理组的不同时间分别为:8.16±1.50%、7.10±1.60%、6.01±1.59%,对照组分别为:8.46±1.65%、8.16±1.03%、8.21±1.02%,观察到无论是管理组还是对照组,糖化血红蛋白都有所下降,但管理组更加明显,组间相比差异均显著(P0.01)。同时TrAP-5b均较对照组明显下降(P0.01),VitD3、BALP、OT升高显著(P0.01),管理组腰椎、股骨颈BMD自24 w始,逐渐上升,对照组呈下降状态,48 w时,两组BMD差异显著(P值均0.01)。结论根据T2DM合并OP患者的具体情况,进行严格的饮食控制、适当的运动等个体化管理后,在原药物治疗的基础上,不但可以有效地控制血糖,同时具有减少骨量丢失,增加骨密度的作用。 相似文献
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目的观察毫米波脉冲对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的疗效。方法选择2型糖尿病并发DPN患者68例,分为治疗组和对照组。治疗组给予舒血宁针和甲钴胺针治疗的同时联合应用毫米波脉冲治疗,对照组仅给予舒血宁和甲钴胺针而不应用毫米波脉冲治疗,均连续应用2周。对每个患者分别于治疗前后检测空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、血清内皮素(endothelin,ET)和超敏C反应蛋白(hypersensitive C reactive protein,hs-CRP)以及用肌电图仪测定运动神经传导速度(motornerve conduction velocity,MCV)及感觉神经传导速度(sensory nerve conduction velocity,SCV)。结果毫米波脉冲可以提高DPN患者的神经传导速度,提高糖尿病周围神经病变的治疗效果,同时也可以降低血清ET和hs-CRP的水平。结论毫米波脉冲治疗联合应用舒血宁针和甲钴胺针治疗DPN患者具有显著疗效,并且还可以降低DPN患者血清ET和hs-CRP的水平。 相似文献