体外皮肤移植和TUNEL实验评价猕猴间充质干细胞输注对细胞免疫的影响

目的:通过给猕猴单次无预处理输注猕猴白细胞抗原(RhLA)不相合供者的骨髓来源的间充质干细胞(MSCs),观察能否抑制供受者之间的免疫反应.方法:无菌抽取MSCs供者猕猴骨髓,分离单个核细胞,用2?S的DMEM/F12培养液培养骨髓MSCs,用流式细胞术检测其表型,不同培养条件诱导MSCs多向分化以鉴定;单次无预处理输注MSCs给RhLA不相合受者,分别于MSCs输注前及输注后20、40、60 d取受者外周血淋巴细胞分别与供者及非供者皮肤体外共培养72 h,观察培养皮肤病理损伤情况,同时TUNEL法检测培养皮肤石蜡切片中凋亡细胞的比率.结果:输注MSCs后20 d,受者淋巴细胞与供者皮肤呈现减低的免疫反应,皮肤病理损伤程度较输注前减轻,凋亡细胞比例由(23.0±4.9)%下降到(12.2±1.9)%;MSCs受者与非供者之间体外皮肤病理片中凋亡细胞比例也由输注前的(22.0±2.0)%下降至(11.8±1.4)%,具有显著差异(P<0.05);输注后40 d和60 d,受者淋巴细胞无论对供者还是非供者的皮肤均产生较强的免疫反应,凋亡细胞比例增至(22.0±3.2)%、(22.0±2.5)%(供者)及(23.2±2.4)%、(24.0±2.6)%(非供者).结论:猕猴输注同种异基因MSCs后,通过体外实验可以检测到供受者之间降低的免疫反应,但是这种免疫抑制作用是短期的、可逆的.     

极重度骨髓型和肠型急性放射病细菌感染的防治

目的 探讨极重度骨髓型和肠型急性放射病细菌感染的防治经验,为今后急性放射病的治疗提供治疗经验.方法 2例急性放射病患者整个病程中均合并不同菌种的感染,通过观察患者的临床症状、影像学检查及相关的病原体检测而给予不同强度的抗细菌和真菌治疗,通过观察临床症状、影像学检查及病原学检测评价疗效.结果 2例急性放射病患者在治疗中均出现多次反复的细菌感染,同时伴有持续的真菌感染,经强有力的抗细菌和真菌治疗后细菌感染得到暂时控制,真菌感染始终没有控制.病例A于受照后14天出现急性腹膜炎,照后19天出现肺部感染,经泰能加万古霉素等抗生素治疗细菌感染得到控制,于照后33天死于真菌感染败血症和多脏器功能衰竭.病例B于受照后反复出现肺部感染,且于照后55天和照后71天出现G-杆菌败血症,经泰能加万古霉素等抗生素治疗后细菌感染均控制,但真菌感染一直存在,于照后75天因多脏器功能衰竭抢救无效死亡.结论 极重度骨髓型和肠型急性放射病患者的细菌感染呈阶段性.全身性阶段性应用高强抗生素是防治细菌感染的主要有效措施.     

骨髓间充质干细胞移植治疗硬皮病样慢性移植物抗宿主病:4例免疫机制变化

背景:骨髓间充质干细胞由于具有免疫调节能力使其能用于治疗移植物抗宿主病,特别是治疗急性移植物抗宿主病己获临床成功,但是对于治疗慢性移植物抗宿主病,特别是硬皮病样慢性移植物抗宿主病(ScGVHD)的研究报道还很少.目的:评价骨髓间充质干细胞治疗ScGVHD的有效性及安全性,同时探讨取得疗效的免疫学机制.方法:于2006-09/2008-08在解放军307医院血液移植科接受骨髓间充质干细胞髓内注射ScGVHD患者4例,男3例,女1例;中位年龄41岁.骨髓间充质干细胞髓内注射具体方法:取右髂前上棘为穿刺注射点,注射骨髓间充质干细胞悬液,4例患者的给药剂量基本控制在(1.0～2.0)×10~7个细胞/次,行间断多次给药.合并用药亦有差异,但都为治疗ScGVHD的传统药物,且用量大为减少.结果与结论:经过多次骨髓内输注骨髓间充质干细胞后,Th细胞的比例发生了明显的变化,Th1的比例上调,Th2的比例相应的下调,从而使两者达到了新的平衡点.与之相应,患者的临床症状也逐渐好转.而且在骨髓间充质干细胞治疗的随访期内,患者的生命体征和实验室检查指标均未发现异常,也未出现白血病的复发.证明骨髓间充质干细胞对ScGVHD是有治疗效果的,为临床治疗ScGVHD开辟了一个新的方法,从而能提高自血病患者骨髓移植的存活率.但由于样本数较少,需要进一步扩大规模进行临床研究,以进一步证实其安全性和疗效.     

亚急性放射病2例临床报告

目的报道2名儿童意外受192Ir迁延照射数月的诊治经过。方法 依据临床表现,生物、物理剂量估算及化验检查,综合分析明确诊断。加强对症、支持治疗,全面检查各项相关指标。结果经多单位估算,病例“A”相当于一次受照剂量1．48～2．2Gy,病例“B”相当于一次受照剂量0．66—1．08Gy,均存在稳定性畸变和非稳定性畸变。经过综合治疗后病情平稳。结论 两例均明确诊断为亚急性放射病,各项指标均提示需密切关注其潜在的远后效应。     

非清髓异基因外周造血干细胞移植治疗老年重型再障报告

目的 :探讨非清髓异基因外周造血干细胞移植 (NAST)治疗老年重型再生障碍性贫血 (SAA)的方法及疗效。方法 :采用非清髓预处理的异基因外周造血干细胞移植治疗老年 SAA患者1例。供受者 HL A配型及红细胞 ABO血型完全相合。预处理方案主要由环胞霉素 A(Cs A)、抗淋巴细胞球蛋白 (ATG)和环磷酰胺组成。用环胞霉素 A和霉酚双酯 (MMF)预防移植物抗宿主病(GVHD)。采用 STR- PCR定量方法检测供者细胞植入情况。结果 :该例老年 SAA患者顺利度过移植后造血抑制期 ,于移植后第 8天外周血 WBC升至 0 .8× 10 9/ L,第 14天血象三系恢复 ,于移植后第 14天、30天、90天及 180天时检测供者细胞植入率均为完全植入。患者未出现移植物抗宿主病 ,现己无病存活 31个月。结论 :非清髓异基因外周造血干细胞移植简便安全 ,并发症少 ,疗效好 ,为老年 SAA的治疗提供了新手段     

猕猴单倍体相合外周血造血干细胞移植后多种细胞因子mRNA表达的动态分析

本研究分析猕猴单倍体相合造血干细胞移植前后外周血单个核细胞中细胞因子（TGF-β,IL-2,IL-6,IL-10,IFN-γ,TNF-α,FAS-L）mRNA的表达并探讨这些细胞因子在急性移植物抗宿主病（aGVHD）发生和病理变化中的作用,以寻找能够早期预测和鉴别诊断aGVHD的指标.5例猕猴经非清髓预处理后接受单倍体相合外周血造血干细胞移植;半定量逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测移植前后8种细胞因子mRNA的表达,动态观察这些细胞因子在移植后aGVHD中的表达情况.结果表明：5例猕猴均成功获得造血重建.1例移植排斥,长期无病存活;其余4例为混合嵌合和完全嵌合植入,1例低比例嵌合植入经第二次;注供者外周血造血干细胞后获得高比例嵌合植入;1例发生肠道Ⅲ度GVHD.移植前后体内Th1和Th2类细胞因子都有不同程度的变化,在aGVHD期间TGF-β呈下调表达,其余均为上调表达;植入比例减低的猕猴各细胞因子也下降至移植前水平.结论：TGF-β在aGVHD发生前的下降趋势可能是GVHD预测指标,并且能够作为肠道GVHD的鉴别诊断指标.     

染色体核型分析及短串联重复序列-聚合酶链反应检测非清髓异基因造血干细胞移植造血细胞嵌合体

非清髓异基因造血干细胞移植 (ＮＡＳＣＴ)由于与传统的异基因造血干细胞移植 (ａｌｌｏ ＳＣＴ)植入方式不同 ,ＮＡＳＣＴ多通过建立稳定的嵌合体 ,逐渐过渡为供者植入[1 ] 。因此 ,ＮＡＳＣＴ后对植入状况的评估显得更为重要。为评估ＮＡＳＣＴ后植入状况 ,我们以传统的细胞遗传学分析结合我室新建立的短串联重复序列 聚合酶链反应 (ＳＴＲ ＰＣＲ) ,对我院开展的 15例ＮＡＳＣＴ患者进行了随访观察 ,现将结果报告如下。病例和方法1　病例　在我院行ＮＡＳＣＴ的血液病患者 15例 ,男 10例 ,女5例 ,年龄 2 3～ 5 6岁 (中位年龄 36岁 )。重…     

CBA法研究HLA全相合与单倍体相合移植患者血清细胞因子表达的差异性

本研究旨在探讨非清髓异基因造血干细胞HLA全相合移植（HLA-identical nonmyeloablative allogeneichematopoietic stem cell transplantation,iNAHSCT）和单倍体相合移植（HLA-haploidentical nonmyeloablative allogeneichematopoietic stem cell transplantation,hiNAHSCT）患者血清细胞因子表达的差异性,用流式细胞微珠阵列法（flow cy-tometric bead array,CBA）检测20例白血病患者移植前后不同时间点IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-ɑ、γ-IFN、IL-17浓度的变化。结果表明,IL-2分别在iNAHSCT及hiNAHST后1周、2周起表达上调,两类移植各时间点比较无差异（P〉0.05）;γ-IFN都在移植后4周起上调,两类移植后的浓度无差异（P〉0.05）;IL-4在iNAHSCT及hiNAHSCT中分别于移植后2周、移植后1周起增高,iNAHSCT的IL-4浓度高于hiNAHSCT（P〈0.01）;IL-6在iNAHSCT及hi-NAHSCT中分别在移植后1周、移植后2周起上调,移植后4周为峰值,且hiNAHSCT的IL-6浓度高于iNAHSCT（P〈0.02）;IL-10在iNAHSCT、hiNAHSCT中分别于从移植后1、2周起增高,iNAHSCT中IL-10的表达高于hiNAH-SCT（P〈0.05）。TNF-ɑ在hiNAHSCT中从移植后1周、在iNAHSCT中从移植后2周起上调;hiNAHSCT中TNF-ɑ增高的幅度高于iNAHSCT（P〈0.01）。IL-17分别于hiNAHSCT及iNAHSCT后移植后1周、移植后4周时增高,hi-NAHSCT IL-17增高的幅度高于iNAHSCT的（P〈0.05）。结论：两类移植后所检测到的细胞因子水平均明显增高,移植后4周为峰值。IL-6、TNF-ɑ、IL-17在hiNAHSCT中增高明显,而IL-4,IL-10在iNAHSCT中增高显著。     

初诊急性白血病凝血指标异常及其临床意义探讨

本研究旨在探讨初诊急性白血病(AL)(急性早幼粒细胞白血病除外)凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)、血浆凝血酶时间(TT)及D-二聚体(D-D)预测出血风险的临床意义,探究引起上述5项凝血指标异常的影响因素及相关性。回顾分析114例AL患者不同凝血指标异常情况下的出血情况,分析年龄、性别、白血病类型、白细胞及血小板计数、骨髓中原始细胞比例、细胞遗传学变化与凝血指标的关系。结果表明:初诊AL的凝血指标异常的发生率高达78.1%;凝血5项均正常的患者亦可能合并轻度出血;异常的凝血指标数量越多,出血程度越重;PT及D-D对其2级出血诊断具有一定敏感性;凝血异常发生率与初诊时骨髓中原始细胞的比例存在相关性(χ2=4.184,OR=1.021,P﹤0.05),与年龄、性别、白血病类型、白细胞及血小板计数、细胞遗传学异常无明显相关(P﹥0.05);起病时骨髓原始细胞比例与D-D值显著相关(r=0.3,P﹤0.01)。结论:AL患者的凝血指标异常的发生率高;异常的凝血指标越多,则出血程度越重,其中PT及D-D对2级出血诊断具有一定敏感性;起病时骨髓中原始细胞比例与凝血指标异常(尤其是D-D)存在显著相关性,而老年、高白细胞数及不良细胞遗传学异常与凝血异常无关;通过对PT、APTT、TT、FIB、D-D的监测,为临床判断及防治出血事件提供实验依据。     

VM26等联合方案治疗难治复发性急性白血病13例报告

ＶＭ２６等联合方案治疗难治复发性急性白血病１３例报告１００８５０北京军事医学科学院附属医院艾辉胜，王桂林，黄士敏，程锡元，孙琪云，余长林，秦茂权，乔建辉，马海英，张石作者用ＶＭ２６结合阿糖胞苛（Ａｒａ－Ｃ）、环磷酰胺等药治疗１３例难治复发性急性白血病...