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文题释义:长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA):是长度大于200个核苷酸的非编码RNA,在表观遗传调控、细胞周期调控和细胞分化调控等众多生命活动中发挥重要作用,是近年遗传学领域研究的热点对象。罗汉果皂苷V:是一种三萜糖苷,可从罗汉果提取物中分离出来,具有抗氧化、降血糖、抗癌等活性的天然化合物。前期研究中,课题组发现罗汉果皂苷V可刺激成骨细胞增殖、分化。
背景:骨质疏松是骨在进行重塑的过程中,成骨细胞的骨形成和破骨细胞的骨吸收之间的动态平衡紊乱所致。在细胞水平严格控制骨重建,对于维持骨稳态和避免发生骨质疏松有重要意义。前期研究表明1.25×10-2 g/L的罗汉果苷V可促进成骨细胞增殖、分化,其机制可能涉及LncRNA TUG1。目的:探讨LncRNA TUG1在罗汉果苷V促进成骨细胞增殖与分化中的作用。方法:采用两步酶消化法提取SD乳鼠成骨细胞,随后将细胞分为2组,分别给予0,1.25×10-2 g/L的罗汉果苷V干预,干预培养2 d后进行LncRNA基因检测;设计并合成LncRNA TUG1沉默病毒,将新提取的成骨细胞分为正常细胞对照组、罗汉果苷V干预组、罗汉果苷V+阴性病毒组、TUG1沉默组、罗汉果苷V+TUG1沉默组。按实验分组对成骨细胞进行干预处理,随后分别在2,4,6 d后通过FDA荧光染色观察成骨细胞增殖活性,干预6 d后通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色及qRT-PCR检测 TUG1在罗汉果苷V促进成骨细胞增殖与分化中的作用。结果与结论:①LncRNA基因检测表明1.25×10-2 g/L的罗汉果皂苷显著促进成骨细胞内LncRNA TUG1表达;②FDA荧光染色显示TUG1沉默可抑制罗汉果苷V促进成骨细胞增殖;②干预6 d后,碱性磷酸酶染色及茜素红染色实验均显示TUG1沉默可抑制罗汉果苷V促进成骨细胞成骨矿化;③qRT-PCR结果显示成骨分化相关基因RUNX2、BSP、OCN和COL1A1在罗汉果苷V干预组显著高表达,而在罗汉果苷V干预+TUG1沉默组则表达受抑制;④以上结果表明,罗汉果苷V通过促进LncRNA TUG1表达刺激成骨细胞的增殖与分化。
ORCID: 0000-0001-8821-633X(姚顺晗)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程 相似文献
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