分子生物学实验带教的几点体会

为顺应医学发展需要，培养高素质人才，近几年我们为本科生开设了分子生物学实验，根据几年的教学实践，总结出以下几点体会，与同行们共同探讨。（1）认真实验准备。（2）重视预实验；（3）科学的授课方式；（4）合理的应用辅助教学手段；（5）及时小结；（6）规范的实验报告。     

将科学史教育融入医学生的生物化学教学中

通过对科学史教育融入生物化学教学的探索,总结了采用的教学手段和达到的教学效果,有利于培养素质全面的军事医学科学人才.     

核受体及核受体辅活化子对芳香族化酶基因转录调控的研究

目的：研究核受体及核受体辅活化子芳香族化酶基因转录的调控,方法：酵母单,双杂合筛选,蛋白质－蛋白质相互作用分析,DNA突变,报告基因转染功能分析,迁移率改变及足迹分析等技术。结果：（1）鉴定了主导芳香族化酶基因在乳腺癌细胞中表达的启动子1,3和启动子Ⅱ的确切位置以及对这两个启动子起调节作用的沉默子（Siklencer)S1和cAMP效应要素（CRFaro)等顺式作用元件。（2）分离鉴定了能与类固醇衍生因子1（Sterodogenic Factorl,SF1)相互作用并参与芳香族化酶基因转录调控的转录因子,其中近50％的克隆编码两种新的富含脯0氨酸的核受体辅调节蛋白质,命名为PNRC（Proline-rich Nuclear Receptor Coactivators)。功能分析显示PNRC通过与SF1或ERR1相互作用,进一步增强SF1或ERR1对芳香族化酶基因启动子1,3的转录激活作用。（3）缺失突变及定点突变分析证明含SH3结合模体的23个氨基酸残基区域是PNRC分子与核受体的相互作用位点。结论：我们鉴定了主导芳香族化酶基因在乳腺癌细胞中表达的启动子及调控序列,克隆了与DNA调控序列结合的蛋白质和通过蛋白质相互作用参与芳香族化酶基因转录调控的转录因子－一种新型的核受体辅活化子PNRC。     

病例教学法在生物化学教学中的评价

第三军医大学近年在临床医学、预防医学和检验医学等不同专业五年制本科的生物化学教学中进行了病例教学法尝试和探索。通过 2 0 0名学生的问卷调查 ,结果表明 :绝大多数学生认为病例教学能激发学习兴趣 ,提高能力 ,并能引导将生化理论与临床问题相联系 ;约有 65%的学生认为病例教学不能提高学习效率。进一步分析发现 ,上述结果在不同专业的五年制学生之间没有明显差异。     

将科学史教育融人医学生的生物化学教学中

通过对科学史教育融入生物化学教学的探索，总结了采用的教学手段和达到的教学效果。有利于培养素质全面的军事医学科学人才。     

hERR1对乳腺癌细胞生长活性及ER转录激活功能的影响

目的 构建hERR1高表达的乳腺癌细胞株，研究hERR1对乳腺癌细胞株生长活性的影响及其机制。方法 PCR构建hERR1真核表达载体，转染乳腺癌细胞株，G418筛选稳定表达细胞株；MTT法研究hERR1高表达株的生长速率；瞬时转染结合CAT活性分析，研究hERR1对ER转录功能的影响。结果 筛选了hERR1高表达乳腺癌细胞株；局部高表达的hERR1在体外抑制乳腺癌细胞株的生长；hERR1以剂量依赖方式抑制ER转录激活功能。结论 局部高表达hERR1可能通过与ER竞争结合ERE，抑制ER的转录活化功能，从而抑制ER阳性乳腺癌细胞株的生长。     

hERR1在乳腺癌中的表达及其对芳香族化酶表达的调控

目的：了解hERR1在乳腺癌及癌旁组织中的表达情况，以及它对芳香族化酶基因表达的调节作用。方法：收集乳腺癌患者的临床标本，应用RT-PCR法，研究癌组织及相应的癌旁组织中hERR1的表达情况；采用瞬时转染和CAT活性分析的方法，研究hERR1对芳香族化酶基因表达的调节。结果：hERR1在癌组织中的表达明显高于相应的癌旁组织（16/26例）；hERR1以剂量依赖方式促进芳香族化酶启动子I.3活性。结论：hERR1在体内可能起到促进乳腺癌生长的作用。     

内毒素在烫伤早期大鼠骨骼肌蛋白分解代谢的研究

为了探讨严重烫伤早期负氮平衡发生机理中感染所起的作用，本文以３７％体表皮肤全层烫伤的大鼠模型，观察内毒素注射后伤肢与未伤肢比目鱼肌蛋白质分解代谢速率的变化，以及血液中和伤肢、未伤肢比目鱼肌中ＴＮＦ产生的情况。伤后７２ｈ结果表明，①烫伤肢比目鱼肌蛋白质分解代谢速率明显加快，而未伤肢与对照组比目鱼肌蛋白质分解差异不明显；②内毒素注射后伤肢和未伤肢比目鱼肌蛋白质分解代谢速率均加快，且血浆中可检测到ＴＮＦ；③内毒素注射前后的伤肢比目鱼肌中ＴＮＦ浓度均明显高于未伤肢。     

内毒素对大鼠严重体表烫伤早期骨骼肌蛋白质分解代谢的影响

为了探讨严重烫伤早期负氮平衡发生机制中感染的作用,本文以含一侧后肢的37％体表面积全层皮肤烫伤大鼠为模型,观察受伤肢体与未伤肢体比目鱼肌蛋白质分解速率变化,以及腹腔注射内毒素后的影响。伤后72h结果表明:烫伤肢体比目鱼肌蛋白质分解速率加快,而未伤肢比目鱼肌蛋白质分解速率与正常对照组相似;注射内毒素2mg/kg,结果提示:(1)内毒素可促进骨骼肌蛋白质分解速率加快;(2)注射内毒素后,伤肢局部骨骼肌分解速率并未进一步加快,未出现叠加现象。