转化生长因子β1在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达。方法 将Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成单侧肾切除Ａ组和单侧肾切除糖尿病Ｂ组，观察ＳＴＺ注射一、四周后血糖、血胰岛素水平、体重、肾重、肾重／体重及肾组织蛋白含量变化。利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测肾皮质ＴＧＦβ１、１α（ＩＶ）前胶原及纤维连接蛋白（ＰＮ）ｍＲＮＡ表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测ＴＧＦβ１蛋白水平。另外，使用荧光分光度法测     

iPLA2β通过调控铁死亡减轻高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤

目的 探讨钙离子非依赖型磷酸酯酶A2β(iPLA2β)在高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)中的表达,iPLA2β与铁死亡的关系以及iPLA2β对高糖诱导的HK-2细胞损伤的保护机制。方法 用30 mmol/L葡萄糖刺激HK-2细胞,iPLA2β质粒转染构建过表达模型,铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)和铁死亡激活剂erastin作为铁死亡对照组。干预36 h后,试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、铁含量,DCF免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)水平。Western blot法检测铁死亡指标ACSL4、GPX4、LPCAT3、TFR1的表达。结果 高糖刺激可以降低HK-2细胞内iPLA2β的表达,HK-2细胞内ROS、MDA水平升高,GSH、SOD水平降低。Western blot结果显示ACSL4、LPCAT3、TFR1表达增高,GPX4表达降低。Fer-1干预后上述指标改善。过表达iPLA2β后,可降低KIM-1表达,减轻HK-2细胞损伤。进一步研究发现,过表达iPLA2β后可抑制高糖诱导的HK-2细胞的氧化应激和铁死亡。另外,era...     

透析前注射单剂量低分子量肝素对透析器复用效率的评价

目的 评价血透前注射单剂量低分子量肝素（LMWH）与持续输注普通肝素（SH）对复用透析器效率的影响。方法 对30例慢性透析患者进行随机交叉对照研究,观察第1、4次透析的透析器纤维包裹容量（FBV）、透析前血球压积（HCT）及透析2h尿素氮、肌酐清除率;另外,利用生色底物法测定透析0h,2h,4h血浆肝素抗－Fxa水平。结果 同SH组比,LMWH组透析器复用次数增加（P＜0．05）,第4次复用透析器FBV及透析2h尿素氮、肌酐清除率无下降（P＞0．05）,SH组则下降（P＜0．05）,透析2h两组血浆肝素活性－Fxa水平差异无显著性（P＞0．05）,透析4hLWMH组高于SH组（P＜0．05）。结论 透析前单剂量注射LMWH能有效地保护复用透析器清除率,值得临床上进一步推广。     

蒿甲醚抗SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成的 实验

 目的探讨蒿甲醚（Artemether）抗SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度蒿甲醚对大鼠C6脑胶质瘤细胞株的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC₅₀)。采用立体定位仪在SD大鼠大脑皮质层接种C6脑胶质瘤细胞（1×10⁶/μl）40只,雌、雄各半;随机分为5组,每组8只。在接种第3天后,各组采用灌胃给药法连续给药10天。于接种后的第20天解剖大鼠,经活体左心室灌注4%多聚甲醛,固定肿瘤的全脑标本。在大鼠脑部接种穿刺点做冠状切口,按垂直和水平方向测量肿瘤大小。肿瘤体积=a²bπ∕6(a为肿瘤的短径,b为肿瘤的长径)。全脑标本用4%多聚甲醛固定,肿瘤组织做病理观察,免疫组化方法检测移植瘤组织微血管密度。结果各实验组血管计数分别为Ⅰ组（39±4）,Ⅱ组（29±6）,Ⅲ组（12±8）,Ⅳ组（10±5）,生理盐水组为（52±7）。各实验组血管计数均明显少于生理盐水对照组,差异有统计学意义(分别P<0.05, P<0.01)。各实验组SD大鼠原位脑胶质瘤体积较对照组显著减小。结论在一定剂量范围内,蒿甲醚具有明显抑制SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成作用;蒿甲醚抑制原位脑胶质瘤生长和转移的机制之一是透过血脑屏障抑制脑胶质瘤血管生成。     

高糖刺激的巨噬细胞源外泌体对小鼠肾组织中TGF-β1/Smad3通路的影响作用

目的探讨高糖刺激的巨噬细胞源外泌体对C57小鼠肾组织中TGF-β1/Smad3通路的影响作用。方法动物分组为NG-Exo组(正常糖刺激的巨噬细胞外泌体组),MC-Exo组(甘露醇刺激的巨噬细胞外泌体组),HG-Exo组(高糖刺激的巨噬细胞外泌体组)。将不同糖刺激下巨噬细胞分泌的外泌体通过尾静脉注射到雄性SPF级C57BL/6小鼠体内,并于8周后收集尿液及肾脏标本,通过尿白蛋白试剂盒检测尿蛋白排泄率,HE染色和PAS染色观察肾小球系膜细胞增生和基质扩张程度,并计算系膜扩张指数。免疫组化检测小鼠肾脏内巨噬细胞CD68浸润及细胞外基质Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)与纤连蛋白(FN)的表达,Western blot检测肾组织中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和细胞外基质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Col-Ⅳ、FN以及TGF-β1/Smad3通路蛋白表达变化。结果 HE染色和PAS染色显示HG-Exo组小鼠肾组织系膜增殖程度增高,系膜扩张评分明显高于NG-Exo组和MC-Exo组;免疫组化显示HG-Exo组小鼠肾组织中巨噬细胞CD68及细胞外基质Col-Ⅳ...     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾脏足细胞相关蛋白Nephrin表达的影响及机制

目的探讨白芍总苷对糖尿病大鼠肾脏足细胞相关蛋白Nephrin蛋白表达的影响及机制。方法建立链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病模型,将模型大鼠随机分糖尿病组与TGP(50,100,200mg·kg-1.d-1灌胃)给药组,另设正常对照组。8wk末检测大鼠血糖、24h尿白蛋白排泄率(AER)变化,应用间接免疫荧光法检测肾组织Nephrin分布、West-ern杂交检测肾组织Nephrin、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与NF-κB-p65蛋白表达。结果模型组大鼠24hAER明显高于给药组,TGP治疗组大鼠24hAER明显减低。免疫荧光显示对照组肾小球Nephrin呈线状均匀分布;糖尿病组表达明显减少、呈颗粒状不均匀分布;TGP治疗组Nephrin表达增加,呈线状及颗粒状分布。Westernblot显示模型组肾组织Nephrin蛋白表达明显低于对照组,TGP治疗组表达增加;模型组肾组织TNF-α与NF-κB-p65蛋白表达明显高于对照组,TGP治疗组呈剂量依赖性降低它们的表达。结论TGP降低糖尿病大鼠尿蛋白机制可能部分与增加肾小球Nephrin表达有关。     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织Nephrin与Podocin表达的影响及机制

目的探讨霉酚酸酯(Mycophenolate mofetil,MMF)对糖尿病大鼠肾组织Nephrin与Podocin蛋白表达的影响及机制。方法建立链脲佐菌素诱导的单侧肾切除大鼠糖尿病模型,将模型大鼠随机分成糖尿病组(DM组)与MMF给药组(DM+MMF组,10mg·kg-1.d-1灌胃给药),另设对照组(C组)。8wk末检测血糖、24h尿白蛋白排泄率(AER)变化,通过免疫组化方法检测肾组织ED-1表达,Westernblot方法检测肾组织Nephrin、Podocin、白细胞介素-1(IL-1)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达。结果DM组大鼠尿AER明显高于C组(P<0.01),DM+MMF组大鼠尿AER明显低于DM组(P<0.05)。DM组大鼠肾小球ED-1阳性细胞数明显高于C组(P<0.01),DM+MMF组肾小球巨噬细胞浸润明显低于DM组(P<0.05)。DM组肾组织Nephrin与Podocin表达较C组分别下降80.2%与65.1%,MMF可明显恢复肾组织Nephrin与Podocin表达(P<0.01)。DM组肾组织IL-1与TNF-α表达较C组分别增加2.8倍与3.8倍,MMF可明显降低肾组织IL-1与TNF-α表达(P<0.01)。结论MMF可能通过恢复糖尿病大鼠肾组织Nephrin与Podocin蛋白表达减少尿白蛋白排泄。     

尿蛋白测定方法与IgA肾病进展的相关研究

目的探讨IgA肾病患者尿蛋白肌酐比、尿白蛋白肌酐比、24 h尿蛋白定量之间的关系,并分别评估三者和IgA肾病临床及病理的关系,从而预测IgA肾病的进展。方法收集2017年5月至2018年4月在安徽医科大学第一附属医院行肾脏活检确诊为IgA肾病的患者资料,记录患者尿蛋白肌酐比、尿白蛋白肌酐比、24 h尿蛋白定量、肾小球滤过率、血压、牛津分型等指标,研究尿蛋白肌酐比、尿白蛋白肌酐比和24 h尿蛋白定量三者之间的关系,并探讨三者和血压、肾小球滤过率、牛津分型等之间的关系。结果 IgA肾病患者的尿蛋白肌酐比、尿白蛋白肌酐比、24 h尿蛋白定量三者存在密切相关性,其中尿蛋白肌酐比和尿白蛋白肌酐比具有最高的相关性(r_s=0.929,P0.01),尿蛋白肌酐比、尿白蛋白肌酐比、24 h尿蛋白定量均和肾小球滤过率、牛津分型T、C存在明显相关性(P0.05)。而有无高血压,牛津分型M、E、S和以上三者之间的关系无统计学差异(P0.05)。结论 IgA肾病患者的尿蛋白肌酐比、尿白蛋白肌酐比和24 h尿蛋白定量之间密切相关,三者和肾小球滤过率、牛津分型T、C均存在明显相关性。     

腹膜透析相关性真菌性腹膜炎易感因素及预后分析

目的：探讨腹透相关性真菌性腹膜炎（ FP）易感因素及预后。方法回顾性分析20例次FP临床资料,与同期收治的腹透相关性细菌性腹膜炎（BP）比较,分析FP的易感因素及预后。结果腹透相关性腹膜炎共400例次,FP占5．0％;FP组血红蛋白低于BP组;FP组中,45％患者近1个月内有腹腔或全身使用抗菌药物史,高于BP组（15％）。20例次FP中1例治愈,15例拔管,4例自动出院。 FP组腹膜透析退出率及患者病死率均明显高于BP组。结论严重贫血,腹腔或全身使用抗菌药物是FP发生的高危因素,FP预后不良,尽早拔管可能降低病死率。     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾组织Txnip、Trx与ASK1表达的调节作用

目的：了解白芍总苷( TGP)对糖尿病大鼠肾组织硫氧还蛋白相互作用蛋白( Txnip)、硫氧还蛋白( Trx)与凋亡信号激酶1(ASK1)表达的影响,探讨TGP对糖尿病肾组织Trx系统调节作用。方法将链脲佐菌素( STZ)诱导的糖尿病大鼠随机分为模型组、TGP [50、100、200 mg/(kg·d)]给药组,另取正常大鼠为对照组,8周后测定大鼠尿白蛋白排泄率( UAER)。应用免疫组化、Western blot法及实时定量PCR法检测大鼠肾组织Txnip、Trx与ASK1表达。结果实验8周后TGP[50、100、200 mg/(kg·d)]给药组及对照组大鼠UAER水平均低于模型组(P<0．01);免疫组化和(或)West-ern blot法显示TGP [50、100、200 mg/(kg·d)]给药组及对照组大鼠肾组织Txnip、ASK1表达低于模型组( P<0．05,P<0．01),而Trx高于模型组(P<0．05,P<0．01);实时定量PCR显示TGP [50、100、200 mg/(kg·d)]给药组及对照组Txnip mRNA低于模型组(P<0．01,P<0．05),Trx mRNA高于模型组(P<0．01,P<0．05)。结论糖尿病肾病大鼠肾组织存在Trx系统异常,TGP对糖尿病大鼠肾组织保护作用可能与抑制Txnip表达、提高Trx表达有关。