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1.
四引物突变特异性扩增系统法检测巨噬细胞移动抑制因子基因-173位点单核苷酸多态性分布 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨中国浙江地区汉族人群巨噬细胞移动抑制因子(macmphage migration inhibitory factor,MW)基因-173位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分布。方法收集浙江地区142名无血缘关系健康个体的静脉血,提取DNA,分别应用四引物突变特异性扩增系统(amplification refractory mutation sysntem,ARMS)法和限制性片段长度多态性.PCR方法对MIF基因-173位点SNP多态性进行分型,并将PCR产物克隆及测序鉴定。结果MIF基因-173位点检测到3种基因型,其基因型分布皆符合Hardy-Weinberg平衡定律。四引物ARMS法和限制性片段长度多态性-PCR两种方法结果完全一致。统计分析显示,中国汉族人MIF基因-173位点等位基因和基因型频率分布与欧洲白人差异有统计学意义(P〈0.01),与日本人群的差异无统计学意义(P〉0.05)。结论四引物ARMS法是一种准确、快速和经济的SNP测定方法。MIF基因-173位点等位基因频率分布具有种族的差异性。 相似文献
2.
目的 探讨黏质沙雷菌分离株的整体耐药特点,研究其对碳青霉烯类药物耐药的主要机制.方法 收集2007至2010年从宁波市第一医院不同病区分离(剔除重复菌株)黏质沙雷菌247株,用Vitek2 -Compact及配套革兰阴性杆菌药敏卡(GNS)检测其药敏情况,对筛选出的20株耐碳青霉烯类菌株进行PCR检测其耐药基因.结果 黏质沙雷菌对头孢曲松、氨曲南、环丙沙星的耐药率较高,分别为70.4%( 174/247)、64.8% (160/247)、57.4% (142/247);对阿米卡星、庆大霉素、亚胺培南、美罗培南的耐药率较低,分别为:3.5%( 8/229)、5.4%( 13/241)、5.9%(14/237)、8.1% (20/247).PCR检测20株对碳青霉烯类抗生素耐药的黏质沙雷菌中,1、7、12和16号的AmpC染色体基因表达是阴性参考菌株的98.3、102.3、121.5、87.3倍;共有12株黏质沙雷菌分离株同时携带CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和KPC-2型碳青霉烯类酶.黏质沙雷菌所携带的CTX-M以CTX-M1、CTX-M2、CTX-M9为主;2株菌携带有SHV基因;2株菌携带有SME基因;2株菌携带有TEM基因;5株菌膜孔蛋白基因ompC和ompF均缺失;仅1株ompC基因缺失;2株菌ompF基因缺失.结论 黏质沙雷菌对β内酰胺类药物耐药的原因比较复杂,以产β内酰胺酶为主.开展对耐药菌株的进化和多耐药基因的研究,有利于合理应用抗菌药物,降低抗生索对耐药菌的选择压力及控制耐药菌株的蔓延. 相似文献
3.
目的:探讨中国浙江地区汉族人群中IFN-γ基因 874位点多态性分布,分析其与大肠癌的相关性.方法:应用突变特异性扩增系统(ARMS)- PCR对健康者132例和大肠癌患者92例IFN-γ基因 874位点多态性进行分析,并将PCR产物克隆及测序鉴定.结果:大肠癌患者IFN-γ 874位点AA基因型频率为70.6%,显著高于正常人中的57.6% (P<0.05).进一步分析显示IFN-γ 874位点AA基因型与患者的年龄、性别、肿瘤部位、Dukes分期无关.结论:IFN-γ 874位点AA基因型可能与大肠癌的发生相关. 相似文献
4.
5.
目的分析ICU患者中输血相关性移植物抗宿主病(TA_GVHD)的发病情况并对影响因素进行探讨。方法女性患者输血前后自身对照,采取静脉血样,用PCR技术进行TA_GVHD插入基因片段及人Y染色体特异基因荧光检测。结果26例患者中,有14例患者输血后出现Y染色体特异基因片段检测阴性而同时TA_GVHD插入基因片段检测阳性的结果,发生率为53.8%。结论ICU中TA_GVHD发生率较文献报道明显增多,可能与ICU中危重症患者的免疫功能低下等有关。 相似文献
6.
副流感嗜血杆菌生物型在呼吸道感染中分布的初步研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 了解副流感嗜血杆菌的各种生物型在呼吸道各种疾病中的分布情况。方法 自临床各呼吸道疾病病人选取分离菌析,经API NH进行菌种鉴定的194株副流感嗜血杆菌,按其对吲哚、尿素、鸟氨酸的利用情况进行分型。计算各种生物型在各种疾病中的百分率。结果 194株副流感嗜血杆菌中,副流感Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅵ,Ⅶ,Ⅷ型的分离率分别为39.7%、30.9%、13.4%、4.6%、7.2%、3.6%、0.5%。肺炎患者以副流感Ⅱ型为主52%(38/73),其次为副流感Ⅰ型31.5%(23/73);而上感患者、支气管炎患者、急性气管炎患者、其他疾病均以副流感Ⅰ型为主。结论 不同的疾病副流感嗜血杆菌的生物型分布各不相同,引起呼吸道感染的主要为副流感嗜血杆菌Ⅰ,Ⅱ型。 相似文献
7.
目的了解副流感嗜血杆菌的各种生物型在呼吸道各种疾病中的分布情况.方法自临床各呼吸道疾病病人选取分离菌株,并经API NH进行菌种鉴定的194株副流感嗜血杆菌,按其对吲哚、尿素、鸟氨酸的利用情况进行分型.计算各种生物型在各种疾病中的百分率.结果 194株副流感嗜血杆菌中,副流感Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、型的分离率分别为39.7%、30.9%、13.4%、4.6%、7.2%、3.6%、0.5%.肺炎患者以副流感Ⅱ型为主52%(38/73),其次为副流感Ⅰ型31.5%(23/73);而上感患者、支气管炎患者、急性气管炎患者、其他疾病均以副流感I型为主.结论不同的疾病副流感嗜血杆菌的生物型分布各不相同.引起呼吸道感染的主要为副流感嗜血杆菌Ⅰ、Ⅱ型. 相似文献
8.
目的 制备氨基糖苷-3″-腺苷酰基转移酶[AAD(3″)]特异性抗血清,并探讨其在检测第1类整合子8种不同可变区启动子(PcS、PcH2、PcH1、PcW、PcS-P2、PcH2-P2、PcH1 -P2和PcW-P2)下游基因盒中aadA2基因表达水平的应用价值.方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增aadA2基因,并克隆至表达载体pET19b中,诱导表达并纯化带组氨酸标签的重组AAD(3″)蛋白,免疫大耳白兔制备抗AAD(3″)特异性抗血清.以制备的抗AAD(3″)抗血清为一抗,用免疫印迹法(WB)检测不同可变区启动子下游基因盒中aadA2基因的翻译水平,用微量肉汤稀释法检测链霉素对含不同可变区启动子及其下游aadA2基因盒的大肠埃希菌JM109的最低抑菌浓度(MIC).结果 成功构建重组的AAD(3″)蛋白表达质粒pET1 9b-aadA2,经测序确认转化大肠埃希菌BL21( DE3)获得1株高表达可溶性重组AAD(3″)蛋白的工程菌株,发酵后用镍柱纯化获得纯度>90%的重组AAD(3″)蛋白,免疫大耳白兔获得效价> 1∶100 000的抗AAD(3″)特异性抗血清.WB检测8种不同可变区启动子下游aadA2基因翻译产物AAD(3″)蛋白的表达水平,设定启动子PcW下游AAD(3″)蛋白的相对表达水平为1,重复3次测得启动子PcS、PcH2、PcH1、PcS-P2、PcH2 -P2、PcH1-P2及PcW-P2下游AAD(3″)蛋白相对表达水平依次为12.9±2.3、9.1±1.0、2.0±0.4、16.0±1.3、14.1±1.3、10.5±0.7、8.9±1.7,且不同可变区启动子下游AAD(3″)蛋白的相对表达水平差异具有统计学意义(F=32.421,P<0.01).微量肉汤稀释法重复3次测得链霉素对含启动子PcS、PeH2、PcH1、PcS-P2、PcH2-P2、PcH1 P2、PcW、PcW-P2及其下游aadA2基因重组质粒的大肠杆菌JM109的MIC平均值依次为256、256、64、128、32、128、4、64 mg/L,表明不同可变区启动子下游aadA2基因的表达水平不同可赋予宿主细菌对链霉素产生不同水平的耐药.结论 成功纯化出可溶性重组AAD(3″)蛋白,免疫大耳白兔获得高效价的抗AAD(3″)特异性抗血清,为进一步研究整合子中整合酶基因与可变区基因盒表达之间的相互关系奠定基础.不同可变区启动子下游耐药基因盒的表达水平明显不同,赋予宿主细菌对相应抗菌药物的耐药水平明显不同,因此在对临床菌株进行第1类整合子分子流行病学调查时,应重视可变区启动子分类方面的研究. 相似文献
9.
肠球菌的分离率及耐药性分析 总被引:6,自引:0,他引:6
肠球菌是人和动物肠道的正常菌群,但肠球菌也可定植在健康人上呼吸道、胆道和阴道等部位,在需氧的革兰阳性球菌中,肠球菌是仅次于葡萄球菌的重要医院感染致病菌。近年来,由于肠球菌对多种抗菌药天然耐药,对几乎所有临床常用的抗菌药能够产生获得性耐药,其已成为多重耐药的重要条件致病菌和医院感染的常见病原菌,由其引起的感染有逐年上升趋势,且对多种抗生素包括高剂量的氨基糖甙类抗生素的耐药性逐步升高,尤其耐万古霉素肠球菌的出现已引起广泛重视。因此我们对我院临床分离的264株肠球菌进行分类和耐药性分析,以期为临床防治肠球菌感染提供帮助,现报道如下。 相似文献
10.
乙酸钙-鲍氏不动杆菌临床分离与耐药性的7年监测 总被引:2,自引:2,他引:2
目的了解1998~2004年乙酸钙-鲍氏不动杆菌在临床标本中的分离情况及其耐药趋势,为临床感染的预防和治疗提供参考资料。方法回顾分析1998~2004年间所有标本中乙酸钙-鲍氏不动杆菌的分离率,菌株在标本和病区的分布以及对14种抗菌药物的耐药率。结果乙酸钙-鲍氏不动杆菌的分离率有逐年升高的趋势,从1998年的0.18%增至2004年的1.48%;其在呼吸道标本的分离率最高(70.58%),其次是尿液(9.42%)、血液(4.63%);病区分布以重症监护室最高(47.28%),乙酸钙-鲍氏不动杆菌对14种抗菌药物的耐药率,1998年仅有氨曲南>50%,而到2004年仅头孢哌酮/舒巴坦的耐药率<50%,其他13种均>50%;其耐药率均呈递增的趋势,耐药性增幅列前3位分别为:头孢他啶11.1%~88.9%、亚胺培南0~64.8%、复方新诺明0~64.0%。结论乙酸钙-鲍氏不动杆菌的临床分离率在增加,其对多数抗菌药物有较高的耐药性,且耐药率呈逐年上升趋势,尤其是对亚胺培南耐药率的快速增长,应引起临床抗感染治疗的高度重视。 相似文献