足细胞的再生和增殖

足细胞是肾小球蛋白质滤过屏障的关键细胞之一，细胞损伤临床上即表现为蛋白尿。足细胞是一种终末分化的细胞，通常不能再次进入细胞循环进行分裂增生。若足细胞数量因细胞脱落、坏死或凋亡而减少，邻近的细胞也不能通过细胞增殖来替代或修补。缺乏足细胞覆盖而裸露的基底膜即和包氏囊黏连，形成肾小球局灶节段性硬化。所以足细胞数量减少可能是最终导致肾小球球性硬化的一个关键的因素。     

初始保守治疗的特发性膜性肾病患者的临床调查和短期蛋白尿预后分析

目的:了解特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)初始保守治疗的患者临床和病理特点,并观察12个月蛋白尿的变化及其相关危险因素。方法:我们回顾分析了2004年5月~2012年9月在我院诊断为IMN并完成至少12个月随访的患者的临床和病理资料。所有患者分为初始免疫抑制治疗组(IIT组)和初始保守治疗组(CT组)。其中CT组患者中,随访期间维持保守治疗者分为A组,加用免疫抑制治疗者为B组。结果:共139例IMN患者完成了12个月随访,其中CT组的患者56例(40.29%)。和IIT组患者比较,CT组患者年龄和血浆白蛋白较高,24 h尿蛋白定量和血胆固醇水平更低,P值均0.001。病理中肾小球C3沉积的水平更少,毛细血管袢和系膜细胞及基质增生程度较轻,肾小管间质病变程度更轻。随访12个月时两组患者的24 h尿蛋白分别是(2.07±2.88)vs(1.95±2.40),P0.05。在56例初始保守治疗的患者中,37例在随访12个月内维持保守治疗(A组),19例在随访至第2~9月时开始免疫抑制治疗(B组)。我们发现A组患者发病初期24 h尿蛋白水平,血总胆固醇水平更低,e GFR和白蛋白水平更高。病理中A组患者毛细血管袢增生程度更轻。随访12个月时,A组和B组患者的疾病完全和部分缓解率差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析提示血胆固醇水平是初始保守治疗的膜性肾病患者12个月疾病是否缓解的独立危险因素。结论:对低危的IMN患者初始使用保守治疗,短期(12个月)不会导致蛋白尿加重。在初始保守治疗的患者中,血浆胆固醇水平是疾病12个月缓解的危险因素。     

不同预处理方法对提取尿液脱落细胞mRNA质量的影响

目的 探索合适的处理尿标本的方法获得尿脱落细胞mRNA。方法 比较尿液容量、尿液标本冻存时间、处理方式对提取尿液脱落细胞RNA的产量与质量的影响,并进行qPCR的试验。结果 40 ml尿液标本组及10 ml尿液标本组RNA总量均值分别为886.94±222.93 ng及211.22±62.01 ng,两组A_260nm/A_280nm比值分别为1.80±0.10和1.77±0.09; 尿液标本量与RNA总量相关(t=3.604,P=0.002),不同尿液标本量RNA质量差异无统计学意义(t=0.708,P值>0.05)。实时离心提取及冰冻保存尿液7天后提取两种预处理方法RNA总量分别为886.94±945.84 ng及881.50±829.02 ng,A_260nm/A_280nm比值分别为1.80±0.10及1.80±0.87; RNA总量与A_260nm/A_280nm比值差异无统计学意义(t=-0.221～0.085,P值均>0.05)。直接冰冻尿液标本与TRIzol保存沉渣细胞两种预处理方法RNA总量分别为637.81±525.24 ng及639.86±535.42 ng,A_260nm/A_280nm比值分别为1.84±0.13及1.83±0.96; RNA总量与A_260nm/A_280nm比值差异无统计学意义(t=-0.47～0.293,P值均>0.05)。尿脱落细胞mRNA中可以检测到足细胞的标记蛋白WT-1,podocin和synaptopodin的基因表达。结论 尿液标本量是提取脱落细胞RNA量的关键因素,-80℃低温冻存尿标本7天或Trizol预处理冻存均对提取尿液沉渣细胞RNA数量和质量无影响。