Numb 基因负性调节 CXCR4表达抑制膀胱癌细胞 BIU-87的增殖和迁移

目的：研究 Numb 基因对趋化因子受体4（CXCR4）表达的影响以及对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响。方法实验分为3组：实验组（在膀胱癌细胞 BIU-87中转染 Numb-ORF 表达质粒）、阴性对照组（转染空载体）和空白对照组（未行转染处理）。使用荧光定量 PCR 和 Western blotting 检测各组细胞 Numb 和 CXCR4的表达。使用 MTS 法和 Transwell 小室法检测细胞增殖和迁移能力。结果实验组、阴性对照组和空白对照组中 Numb 基因表达水平分别为31.044±3.350、4.401±0.567和4.287±0.341,差异有统计学意义（F ＝183.418,P ＝0.000）;实验组、阴性对照组和空白对照组的 CXCR4表达水平分别为0.344±0.167、0.996±0.148和1.010±0.106,差异有统计学意义（ F ＝21.355,P ＝0.002）。细胞增殖检测中实验组、阴性对照组和空白对照组的48 h 吸光度值分别为0.615±0.057、0.987±0.063和0.957±0.066,差异有统计学意义（F ＝33.210,P ＝0.001）。迁移实验中,实验组、阴性对照组和空白对照组的穿膜细胞数分别为（164.667±19.858）个、（670.133±38.760）个和（667.533±27.610）个,差异有统计学意义（F ＝286.788,P ＝0.000）。结论 Numb 可能通过负性调节CXCR4表达抑制膀胱癌细胞的增殖和迁移。     

MicroRNA-34a通过Notch1对膀胱肿瘤细胞株T24增殖的影响

目的 探讨膀胱肿瘤细胞株中microRNA-34a(miR-34a)与Notch1的相互作用关系以及过表达miR-34a对T24细胞增殖的影响.方法 通过生物信息学软件预测miR-34a与Notch1的作用位点,并通过荧光素酶实验验证两者的直接调控关系.在膀胱癌细胞株T24过表达miR-34a,采用实时定量PCR和蛋白印迹检测Notch1表达水平的变化;分别通过新型四唑氮盐(MTS)实验和流式细胞术检测细胞增殖、凋亡以及细胞周期的变化.结果 T24细胞中荧光素酶报告基因实验显示,miR-34a在膀胱癌细胞中能与报告基因结合,使萤火虫荧光强度减弱(P=0.006).过表达miR-34a后,T24细胞内源性Notch1的mRNA水平和蛋白水平均明显下调;T24细胞生长明显受抑(P＜0.001),并呈现一定时间依赖性;凋亡率增加(P=0.003),G0-G1期细胞显著增多(P=0.002).结论 过表达miR-34a能通过降低靶基因Notch1的表达,抑制膀胱肿瘤细胞的增殖.     

Numb基因上调对人肾细胞癌细胞周期和增殖的影响

目的 研究Numb基因上调对人肾细胞癌的细胞周期和增殖能力的影响及相关机制.方法 选取人肾细胞癌细胞786-O为研究对象,使用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组,设置阴性对照及空白对照组.采用荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹技术检测各组Numb基因和肿瘤增殖抗原Ki-67的表达;采用流式细胞技术检测细胞周期,计算G0/G1期细胞比例、增殖指数(PI)和S期分数(SPF);以MTS法检测细胞的增殖活力.结果 实验组Numb的相对表达水平为(18.97±1.49),显著的高于阴性对照组(3.34±0.41)和空白对照组(3.21±0.39);实验组Ki-67的相对表达水平为(4.31 ±0.58),明显少于阴性对照组(10.35±0.84)和空白对照组(9.89±0.73),差异有统计学意义(P＜0.01).细胞周期检测:实验组中G0/G1期细胞的比例(％)为60.47±1.58,明显高于阴性对照组(49.67±1.97)和空白对照组(52.52±2.47)(P＜0.01).实验组的PI和SPF均低于两对照组(P＜0.01).增殖检测:实验组在24、48、72h的吸光度(A)值均低于两对照组(P＜0.01).结论 在786-O细胞中上调Numb基因可以抑制Ki-67的表达,减低细胞的PI和SPF,促使细胞发生G0/G1期阻滞,抑制细胞的增殖活力,实验结果提示Numb基因在肾细胞癌中可能发挥抑癌因子作用.     

3D腹腔镜系统在泌尿外科手术中的应用体会

目的:探讨3D腹腔镜系统在泌尿外科手术中的应用。方法:回顾性分析2013年11月15~29日进行的3D腹腔镜手术6例患者的临床资料,包括前列腺癌根治性切除术2例,肾部分切除术1例,肾癌根治术1例,肾上腺部分切除术1例,输尿管癌根治术1例。统计分析其手术时间、术中出血量、术后排气时间、术后拔管时间以及术后住院天数等数据。结果:6例患者手术均获得成功。手术时间80~180min,其中2例前列腺癌根治术手术时间分别为148min和180min,出血量分别为210ml和350ml。肾部分切除术手术时间为90min,出血量50ml。肾癌根治术手术时间为115min,出血量20ml。肾上腺部分切除术手术时间为80min,出血量15ml。左输尿管癌根治术手术时间为128min,出血量90ml。患者术后1~2天恢复胃肠道功能,随访1个月无明显并发症。结论:3D腹腔镜系统较传统腹腔镜技术视野更清晰,立体效果更强,在术中提供了良好的解剖层次,降低了手术难度,从手术时间及出血量方面均优于传统的2D腹腔镜,且不增加手术费用,有应用推广前景。     

过表达Numb基因对人膀胱癌5637细胞周期和增殖的影响

目的：：探讨 Numb 基因对人膀胱癌细胞周期和增殖能力的影响及相关机制。方法：选取人膀胱癌细胞5637为研究对象，采用 Numb-ORF 表达质粒转染细胞为实验组，设置阴性对照和空白对照组。采用荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹技术检测各组中 Numb 基因和细胞周期蛋白 D1（Cyclin D1）的表达；采用流式细胞技术检测各组的细胞周期；采用酶标仪检测细胞在490nm 的吸光度值，评价各组细胞的增殖活力。结果：实验组 Numb的△CT 值为1.58±0.41，阴性对照组为5.66±0.53，空白对照组为5.81±0.47，差异有统计学意义（F ＝77.39， P ＝0.00）；实验组 Cyclin D1的△CT 值为4.92±0.73，阴性对照组为2.59±0.33，空白对照组为2.45±0.26，差异有统计学意义（F ＝11.70，P ＝0.01）。实验组中 G0／G1期细胞的比例（％）为49.76±7.07，明显高于阴性对照组的36.52±3.32和空白对照组的38.21±2.06，差异有统计学意义（F ＝7.17，P ＝0.03）。增殖实验中，实验组24 h 的吸光度值为0.35±0.08，明显低于阴性对照组0.52±0.06和空白对照组0.55±0.04（F ＝9.03，P ＝0.02）。结论：Numb 基因可以提高 G0／G1期细胞比例，抑制膀胱癌细胞增殖，其机制可能是通过抑制 Cyclin D1表达实现。     

3D腹腔镜下水刀肾部分切除术的临床效果观察和体会

目的:观察医用水刀在3D腹腔镜下肾部分切除术中的应用效果.方法:回顾性分析2015年4月至12月在我院行3D腹腔镜下水刀肾部分切除术的16例患者的临床资料.结果:16例患者手术均顺利完成,肿瘤均完整切除.手术时间65～140 min(中位时间85 min),估测出血量50 ～ 200 ml(中位150 ml).所有病例均未输血,均未发生严重并发症.术后随访5 ～ 12个月,经CT检查均未见肿瘤复发或进展.结论:应用水刀进行3D腹腔镜下肾部分切除术是一种安全、有效、可行的手术方式.     

3D腹腔镜的运用现状

如今,3D技术已经走进我们的生活.2010年上映的电影〈阿凡达＆gt;,以其革命性的3D视觉效果征服了全世界观众的眼球.同时,伴随着3D电视走进千家万户,人类已经进入了3D视觉时代.在医疗卫生领域,3D技术也发挥了有益的作用,比如3D多排螺旋CT、3D多普勒超声以及3D腹腔镜技术[1-3],为医生的诊断、评估和治疗提供了更加全面、直观、准确的依据.最新一代的3D腹腔镜技术于2012年下半年引进我国,我院泌尿外科属于国内同行中首批开展此项新技术的科室,通过自身经验总结和综合国内外文献,我们从以下几个方面讨论3D腹腔镜技术.     

Notch1、Notch2及c-Myc在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的:探讨Notch信号受体Notch1、Notch2及c-Myc在肾透明细胞癌中的表达与意义。方法:通过实时定量PCR及western-blot方法检测27例肾透明细胞癌及瘤旁组织中Notch1、Notch2及c-Myc的表达水平,并采用相关性分析检验Notch1、Notch2的表达与c-Myc的表达相关性。结果:Notch1、Notch2及c-Myc在肾癌组织中表达水平明显高于相应的癌旁组织(P<0.001),相关性分析表明在肿瘤组织中c-Myc与Notch2的mR-NA水平呈正相关(r=0.629,P<0.001),而与Notch1的mRNA水平无相关(P=0.389)。结论:Notch信号通路及c-Myc的异常高表达可能与肾透明细胞癌的发生发展有关,而且c-Myc可能作为Notch信号通路的下游靶基因,发挥促癌的作用。