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基因重组的连接反应物通过转化产生大量转化菌 ,只有通过高敏感和高特异的筛选方法才能挑选和鉴定出含有正确目的基因的重组体。此类方法的基本原理基于 :① 196 7年 ,Ullmann等发现大肠杆菌带有完整的近操纵基因区段 β D半乳糖甘酶阴性的突变体和LacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体之间互补 ,实现对 5 溴 4 氯 3 吲哚 β D半乳糖(X gal)分解显色形成蓝色菌落 ;② 1975年 ,Grun stein和Hogness介绍一种在硝酸纤维素膜上原位裂解细菌菌落并释放DNA非共价结合于滤膜的方法 ,结合于滤膜的DNA可与相应的放射性标记的核酸探针进行杂… 相似文献
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已知糖尿病早期肾小球滤过率(GFR)升高,并与糖尿病肾病的发展有关[1,2].肾小动脉血管平滑肌的收缩改变了肾血流动力学是引起GFR升高的原因之一.探索糖尿病肾血管平滑肌收缩的调控因素可为进一步阐明糖尿病发生发展机制打下良好的基础.肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达增加和活性升高是血管平滑肌收缩的启动因素之一[3].糖尿病个体是否存在MLCK表达的变化尚未见报道.本研究在复制大鼠糖尿病模型的基础上,观察胰岛素对糖尿病大鼠肾MLCK表达的影响. 相似文献
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质粒的制备 总被引:1,自引:7,他引:1
随着人类基因组计划的顺利进行 ,一个更为广阔且具活力和应用前景的研究领域人类基因组后计划已形成 ,并吸引全世界顶尖科学家和实验室参与。人类基因组后计划的研究内容主要涉及功能基因的分离、鉴定 ,其编码蛋白质的生物学功能及其可应用研究。本领域所采用的研究方法主要包括分子生物学、蛋白质组学和功能蛋白质学等实验方法。其中 ,分子生物学常用实验方法在研究中使用最广 ,可变性最大 ,且可选择最多。为提高我校广大科学研究者对分子生物学技术和实验方法有一较全面的了解和知晓本校可用的资源 ,特邀请本校分子生物学中心试验室根据其研究工作撰写有关分子生物学常用实验方法的介绍 ,并陆续在本刊上发表 ,供大家参考 相似文献
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目的 分析女性肺癌的临床特征.方法 对52例女性肺癌患者的临床资料进行回顾性分析.结果 女性肺癌发病高峰年龄集中在50~69岁;多数患者临床表现以咳嗽、痰中带血、胸痛等为首发症状;病灶部位:周围型占67.3%,中央型占32.7%.肿瘤类型中以腺癌多见(占82.7%);分期以Ⅲb~Ⅳ期患者多见(占69.2%);转移部位以纵隔及锁骨上淋巴结、骨、肝等处多见;治疗主要采用手术、化疗或放疗.结论女性肺癌临床表现不典型,远处转移多见,应高度重视女性肺癌的诊断和治疗. 相似文献
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血管新生与骨肿瘤发生及其治疗的分子机制 总被引:1,自引:0,他引:1
血管新生 (angiogenesis)是指活体组织在已存在的微血管床上芽生 (sprout ing)出新的以毛细血管为主的血管系统的过程。这是体内最为基本和重要的生理过程 ,也是维持机体稳定与完整性及组织和器官功能的重要方式。对血管新生的重要性的认识始于 2 0世纪 70年代初Folkman教授对肿瘤的研究。近年来 ,人们对血管新生调控因子如血管内皮细胞生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor ,VEGF)家族、成纤维细胞生长因子 (fibroblastgrowthfactor,FGF)… 相似文献
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单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)是一种简便、敏感有效的鉴定扩增DNA序列变化的技术.相同长度的单链DNA因其序列不同(甚至单个碱基不同),形成的构象相异,电泳时泳动速度不一.PCR产物经变性后进行单链DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳时,靶DNA中若有单个碱基替换等改变时,会出现泳动变位(mobility shift).PCR-SSCP的最主要优点是简单,在不同的系统中突变检出率达70%~95%以上,其主要不足可能是漏检一些突变.作者根据本实验室对多抑癌基因(tumor suppressor gene,TSG)p53突变的检测,介绍PCR-SSCP的实验过程. 相似文献
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