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目的 探讨肝缺血/再灌注损伤过程中肝和小肠细胞凋亡的发生及褪黑素的保护作用.方法 90只Wistar大鼠(190~210 g,6~7周龄)随机分为褪黑素处理组(Mel),酒精溶媒对照组(A1c)和生理盐水对照组(NS).通过阻断门静脉左支、左肝动脉和肝总管左支60 min建立肝左叶缺血/再灌注模型,之后分别于复流后的30、60和120 min收集血清、肝脏和小肠的标本进行检测.利用自动生化分析仪检测血清中的ALT和AST,利用酶联免疫吸附法检测血清中的TNF-α,利用比色法检测肝脏及小肠组织中的MDA含量,通过免疫组织化学方法对肝脏和小肠组织的Caspase-3进行染色,利用原位末端标记技术(TUNEL)对肝脏和小肠的凋亡细胞进行染色,利用透射电镜观察组织中的凋亡小体.结果 Mel组在复流后所有时点的ALT均显著低于两个对照组(P<0.05);Mel组在复流120 min时的AST显著地低于两个对照组(P<0.05).Mel组在复流后所有时点的TNF-α含量及线粒体中的MDA含量均显著低于两个对照组(P<0.05).Mel组在复流后120 min的Caspase-3的积分光密度(IOD)显著地低于两个对照组(P<0.05).另外Mel组在复流后所有时点的TUNEL染色的IOD值均显著地低于两个对照组(P<0.05).结论 肝缺血/再灌注可以升高血清中TNF-α的水平和线粒体中的MDA含量,增加肝及小肠细胞的Caspase-3的表达和凋亡的发生.褪黑素减轻肝缺血/再灌注损伤的机制可能与抑制自由基损伤线粒体,进而抑制细胞凋亡有关. 相似文献
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目的研制八联盘检测肉类食品中多种兽药残留物。方法将应用胶体金免疫层析法制备好的8种试纸条组装成多联检测盘,评价该盘检测兽药残留物的灵敏度、准确度、特异性和稳定性。结果通过在空白样本中加标,确定了不同样本(猪肉、牛肉和羊肉)中14种兽药的检测限;60份样本的八联盘检测结果与仪器确证结果一致,检出禁用药和限用药各6份,符合率达100%;检测盘中的试纸条与类似药物之间无交叉反应,特异性好;八联盘在室温条件下可保存至少12个月,稳定性较好。结论该八联盘操作简便、快速、检测结果准确、稳定,为兽药残留现场监控提供了有力工具。 相似文献
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目的 通过酵母双杂交实验及免疫共沉淀技术验证人联苯样水解酶(BPHL)与缺失核定位信号的人急性早幼粒细胞白血病(PML)基因的coiled-coil的结构域(PML-C)蛋白之间的相互作用。 方法 将表达PML-C诱饵蛋白及BPHL靶蛋白的重组质粒pGBKT7-PML-C及pACT2-BPHL共转化AH109酵母菌,通过酵母双杂交实验验证两者在活细胞内的相互作用。构建能在人胚肾293细胞中表达带HA标签的PML-C融合蛋白的重组载体pCMV-HA-PML-C,经酶切鉴定正确后,和表达带myc标签的BPHL融合蛋白的重组真核表达载体pCMV-myc-BPHL,共转染人胚肾293细胞,利用免疫共沉淀技术验证BPHL与PML-C间的相互作用。 结果 pGBKT7-PML-C及pACT2-BPHL质粒共转化AH109酵母菌后,可见蓝色阳性克隆。构建的重组表达载体pCMV-HA-PML-C及pCMV-myc-BPHL经双酶切鉴定正确后共转染HEK293细胞,抗HA多克隆抗体沉淀HA-PML-C相互作用蛋白复合物后,用抗c-myc单克隆抗体进行Western blot检测,可以检测到myc-BPHL的表达蛋白。 结论 成功构建了pCMV-HA-PML-C及pCMV-myc-BPHL融合蛋白真核表达重组载体,利用酵母双杂交实验及免疫共沉淀技术证实BPHL与PML-C之间存在着相互作用。 相似文献
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肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是一种以腹痛或腹部不适为主要症状(排便后可缓解),常伴排便习惯改变和(或)粪便性状改变,且缺乏可解释症状的形态学改变和生化异常的功能性肠病[1]。据发达国家的统计,IBS在消化科专科门诊的患者中占三分之一以上[2],该病影响患者生活质量,消耗大量医疗资源,但其病因及发病机制目前尚未完全阐明。尽管 相似文献
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