三磷酸腺苷对红细胞形态的影响

静态时,正常人体红细胞呈双凹面园盘状。由于具备了这种形状,红细胞拥有足够的表面积摄取氧气,能够在高剪切应力(sh-earing force)条件下产生弹性形变。双凹面园盘状是红细胞生存和生理功能的形态基础。红细胞形态及其变形能力的改变可能产生于外界因素的影响,例如药物刺激,环境渗透压和pH改变等,也可能是细胞自身引起的。对于成熟红细胞而言,它缺乏任何细胞器,细胞内也未发现微管状物质,因此红细胞膜和胞浆中的代谢内容物的改变将对细胞形态产生根本性的影响。     

1例复合杂合突变所致的凝血因子Ⅻ缺乏症家系分析

目的 分析1个遗传性凝血因子Ⅻ缺乏症家系表型及基因突变情况,探讨其分子致病机制.方法 对先证者及其家系进行活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fib)、凝血因子Ⅻ活性(FⅫ:C)和凝血因子Ⅻ抗原(FⅫ:Ag)测定.用DNA直接测序法进行FⅫ基因突变检测.采用ClustalX-2.1-wi...     

IVS J-4delGTTG和c. 1325del导致的凝血因子Ⅺ缺陷症CSCD

目的对一个遗传性凝血因子Ⅺ(coagulation factor Ⅺ, FⅪ)缺陷症家系进行调查和基因测序分析, 探讨其分子机制。方法检测先证者及其家系成员血浆的活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplatin time, APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time, PT)和凝血因子Ⅺ活性(FⅪ activity, FⅪ∶C)等指标进行表型诊断;对先证者F11基因的15个外显子及其侧翼序列进行PCR扩增和Sanger测序, 用克隆测序分析单体型中的变异位点, 并分析其家系成员相应序列。采用ClustalX-2.1软件分析变异点同源序列的保守性;用Mutation Taster预测变异位点的危害性;用Swiss-PdbViewer软件构建变异蛋白模型。结果先证者APTT延长为76.0 s, FⅪ∶C活性仅有4%。基因测序发现其F11基因存在第10内含子g.18141;8144delGTTG(IVS J-4delGTTG)及第12外显子c.1325del(p.Leu424Cysfs*8)复合杂合变异。其妹妹也存在该复合杂合变异;其父亲和哥哥为IVS J-4delGTTG变异杂合子;其母亲、大儿子和小儿子为c.1325del变异杂合子。同源性分析结果显示Leu424为高度保守。两个变异点评分结果分别为0.982和1.000, 预示两种变异为有害变异。模型分析显示c.1325del移码变异后Leu424变异为Cys424, 与Pro421间多了一条氢键连接, 导致蛋白质结构发生改变。结论 IVS J-4delGTTG和c.1325del杂合变异与该家系FⅪ水平减低有关。     

结肠黏膜vimentin降解在溃疡性结肠炎发病机制中的作用

背景 溃疡性结肠炎发病率呈逐年上升趋势,但发病机制不明,众多基于基因水平的研究不能完全阐明蛋白质水平的变化,差异蛋白质组学是从蛋白质水平研究溃疡性结肠炎发病机制的新方法 .目的 运用蛋白组学方法 探讨溃疡性结肠炎的发病机制.方法 选取12例活动期溃疡性结肠炎患者及12例正常肠黏膜为研究对象,提取组织蛋白做2-D电泳,银染,胶图分析找差异点,质谱鉴定蛋白质,最后Western-blot验证差异点.结果 差异蛋白组学共鉴定出蛋白质30个(上调16个,下调14个),成功选取其中的vimentin,并得到Western-blot方法 的验证.结论 溃疡性结肠炎患者肠黏膜存在vimentin降解片段蛋白水平的高表达,这种改变可能在在溃疡性结肠炎的发病机制中起重要作用.     

血浆蛋白质组研究进展

血浆中的蛋白质有近万种,分别来源于各种不同的组织与细胞,这些蛋白质参与机体的凝血、免疫、小分子物质包括激素等的运输、营养等一系列生理或病理过程。应用蛋白质组学的研究方法,全面研究血浆中蛋白质组改变,可为研究疾病的发病机制、寻找特异的生物标志物、药物开发提供一种全新的方法,为疾病的诊断、治疗和预后提供更全面的信息。     

小鼠血浆去除白蛋白前后的双向凝胶电泳分析

目的　探索应用DEAE CibacronBlue 3GA去除小鼠血浆白蛋白的条件。方法　在DEAE CibacronBlue 3GA与小鼠血浆结合的不同时间点取样 ,SDS PAGE及蛋白质定量检测去除白蛋白的效果 ,对最佳结合时间点所取的血浆行双向凝胶电泳 ;软件分析去除白蛋白前后双向电泳显示的蛋白质斑点变化。结果　DEAE CibacronBlue 3GA与小鼠血浆结合 40min时 ,小鼠血浆中80 %的白蛋白被去除 ,双向电泳显示的蛋白质点由处理前的 (2 11± 19)个增加到 (3 92± 11)个 ;其中蛋白表达量增加 3、5、10、2 0倍的斑点数目分别为 13、6、6、5。结论　DEAE CibacronBlue 3GA可以有效去除小鼠血浆中的白蛋白 ,该方法可以应用于实验外科领域小鼠血浆蛋白质组的研究。     

IVS J-4delGTTG和c.1325del导致的凝血因子Ⅺ缺陷症

目的:对一个遗传性凝血因子Ⅺ(coagulation factor Ⅺ,FⅪ)缺陷症家系进行调查和基因测序分析,探讨其分子机制。方法:检测先证者及其家系成员血浆的活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplatin time,APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time,P...     

一个复合杂合突变导致的遗传性凝血因子V缺陷症家系

目的:探讨一个遗传性凝血因子Ⅴ（FⅤ）缺陷症家系的分子致病机制。方法:DNA直接测序法分析先证者F5的全部外显子、侧翼序列、5′和3′端非翻译区及家系成员（共3代11人）相应的突变位点区域。通过CAT法检测凝血酶生成量;用ClustalX软件分析突变位点的保守性;用MutationTaster、PolyPhen-2、P...     

再生障碍性贫血患者红细胞能量水平和膜ATP酶活性的观测

本文采用高效液相色谱法和酶学方法测定了24例再生障碍性贫血患者红细胞内腺苷酸水平和膜 ATPase 活性。实验表明,患者红细胞的能量水平和 Ca~(2+)-ATPase 活性均低于正常人。这些异常可能导致患者红细胞的生理功能损害。     

肝阳上亢证病人红细胞内核苷酸水平

用高效液相色谱法测定肝阳上亢、阴虚阳亢二证型病人及健康人的红细胞内核苷酸水平。结果表明,肝阳上亢组 ATP,ADP,NADP 含量高于健康人组及阴虚阳亢组,AMP,GTP,NAD含量与健康人组差别无显著性。