一氧化氮诱导HL-60细胞凋亡及其机制探讨

目的：观察一氧化氮对人类白血病细胞是否具有致凋亡作用，并研究Bcl-2基因和P53基因在此过程中的作用。方法：将不同浓度的外源性一氧化氮供体亚硝基铁氰化钠与HL-60细胞作用，观察其作用的时间效应和剂量效应；用MTT法观察NO对细胞的抑制作用，用透射电镜观察细胞结构改变，用DNA凝胶电泳、细胞DNA含量、DNA末端标记、Annexin-V/PI法等分析细胞凋亡，并用流式细胞法进一步观察在NO作用过程中凋亡调控因子Bcl-2和P53蛋白及线粒体膜蛋白表达变化。结果：NO能抑制HL-60细胞生长，并在一定的剂量范围内显示作用时间和剂量的量效关系；典型的细胞形态改变、DNA片段化、亚G1峰检出、DNA末端标记、Annexin-V/PT^-表达增加等证实。NO能诱导白血病细胞凋亡；在此过程中，P53蛋白表达上调，而Bcl-2蛋白表达下调，线粒体膜蛋白表达增加。结论：NO对HL-60细胞有强的致凋亡作用，Bcl-2和P53参与NO诱导HL-60细胞凋亡的调控。     

G1细胞及多项尿检指标在血尿诊断中的相关性研究

目的探讨血尿患者多项尿检指标联合诊断提高鉴别肾小球性血尿和非肾小球性血尿的准确性.方法利用普通光镜对血尿样本中红细胞形态观察及G1细胞计数并进行尿干化学分析,研究各项指标及联合指标在肾性血尿(经肾活检证实)和非肾性血尿中的相关性.结果肾小球性血尿和非肾小球性血尿中尿G1细胞、尿蛋白、尿pH、尿隐血结果比较均有显著性差异(P＜0.05).结论尿G1细胞联合尿蛋白、尿PH、尿隐血等尿检指标综合判断血尿来源有望提高血尿鉴别诊断的准确性.     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的临床分离及耐药谱分析

目的 了解耐亚胺培南铜绿假单胞外国菌在医院内的流行情况及耐药谱的特性。以利用临床合理选用抗生素。方法 用Vitek32型全自动细菌分析系统检测铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性。用E-test法检测对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果 1997-199年对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌占当年分离到铜绿假单胞菌株数分别为：3.8%(8/58)、18.7%(23/123)、19.3%(53/275)。在三年中分离到耐亚胺培南菌株,其来源按标本分以痰液最多见,分别为：62。5%（5/8）、60.9%(14/23)、73.6%(39/53),按病区分以重症监护病房（ICU）最高,分别为：37.5%(3/8)、43.5%(10/23)、43.4%(23/53)。耐亚胺培南铜绿假单胞菌对其他种类抗生素敏感试验显示,其耐药率对氨基糖苷类中的妥布霉素相对较低,其次为哌拉西林和复合三代头孢菌不中的头孢哌酮/舒巴坦,结论 耐亚胺培南铜绿假单胞菌在医院内的分离率有随年度增加趋势。三代头孢菌素中的头孢哌酮/舒巴坦。结论 耐亚胺培南铜绿假单胞菌在医院内的分离率有随年度增加趋势。其主要来源为ICU病房,主要致病部位为呼吸道。治疗此类细菌感染宜参考实验室的细菌药敏结果选用敏感的氨基糖苷类或哌拉西林。     

副流感嗜血杆菌生物型在呼吸道感染中分布的初步研究

目的 了解副流感嗜血杆菌的各种生物型在呼吸道各种疾病中的分布情况。方法 自临床各呼吸道疾病病人选取分离菌析,经API NH进行菌种鉴定的194株副流感嗜血杆菌,按其对吲哚、尿素、鸟氨酸的利用情况进行分型。计算各种生物型在各种疾病中的百分率。结果 194株副流感嗜血杆菌中,副流感Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅵ,Ⅶ,Ⅷ型的分离率分别为39．7％、30．9％、13．4％、4．6％、7．2％、3．6％、0．5％。肺炎患者以副流感Ⅱ型为主52％（38／73）,其次为副流感Ⅰ型31．5％（23／73）;而上感患者、支气管炎患者、急性气管炎患者、其他疾病均以副流感Ⅰ型为主。结论 不同的疾病副流感嗜血杆菌的生物型分布各不相同,引起呼吸道感染的主要为副流感嗜血杆菌Ⅰ,Ⅱ型。     

副流感嗜血杆菌生物型在呼吸道感染中分布的初步研究

目的了解副流感嗜血杆菌的各种生物型在呼吸道各种疾病中的分布情况.方法自临床各呼吸道疾病病人选取分离菌株,并经API NH进行菌种鉴定的194株副流感嗜血杆菌,按其对吲哚、尿素、鸟氨酸的利用情况进行分型.计算各种生物型在各种疾病中的百分率.结果 194株副流感嗜血杆菌中,副流感Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、型的分离率分别为39.7%、30.9%、13.4%、4.6%、7.2%、3.6%、0.5%.肺炎患者以副流感Ⅱ型为主52%(38/73),其次为副流感Ⅰ型31.5%(23/73);而上感患者、支气管炎患者、急性气管炎患者、其他疾病均以副流感I型为主.结论不同的疾病副流感嗜血杆菌的生物型分布各不相同.引起呼吸道感染的主要为副流感嗜血杆菌Ⅰ、Ⅱ型.     

Sysmex XE-2100血液分析仪光学血小板检测的应用价值

目的探讨Sysmex XE-2100血液分析仪光学血小板(PLT-O)检测的应用价值.方法用电阻抗法、光学法和手工法同时计数血小板(PLT),以手工法结果为参考,分别与电阻抗法和光学法进行比较.结果 3种方法各组段均数之间的t检验差异无显著性(P＞0.05).在相关性方面,电阻抗法、光学法与手工法比较,二组段(PLT<100×109/L、PLT≥100×109/L)的相关系数(r)分别为0.868 3、0.984 6和0.989 5、0.992 1,均高度相关(P<0.01).但在PLT<100×109/L时电阻抗法r值明显偏低,其中部分标本结果还存在较大差异.结论 Sysmex XE-2100血液分析仪PLT-O检测方法在对低值PLT(<100×109/L)计数和一些血液科标本的检测时更有意义.     

乙酸钙-鲍氏不动杆菌临床分离与耐药性的7年监测

目的了解1998~2004年乙酸钙-鲍氏不动杆菌在临床标本中的分离情况及其耐药趋势,为临床感染的预防和治疗提供参考资料。方法回顾分析1998~2004年间所有标本中乙酸钙-鲍氏不动杆菌的分离率,菌株在标本和病区的分布以及对14种抗菌药物的耐药率。结果乙酸钙-鲍氏不动杆菌的分离率有逐年升高的趋势,从1998年的0.18%增至2004年的1.48%;其在呼吸道标本的分离率最高(70.58%),其次是尿液(9.42%)、血液(4.63%);病区分布以重症监护室最高(47.28%),乙酸钙-鲍氏不动杆菌对14种抗菌药物的耐药率,1998年仅有氨曲南>50%,而到2004年仅头孢哌酮/舒巴坦的耐药率<50%,其他13种均>50%;其耐药率均呈递增的趋势,耐药性增幅列前3位分别为:头孢他啶11.1%~88.9%、亚胺培南0~64.8%、复方新诺明0~64.0%。结论乙酸钙-鲍氏不动杆菌的临床分离率在增加,其对多数抗菌药物有较高的耐药性,且耐药率呈逐年上升趋势,尤其是对亚胺培南耐药率的快速增长,应引起临床抗感染治疗的高度重视。     

四嗪二甲酰胺抑制肝癌细胞株HepG2增殖并诱导细胞凋亡的研究

目的观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肝癌细胞株HepG2增殖并诱导细胞凋亡作用。方法将不同浓度的ZGDHu-1与HepG2细胞在体外培养,用台盼蓝染色、MTT法、5′-溴-2′脱氧尿苷(B rdu)-ELISA法观察ZGDHu-1对HepG2细胞增殖的抑制作用;用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin-V/PI双标记、Ho-echst33258荧光染色和ELISA法测定DNA片段等技术检测细胞凋亡。结果ZGDHu-1能抑制HepG2细胞增殖和活力,呈现作用时间和剂量的量效关系。HepG2细胞与ZG-DHu-1作用后,大部分细胞阻滞于G2-M期;出现典型的细胞形态改变,DNA片断化,亚G1峰检出并增加,Annexin V+/PI-表达升高,细胞内DNA片段含量增加,Hoechst33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等均证实ZGDHu-1能诱导HepG2细胞凋亡。结论ZGDHu-1能抑制HepG2细胞增殖,并可诱导其细胞凋亡。     

荧光定量RT-PCR法检测胃癌患者腹腔洗出液中CEA-mRNA含量的临床意义

目的探讨用荧光定量RT-PCR法检测胃癌患者腹腔洗出液中癌胚抗原mRNA(CEA-mRNA)含量的临床意义.方法采用荧光定量RT-PCR法检测98例胃癌患者及10例胃溃疡患者(对照组)手术中病灶切除前后腹腔洗出液中CEA-mRNA的含量,对不同病期及切除前后所测得的CEA-mRNA含量进行统计分析.结果本法可检测的下限约为10copies/ml,上限约为1.0×108copies/ml.检测所得荧光信号基线的循环数(CT值)与CEA-mRNA拷贝数对数值的相关系数为-1.0,错误率为0.0731.对照组腹腔洗出液CEA-mRNA的含量少于10copies/ml.胃癌患者腹腔洗出液中CEA-mRNA的含量病灶切除前为(0.0～5.62)×106copies/ml,几何均数为(172.11±63.07)copies/ml;切除后(256.4～4.67)×107copies/ml,几何均数为(606.32±76.21)copies/ml,两组的差别有显著性意义(P=0.008);切除前Ⅰ a Ⅰ b期与Ⅱ期、Ⅱ期与Ⅲa Ⅲb期、Ⅲa Ⅲb期与Ⅳ期比较,其CEA-mRNA含量的差别均有显著性意义(P=0.007、0.015、0.027);同样,切除后各期比较,其差别也均有显著性意义(P=0.004、0.012、0.023).切除前后未侵及浆膜与侵及浆膜者比较,其CEA-mRNA含量的差别有显著性意义(P=0.0008、0.0007);切除前后有淋巴结转移者与未转移者比较,其CEA-mRNA含量的差别有显著性意义(P=0.045、0.044);不同分化程度者切除前后其CEA-mRNA含量的差别均无显著性意义(P=0.17、0.12).结论荧光定量RT-PCR法检测腹腔洗出液中CEA-mRNA的含量有较好的线性范围,在临床应用中,对病期的确定、预后的估计以及术后的治疗方案制定均有一定的价值.