两种DNA抽提方法的操作过程及影响因素分析

DNA是存在于细胞核和线粒体内，携带遗传信息，决定着细胞和个体遗传型的生物信息大分子。随着现代分子生物学研究的不断深入，聚合酶链反应、基因芯片、DNA分子杂交等分子生物新技术的发展，以DNA为材料的分子生物学实验广泛地应用于移植组织配型、法医学、基因诊断、基因克隆等医学领域。而DNA的提取质量直接影响后继的研究与应用，目前常见的方法有盐析法和吸附柱法。尽管各种商品化DNA抽提试剂盒步骤简单、操作方便，易于推广应用，但抽提过程中技术人员的正确操作、专业知识及实践经验对抽提质量有着至关重要的影响。我们实验室自2002年以来，对14000多名中华骨髓库造血干细胞志愿者捐献的血样进行了DNA水平的HLA分型，     

粒细胞特异性NA抗原的检测及临床意义

1 粒细胞特异性NA抗原1960年Lalezari等在研究中性粒细胞减少症的新生儿患者时,报告了第一例中性粒细胞抗体并将其相应的抗原命名为NA1(neutrophil antigen),这种抗体能够凝集50%的白种人粒细胞.     

新生儿溶血病患儿母亲血清中IgG亚类水平的临床意义

目的:探讨IgG抗体亚类与新生儿溶血病发病的关系。方法:用ELISA法对89例有无新生儿溶血病新生儿母亲的血清及22例献血员的血清中IgG亚类进行定量分析。结果:发病患儿与不发病新生儿的血型及其母亲血清IgG抗体的效价均存在显著性差异(P<0.05)。IgG各亚类的水平在发病组、未发病组的母体及正常对照组之间,存在显著性差异(P<0.05)。结论:ABO血型系统中,母体血清中IgG1和IgG3的水平与新生儿溶血病的发病有关。     

残余危险度在输血传播疾病中的应用

残余危险度是输血传播疾病中较常用的一项指标，反映了受血者经输用“合格”的阴性血而可能成为病毒感染者的危险度。本文介绍残余危险度的概念及计算，举例说明残余危险度的应用，简介世界各国开展残余危险度的研究情况及降低残余危险度的方法。     

宁夏回族HLA-A，B，DRB1基因座遗传多态性和单倍型分析

目的:研究宁夏回族自治区地区回族人群HLA-A,B,DRB1基因座的等位基冈及其组成的单倍型频率分布特征.方法:采集宁夏回族122名无关健康个体静脉血,应用聚合酶链反应一序列特异性引物方法对其HLA-A,B和DRB1基因座进行基冈分型.直接计数法统计基因频率,采用最大数学预期值算法计算HLA单体型频率.结果:122名宁夏回族个体的HLA-A,B,DRB1基因座分别检出14,29,13个等位基因.高频等位基因分别为HLA-A*02;HLA-A*11:HLA-A*24;HLA-A*03,HLA-B*35;HLA-B*46;HLA-B*13;HLA-B*51,HLA-DRB1*15;HLA-DRB1*09;HLA-DRB1*07;HIA-DRB1*12.高频单倍型分别为HLA-A*02-B*46:HLA-A*11-B*60;HLA-A*02-B*51;HLA-B*46-DRB1*09;HLA-B*13-DRB1*07;HLA-B*58-DRB1*17;HLA-A*02-B*46-DRB1*09;HLA-A*02-B*58-DRB1*17;HIJA-A*02-B*13-DRB1*12.结论:宁夏回族自治区回族人群HLA基凶座的等位基因和单倍型具有较高的遗传多态性.HLA-A*01-B*37,HLA-A*30-B813,HLA-A* 02-B*50,HLA-B*31-DRB1-10在该民族具有极强的连锁不平衡.     

西安地区回族中性粒细胞NA抗原基因分型

NA（neutronhilantigen）是人类粒细胞中最常见的中性粒细胞特异性抗原之一，分为NA_1和NA_2。其分型对研究民族遗传特性及粒细胞相关疾病有重要意义。国外目前对NA抗原多态性及其与疾病相关性的研究较多[2-7]。而国内所见文献报道甚少。我们参照国外文献，采用多聚合酶链反应一序列特异性引物（PCR－SSP）方法在DNA水平对中国西北地区回族人NA基因抗原多态性分布进行研究，现报道如下。1材料与方法1．1选择对象随机选取回族无血缘关系健康个体104例。1．2仪器与试剂PCR仪（UKHYBAID公司Omn－E自动扩增仪）；紫外照射仪（上海…     

新的HLA-A等位基因A~*0290的认定

目的确认1个中国人群中的HLA新等位基因。方法使用PCR-SSP和测序为基础的分型技术,分析确认HLA-A的新等位基因与A*02010101的差异。结果先证者HLA-A位点有1个等位基因的核苷酸序列与已知的HLA等位基因均不同,该基因和A*02010101的差异在第2外显子区域的292位碱基C>G,导致74编码子CAC>GAC,编码的氨基酸由组氨酸(His)变成天冬氨酸(Asp)。结论该基因为HLA新的等位基因,2005年10月被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-A*0290。     

粒细胞特异性NA抗原的检测及其临床意义

1　粒细胞特异性抗原 NA概述　 1 960年 Lalezari等在研究中性粒细胞减少症的新生儿患者时 ,报告了第一例中性粒细胞抗体 ,这种抗体能够凝集 5 0 %的白种人粒细胞 ,并将其相应的抗原命名为 NA1 ( neutrophil antigen)。 1 974年Lalezari和 Radel发现了其等位基因 NA2 ,两者构成双等位基因系统。在二十世纪 70年代陆续发现了其它中性粒细胞所具有的粒细胞特异性抗原 :NB1、NB2、ND1和 NE1等 ,过去报告的 NC1 ,最近被证实和 NA2是同一抗原 [1 ]。在这些抗原中与临床关系最密切的是 NA抗原 ,分子基础较为清楚的也是 NA抗原 ,因此近来…     

DNA测序确认人类白细胞抗原新等位基因A*0330及二例家系调查分析

人白细胞抗原(HLA)作为人类的1个遗传标记,具有多样性和种族特异性[1].随着中华骨髓库志愿捐献者日益增多,不断有新的等位基因在中国人中被发现[2-6],但同时在同一地区发现数例相同新等位基因并且做家系调查的较少.我们在1例骨髓移植患者常规HLA分型中发现的新等位基因,经DNA测序,2007年5月31日被WHO人白细胞抗原因子委员会命名为HLA-A*0330(ID号:HWS10004714-EF602747).随后在造血干细胞自愿捐献者中又发现1例,经DNA测序确认与首例患者等位基因相同.我们对2个家系进行调查分析,现报告如下.