CLINITEK－200型尿十项分析仪应用与临床分析

ＣＬＩＮＩＴＥＫ－２００型尿十项分析仪应用与临床分析黄国英，陈少华，冯福英（中国人民解放军第４７６医院检验科，福州洪山桥３５０００２）ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＡｎａｌｓｉｓｏｆＣＬＩＮＩＴＥＫ－２００ＵｒｉｎｅＣｈｅｍｉｓｔｒｙＡ...     

女性尿红细胞参考值及其在泌尿生殖系统肿瘤诊断中的意义

粪潜血试验作为一种大肠癌初筛方法被广泛应用于临床,并在许多国家用于无症状人群的筛查。近年国外有人提出用显微镜血尿来筛查泌尿生殖系统肿瘤,尤其是40岁以上、有吸烟史、有致癌物质接触史者[1,2]。为探讨女性泌尿生殖系统肿瘤患者尿红细胞的变化,我们观察了498例女性泌尿生     

17株耐亚胺培南肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌相关耐药基因及分子流行病学分析

目的了解17株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌相关耐药基因及分子流行病学状况。方法采用Hodge试验检测碳青霉烯酶表型;采用PCR法检测碳青霉烯酶、I类头孢菌素酶(AmpC)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因,进行测序及网上比对确定基因型;采用肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)和多位点序列分型(MLST)对菌株进行同源性和遗传相关性分析。结果 15株肺炎克雷伯菌检出KPC-2、TEM-1、SHV和CTX-M型基因,SHV12和CTX-M-24为主要基因亚型;2株大肠埃希菌检出KPC-2基因,其中1株大肠埃希菌检出TEM-1和CTX-M-24基因,另一株大肠埃希菌检出CMY-42和OXA-1基因;17株菌未检测到IMP、VIM和NDM碳青霉烯酶。15株肺炎克雷伯菌分为A、B和C三个ERIC类别,12株A类为ST11型,2株B类为ST290和ST147型,1株C类为ST967型,2株大肠埃希菌是同一ERIC类别。结论 17株菌亚胺培南耐药主要与KPC-2基因有关,产KPC-2肺炎克雷伯菌在本院神经外科病区呈克隆传播流行,ST11型为此次流行的主要型别;17株菌同时也是产ESBLs株或产ApmC酶株;首次在世界范围内发现ST290和ST967型产KPC-2肺炎克雷伯菌;临床科室应加强院内感染控制措施。     

钾纳火焰光度计气路系统滤水装置的研制

钾钠火焰光度计本身虽有压缩空气滤水器,但常因使用环境湿度较大时不能有效控制,进入气路系统的压缩气体仍带入不少水汽,在气路的各接口处及阀门处贮积水珠,可影响仪器的稳定性及临床标本检测的准确性.为克服上述影响,作者经反复研究及实     

血清K^＋、Na^＋化学法在生化分析仪上的应用及评价

目的对血清K^＋、Na^＋化学法在生化分析仪上测定进行评价。方法在HITACHI 7060型全自动生化分析仪上,用K^＋、Na^＋化学法检测试剂盒与离子选择电极法进行实验比较。结果化学法与电极法K^＋、Na^＋相关系数分别为0.9885、0.9257,两种方法所得结果差异无统计学意义（P〉0.05）。结论血清K＋、Na＋化学法测定有较好的重复性、准确性、线性良好、抗干扰能力强,能满足临床使用要求。     

血清酶谱测定在颅脑损伤诊疗中的意义

目的：探讨血清酶的测定对判断颅脑外伤患者病情及预后的临床价值。方法：将患者分为轻型、重型颅脑外伤组，并与健康人做对照分析。结果：50例患者血清酶值较对照组差异有非常显著性（P〈0.01）。结论：测定血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）、谷胺酰转肽酶（GGT）、淀粉酶（AMY）能辅助判断病情和预后，为临床诊疗提供快速、准确、有效的依据。     

人自身抗原Sm B'基因在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达

目的 通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母中表达人自身抗原Sm B'.方法 PCR扩增Sm B'基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-Sm B'.用电穿孔法转化酵母菌Sm D1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(WB)鉴定,并用免疫酶斑点法和免疫印迹法(immunoblot,IBT)检测与评价分析30例系统性红斑狼疮(SLE)患者、30例混合结缔组织病患者和30名健康体检者血清中抗-Sm B'水平差异.结果 PCR产物约700 bp,与预期657 bp接近,pPIC9k-Sm B'重组阳性克隆测序结果与核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物Sm B'的相对分子质量约32 000,WB法证实表达产物具有天然Sm B'分子的免疫原性,阴性对照菌未见目的 表达条带.免疫酶斑点法检测阳性率为46.7%(42/90),IBT的检测阳性率为51.1%(46/90);2种方法检测结果一致性较佳(Kappa值=0.911 2,P<0.01).结论 Sm B'在巴斯德毕赤酵母中分泌表达成功,这为Sm B'试剂盒研究奠定了基础.     

人干燥综合征B抗原在巴斯德毕赤酵母菌中的高效分泌表达研究

目的：通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母菌中表达人干燥综合征B（SS—B）抗原。方法：PCR扩增SS—B基因，与酵母菌表达载体pPIC9k重组，构建表达质粒pPIC9k—SS—B。用电穿孔法转化酵母菌SMD1168，在MD平板上筛选重组克隆，用G418快速筛选高拷贝转化子，阳性克隆经甲醇诱导表达后，培养上清用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和免疫酶斑点法鉴定。结果：PCR产物约为1200bp，与预期1224bp接近；pPIC9k—SS-B重组阳性克隆测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致，双酶切鉴定正确。表达产物SS-B的相对分子质量约48000，高拷贝毕赤酵母菌转化菌显著高于低拷贝的表达水平，表达量占分泌总蛋白的60％以上，产物浓度为800～900mg／L。免疫酶斑点法证实表达产物具有天然SS—B分子的免疫原性。阴性对照菌未见目的表达条带。结论：SS—B存巴斯德毕赤酵母菌中获得高效分泌表达，为下一步研究打下了基础。     

耐头孢西丁革兰阴性杆菌高产AmPC酶发生率及基因型与耐药性研究

目的了解耐头孢西丁革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率及基因型分布和耐药性。方法对155株无重复耐头孢西丁革兰阴性杆菌,用酶提取物三维试验检测AmpC酶;ATB药敏试验板和K-B法检测产酶株的药物敏感性;质粒转化试验定位耐药基因;PCR扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定确定其基因型。结果高产AmpC酶的发生率为23.2%;自2株肺炎克雷伯菌和5株大肠埃希菌中检出DHA-1、CMY-2和CMY-22型AmpC酶,5株大肠埃希菌还分别同时携带TEM-1型广谱酶和TEM-144、CTX-M-27和CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶;CMY-22型和TEM-144型β-内酰胺酶是国内外首次报道,获得美国GenBank登录号分别为DQ256079和DQ256080。结论加强耐头孢西丁革兰阴性杆菌高产AmpC酶的监测,治疗相关菌感染以亚胺培南和美罗培南为首选;福州发现DHA-1、CMY-2和CMY-22型AmpC酶。     

介绍一种测定溶血的高灵敏度方法

建立灵敏度高、试剂安全测定血浆游离血红蛋白(FHb)的方法。用于各项溶血试验。其方法为设计改良Trinder反应的2,4-二氯酚(2,4-DCP)方法,并进行各项性能验证。结果显示:本法灵敏度是酚法的2.39倍,批内批间重复性好。呈色稳定,FHb参考值为1～36.7mg/L,以液体枸橼酸钠抗凝剂,保存红细胞最优。FHb2,4-二氯酚法无毒、无癌原性,适用临床及生物医学工程学的各项溶血试验。