BDNF在挤压伤脊髓背角表达的时相变化

目的:了解BDNF在挤压伤脊髓背角的表达变化.方法:用本室建立的成年SD大鼠(T13-L1)脊髓挤压伤模型,分别于术后24h,7h,21h处死动物并设正常对照组,取L3节段脊髓制作20μm厚冰冻连续切片,用抗BDNF抗体按ABC法行免疫组织化学染色.观察挤压伤位点尾侧端(L3)背角BDNF免疫反应物的分布,记录其免疫反应强度,计数其免疫阳性神经元和胶质细胞数.结果:BDNF的阳性反应物主要分布于正常脊髓背角的神经元和胶质细胞.术后24h,BDNF的免疫反应强度较正常者明显增强并维持至7h(P<0.05),术后21h又进一步增强并高过术后24h者水平(P<0.01).BDNF的免疫阳性细胞数则从术后24h至21h进行性增加(P<0.01).结论:脊髓挤压伤后早期,BDNF在损伤位点尾侧端背角的表达明显增加,提示BDNF在脊髓挤压伤的早期反应中可能起作用.     

艾滋病防治工作中的几个伦理难题及其对策

昆明自 1990年开展ＨＩＶ/ＡＩＤＳ(艾滋病病毒感染者 /艾滋病患者 )的主动监测工作。随着ＨＩＶ/ＡＩＤＳ管理工作的加强 ,我们在实际工作中面临许多新的关于保密、救治、婚姻、知情权等伦理道德难题 ,现作如下浅述。1　为ＨＩＶ/ＡＩＤＳ保密与伦理道德、法律法规的冲突严守患者的秘密是医德规范的重要内容 ,然而 ,在实际工作中 ,这种守密的传统往往与法律、道德发生冲突。ＨＩＶ感染者从感染到出现症状长达数年甚至十几年以上 ,这期间感染者没有自觉症状 ,外表与常人无异 ,却能把ＨＩＶ传染给他人 ,传染途径又主要是最为隐密的性接触。随…     

简易切割法制作健康SD成年大鼠hSCI和tSCI模型

用简易切割法制作ｈＳＣＩ和ｔＳＣＩ模型。４５只ＳＤ大鼠随机分为３组。ＩＳＣ组６只,ｈＳＣＩ组１８只,ｔＳＣＩ组２１只。用显微剪在Ｔ１３－Ｌ间横几完全剪断脊髓或其一则１／２,制成ｔＳＣＩ和ｈＳＣＩ模型,术后动态行为观察和神经功能综合评价,并分别于术后２４ｈ,７ｄ取Ｔ１１－Ｌ３节段脊髓作冻冻切片苏木精染色观察。结果显示,３组间ＣＢＳ两两比较经ｑ检验均有显著性差异。病理改变,ｈＳＣＩ组主要是伤侧伤质缩小     

凋亡期因Bcl-2在成年猕猴中枢神经系统中的表达(摘要)

目的 :探讨凋亡基因Bcl- 2在成年猕猴中枢神经系统中的分布情况 .方法 :成年雄性猕猴 (体重 5kg) 1只 ,氯胺酮 15mg/kg复合安定 1 5mg/kg肌肉注射麻醉后灌注取材 ,将脑和脊髓分为额叶、顶叶、枕叶、颞叶海马、间脑、中脑、脑桥、延髓、小脑、颈髓 8、胸髓 11和腰髓 3共 12部分 ,分别置于含 30 %蔗糖 0 1mol/L的PBS内 (4℃ )直至组织块沉底 .作 2 0 μm连续恒温冰冻切片 ,每隔 10张取 1张 .采用免疫组织化学 (SP法 )观察Bcl- 2在成年猕猴大脑皮层、间脑、脑干、小脑以及脊髓中的表达 .结果 :Bcl- 2在猕猴中枢神经系统 (cen tralnervouss…     

生物素化葡聚糖胺示踪显示大鼠皮质脊髓束的实验研究

目的 用BDA(Biofinylated Dextran Amine)示踪大鼠皮质脊髓束,观察其在脊髓内的走行.方法 采用成年SD大鼠10只,分A、B两组.A组用10%BDA注射到双侧皮质运动区.B组注射到左侧皮质运动区.3周后灌注取材,取C1-3、T3-5和T9-11节段脊髓做冰冻切片,行DAB染色.结果 (1)横向观察:A组在双侧脊髓白质的后索以及前正中裂两侧观察到棕色阳性纤维.B组在右侧脊髓后索和左侧前正中裂观察到棕色阳性纤维;两组都有显色纤维从后索发出进入灰质且在灰质内分布均匀;(2)纵向观察:阳性纤维自吻端向尾端逐渐稀疏.结论 BDA示踪技术可以直观地显示大鼠皮质脊髓束在脊髓内走行,阳性染色纤维的数量自吻端向尾端逐渐稀疏.     

脑缺血再灌注后迟发性神经元死亡的分子机制

脑缺血再灌注会引起脑海马CAl区锥体神经元的细胞死亡,而其他神经元却不易受到破坏。这种现象在缺血再灌注后3～4d出现,故常称其为迟发性神经元死亡(Delayed neu-ronaldeath,DND)。目前,其确切机制还不很清楚,国内、外许多学者提出了多种假说。我们就脑缺血再灌注后DND分子机     

多重脑震荡鼠平衡运动与认知行为的变化

目的 探讨多重脑震荡(Multiple cerebral concussion,MCC)对大鼠平衡运动与认知功能的影响,并为二次冲击综合征(SIS)的临床诊断与治疗提供理论依据.方法 采用自制金属单摆式闭合性脑损伤装置复制三重的MCC大鼠模型;应用平衡木实验(BBT)及噪音横杆跑动实验(BWT)于伤后1～10d对MCC大鼠平衡运动与认知功能进行评价;运用SPSS11.5统计软件包分析测试结果.结果 与对照组(60.00±0.00)s比较,MCC组大鼠在伤后第1天平衡时间明显缩短至(54.50±13.89)s,差异具有显著性(P＜0.05),第2天开始恢复,至第4天恢复正常.BWT结果显示伤后第1天步入潜伏期明显延长,第2天开始恢复,至第10天尚未完全恢复正常,分别为:(20.54±21.89)s、(14.34±18.71)s、(14.50±20.76)s、(13.84±18.99)s、(9.48±15.51)s、(4.99±2.45)s、(5.98±7.28)s、(4.38±2.98)s、(5.60±9.28)s和(6.74±10.75)s.除第9天外,其他各时间点与对照组相比,差异均具有显著性(P＜0.05).BWT评分结果 显示伤后第1～3天评分均显著低于对照组,分别为(4.07±1.91)s、(4.37±1.65)s和(4.37±1.65)s.结论 MCC大鼠存在不同程度的平衡运动与认知功能障碍,平衡功能恢复快,协调运动与认知功能恢复较慢.     

鸡胚脊髓背角神经营养物质的HPLC纯化分析

目的　纯化鸡胚脊髓背角内的神经营养物质。方法　采用 Sephadex G- 2 0 0凝胶过滤层析法分离鸡胚脊髓背角内的神经营养物质 ,以鸡胚背根神经节细胞培养结合 MTT法检测各洗脱峰液的神经营养活性。所得活性组分用高效液相色谱技术 (HPL C)进一步分离 ,同前用 MTT法检测各洗脱峰液的神经营养活性。结果　经层析获得三个洗脱峰 ,其中第 2洗脱峰液促进培养神经细胞生长的活性最强 (P<0 .0 1) ,提示 2峰洗脱液含有神经营养物质。 HPL C后获得 7个洗脱峰。经 MTT法测定各峰洗脱液对鸡胚 DRG神经细胞的生长活性发现 F峰有明显的神经营养活性 (P<0 .0 5 )。结论　通过分离纯化获得了有较强活性的神经营养物质。     

MCP-1／CCR2通路参与骨髓基质细胞向脊髓全横断损伤区迁移的实验研究

【目的】探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及其受体CCR2在骨髓基质细胞（MSC）体内、外迁移中的作用。【方法】体外培养、纯化大鼠MSC，取第五代MSC行免疫荧光鉴定；免疫组化、RT-PCR检测纯化MSC表达CCR2情况；Boyden小室法检测趋化因子MCP-1（5～500ng／mL）对MSC的趋化迁移作用及其特异性。42只成年大鼠用于体内研究（脊髓全横断组24只，假手术组9只，正常大鼠9只），分别于术后1，3，7.14d取材，行免疫组化检测MCP-1表达，或行MCP-1的Real-timePCR定量分析，或颈内静脉注射荧光标记的MSC，观察MSC向脊髓迁移情况。【结果】第5代MSC都表达间充质干细胞标记物Vimentin、Laminin及Fibronectin；细胞免疫荧光、RT-PCR证实MSC表达趋化因子受体CCR2；MCP-1（5～500ng／mL）体外可趋化MSC迁移（P〈0．05），抗MCP-1抗体可对抗其趋化迁移作用（P〈0．05）。脊髓全横断组、对照组脊髓均表达MCP-1，但细胞分布、染色存在差异。影响MCP-1定量。脊髓损伤后趋化因子MCP-1RNA在1d、3d及7d较对正常对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。术后14d时MCP-1 RNA与正常对照相比差异无统计学意义（P〉0．05），伴随其变化，脊髓损伤区迁移MSC较对照差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】MCP-1体内、外可趋化MSC迁移．MCP-1／CCR2通路参与MSC向脊髓全横断损伤区的迁移。