银染色法检测短串联重复序列

短串联重复序列（ＳＴＲ）又称微卫星ＤＮＡ,它是由２～７个碱基对作为核心单位串联重复形成的一类ＤＮＡ序列。ＳＴＲ出现的数目和频率的变化构成了ＳＴＲ遗传多态性。ＬＤＬ受体基因第１８外显子３′末端非翻译区上一段短串联重复序列（ｄＴＡ）ｎ在人类存在多态性［１］。我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）,结合聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）建立了检测相差２ｂｐＤＮＡ碱基对的银染方法。一、材料和方法１－材料：ＰＣＲ缓冲液,Ｔａｑ酶,ｄＮＴＰ,引物,ＰＣＲ仪,电泳仪,垂直电泳槽及电泳板。银染试剂为国产分析纯,试剂均用去离…     

二乙基对硝基苯磷酯酶2基因G/A148多态性与2型糖尿病及血脂的关系

目的：了解二乙基对硝基苯磷酯酶（PON）2基因G／A148多态性与中国北方地区人群2型糖尿病的相关性及其与血脂等的关系。方法：采用配偶对的病例－对照研究设计，用聚合酶链反应（PCR）－长度多态性的方法检测PON2基因G／A148多态性。结果：PON2基因G／A148多态性的基因型频率和等位基因频率在2型糖尿病组和对照组间差异无显著性意义。与非肥胖、无G等位基因相比，肥胖无G等位基因时，发生2型糖尿病的危害险度（OR）值为2．04；肥胖有G等位基因时，OR增至3．18。在对照人群中，含G等位基因组的总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）及载脂蛋白B（ApoB)水平均比AA基因型组高。G等位基因对高脂血症的OR为2．48，P＝0．5。结论：在中国北方地区人群中PON2基因G／A148多态性与肥胖有协同促进2型糖尿病发生的作用。在非糖尿病人群中，此多态性与总胆固醇等血脂水平显著相关。     

胆固醇酯转运蛋白基因多态性与心肌梗塞的相关研究(摘要)

胆固醇酯转运蛋白 (cholesteryl es-ter transfer protein,CETP)是在血脂代谢中起重要作用的糖蛋白 ,它在第 44 2位氨基酸上的一个突变 (D44 2 G)是其多态性标记 ,我们通过一个病例对照研究观察 CETP基因的这一突变是否与心肌梗塞相关。1　材料与方法　　自 1997年 3月至 1998年 2月北京医科大学第三医院和第一医院心内科住院的心肌梗塞患者 12 0例为病例组。同期的非心血管病住院患者 12 0例为对照组 ,要求无心血管病病史 ,无胸痛症状 ,心脏体检及心电图检查正常。对入选对象抽取外周静脉血 5 ml以提取脱氧核糖核酸 (DNA) ,基因组 DN…     

85例正常新生儿血清酶谱活性测定

近年来,由于酶学知识和技术的发展,酶的测定在临床上应用日益广泛。血清谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)及同功酶、肌酸磷酸激酶(CPK)及同功酶     

乙酰胆碱受体γ亚基基因—204／—50片段与鸡发育阶段骨骼肌 …

目的：分析鸡乙酰胆碱受体γ亚基基因与不同发育阶段鸡骨骼肌核因子的相互作用。方法：以ＡＣｈＲγ基因－２０４／－５０片段为探针，与孵化９￣１８ｄ的鸡胚和出生后１ｄ、２周雏鸡骨骼肌核抽提物进行凝胶阻滞和Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析。     

血管紧张素转化酶基因多态性与心肌梗死的相关研究

目的：了解血管紧张素转化酶（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ, ＡＣＥ） 基因的插入／缺失（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ,Ｉ／Ｄ）多态性在中国人群中与心肌梗死（ 简称心梗）是否相关。方法：选择了１５０ 例住院心梗病人为实验组,１５０ 例住院的非心血管病患者作对照, 抽取外周静脉血提取ＤＮＡ,同时所有研究对象记录其病史、体检等临床资料及吸烟、饮酒等流行病学资料,应用ＰＣＲ 进行ＡＣＥ 的基因型分析。结果：Ｉ等位基因和Ｄ 等位基因频率在心梗组分别为０ ．５８ 和０ ．４２ ,在对照组为０ ．６５ 和０．３５。基因型频率的分布符合ＨａｒｄｙＷｅｉｎｂｅｒｇ 平衡。在全体研究的样本中,未发现ＩＤ或ＤＤ 基因型与心梗相关;但在年龄小于或等于６０ 岁的个体中,ＤＤ 基因型与心梗显著相关（ＯＲ＝ ２ ．３３ ,９５％ ＣＩ：１．２０４ ．５７）。并且这一相关性在年龄６０ 岁及以下且肥胖的个体中进一步增强。结论：在研究的样本中,未发现ＡＣＥ基因型与心梗相关;但在年龄６０ 岁及以下的个体中,ＤＤ基因型与心梗显著相关,且这种相关在合并肥胖的个体中进一步加强。     

异常瘢痕成纤维细胞在低血清及白介素1_β作用下的细胞凋亡研究

目的　明确低血清及白介素 1β(IL - 1β)对瘢痕疙瘩、增生性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞诱导细胞凋亡的作用。方法　对 6例瘢痕疙瘩、6例增生性瘢痕及 6例正常皮肤标本采用细胞培养、免疫组织化学及凝胶电泳方法 ,通过检测Bax、Bcl 2蛋白及特异性DNA梯形条带 ,对不同成纤维细胞在低血清中及IL 1β作用后的细胞凋亡进行了研究。结果　①在低血清中 ,瘢痕疙瘩和增生性瘢痕成纤维细胞的Bax Bcl 2蛋白表达比值没有明显改变 ,但增生性瘢痕成纤维细胞出现程度较轻的细胞凋亡 ,而瘢痕疙瘩成纤维细胞未见明显细胞凋亡 ;正常皮肤成纤维细胞出现细胞凋亡 ,且Bax Bcl 2比值升高 ,表明发生细胞凋亡。②IL 1β作用下 ,三者成纤维细胞均发生凋亡 ,瘢痕疙瘩和增生性瘢痕凋亡比正常皮肤严重 ,但Bax Bcl 2比值在瘢痕疙瘩升高 ,在正常皮肤降低 ,增生性瘢痕无明显变化。结论　不同的成纤维细胞特性存在差异。     

瘢痕疙瘩不同部位Ⅰ、Ⅲ型前胶原 mRNA的原位表达研究

目的基于瘢痕疙瘩浸润、增生和老化部组织形态学上的差异，为了明确瘢痕疙瘩不同部位及正常皮肤Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达是否存在差异。方法对４例瘢痕疙瘩和２例正常皮肤通过原位杂交方法，观察了Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达。结果瘢痕疙瘩的Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达比正常皮肤明显增强，尤以Ⅰ型为甚，导致Ⅰ／Ⅲ型前胶原的比率增高，且其表达在瘢痕疙瘩浅层多于深层，浸润及增生部多于老化部，浸润和增生部的表达无明显差别。结论瘢痕疙瘩的不同病理部位和正常皮肤Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达存在差异，是形成瘢痕疙瘩不同病理部位的原因之一。     

瘢痕疙瘩不同部位Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的原位表达研究

目的基于瘢痕疙瘩浸润、增生和老化部组织形态学上的差异,为了明确瘢痕疙瘩不同部位及正常皮肤Ⅰ、Ⅱ型前胶原mRNA的表达是否存在差异。方法对4例瘢痕疙瘩和2例正常皮肤通过原位杂交方法,观察了Ⅰ、Ⅱ型前胶原mRNA的表达。结果瘢痕疙瘩的Ⅰ、Ⅱ型前胶原mRNA的表达比正常皮肤明显增强,尤以Ⅰ型为甚,导致Ⅰ/Ⅱ型前胶原的比率增高,且其表达在瘢痕疙瘩浅层多于深层,浸润及增生部多于老化部,浸润和增生部的表达无明显差别。结论瘢痕疙瘩的不同病理部位和正常皮肤Ⅰ、Ⅱ型前胶原mRNA的表达存在差异,是形成瘢痕疙瘩不同病理部位的原因之一。