肝癌干细胞的研究进展

肝细胞癌（HCC）是常见的恶性肿瘤之一,是世界上第五大常见癌症,死亡率仅次于肺癌和结肠癌.预计未来20年,其发病率死亡率还会成倍上升.目前关于肝癌发生的细胞学机制仍不明确.随着对肿瘤和干细胞的研究逐渐深入,Hamburger和Salmon提出肿瘤干细胞学说[3],该学说认为：肿瘤组织中仅有一小部分（＜1.0％）肿瘤细胞有致瘤性,绝大多数肿瘤细胞没有或仅有有限的增殖能力,这小部分肿瘤细胞因具有一些与干细胞相似的自我更新、增殖、分化等特性,被称为肿瘤干细胞（cancer stem cells,CSCS）.肿瘤的形成和发展为该细胞主导过程.在此后大量实验中证实乳腺癌、胰腺癌、肺癌、前列腺癌及脑肿瘤等均存在肿瘤干细胞.于是推测出肝癌中也存在着肝癌干细胞（liver cancer stem cells,LCSCs）.肝癌干细胞是近年来的研究热点,若能证实其在肝癌发病中起到的作用,则将会对肝癌的诊断和治疗产生重大的意义.本文对近年来的肝癌干细胞研究进展做一综述.     

Tg737基因参与胎肝干细胞正常分化的机制研究

目的探讨Tg737基因对胎肝干细胞(Fetal liver stem cells,FLSCs)正常分化的影响及相关机制。方法三步分离法富集FLSCs;在HGF诱导FLSCs的不同时间点,RT-PCR检测AFP、ALB、Tg737及HNF4α的mRNA表达,Western blot检测Tg737和HNF4α的mRNA和蛋白表达;慢病毒Tg737-shRNA转染FLSCs,观察转染后Tg737的抑制效果;Tg737抑制后,RTPCR检测不同诱导时间AFP和ALB的mRNA表达;Western blot检测Tg737抑制后HNF4α的蛋白表达。结果三步分离法能有效富集FLSCs;在HGF诱导FLSCs的过程中,AFP的mRNA表达呈逐渐降低的趋势,ALB的mRNA表达逐渐升高,Tg737及HNF4α的mRNA和蛋白表达均呈逐渐升高的趋势;shRNA能有效下调Tg737的mRNA和蛋白表达;在HGF诱导过程中,Tg737抑制组AFP和ALB的mRNA水平均无明显变化;Tg737抑制后HNF4α的蛋白表达显著下调。结论 Tg737和HNF4α参与了FLSCs的正常分化,Tg737的表达缺失会抑制FLSCs的正常分化,其抑分化机制可能是通过下调HNF4α来实现的。     

肝癌干细胞研究进展

肝癌是占全球发病率第5、致死率第3的恶性肿瘤。在我国,每年新发现的肝癌患者人数占全球的一半以上。虽然在早期诊断和治疗措施方面已有很大的进步,但是大部分肝癌患者被发现时已属晚期,而且针对肝癌的以手术为主的综合治疗疗效仍有限。近十多年的研究使肿瘤干细胞的概念深入人心,越来越多的证据表明肿瘤干细胞与肿瘤的生长、耐药、转移和复发等密切相关,使人们对肝癌的发生和发展有了新的认识,为肝癌的治疗提供了新的方向。     

绿色荧光蛋白转基因小鼠胎肝干细胞在体内外定向分化的潜能

目的探讨绿色荧光蛋白转基因小鼠胎肝干细胞（FLSCs）在体内及体外定向分化的潜能。方法取孕13d绿色荧光蛋白（GFP）转基因C57BL／6J小鼠胚胎肝脏,经机械消化和胶原酶消化获得FLSCs并扩大培养;成熟肝细胞来自于同品系小鼠成体肝脏,通过两步灌注胶原酶消化法提取,流式细胞仪鉴定其干细胞标志物的表达及自我增殖能力,RT—PCR及Westernblot测定AFP表达;分别将FLSCs经肝细胞生长因子（HGF）及TGF-β诱导分化后,Real—timePCR检测Alb、角蛋白CK一7、8、19mRNA以及Westernblot检测Alb、角蛋白CK-7、8、19蛋白在诱导前后的表达变化,鉴定其向肝细胞和胆管细胞双向分化的能力;经尾静脉注射FLSCs到野生型C57BL／6J肝切除小鼠体内,观察其在肝内重构肝组织的能力。计量资料采用t检验,各时相点比较采用重复测量的方差分析,两两比较采用LSD—t检验。结果成功克隆FLSCs细胞。流式细胞仪检测分离的FLSCs表达上皮细胞黏附分子（EpCAM）、CDl33、CD49f干细胞标志物,其阳性表达率分别为78．6％±3．3％、31．7％±2．5％、47．6％±1．8％。AFPmRNA在FLCs和成熟肝细胞中的相对表达量分别为0．640±0．115和0．053±0．012,蛋白相对表达量分别为1．3834±0．265和0．243±0．227,两者比较,差异有统计学意义（t=8．772,5．354,P〈0．05）。超低黏附培养皿培养FLPCs和成熟肝细胞,其形成克隆球数目分别为（234．04±57．0）个和（5．04±2．0）个,两者比较,差异有统计学意义（t=12．711,P〈O．05）。体外HGF诱导FLSCs分化,Alb、CK-8mRNA表达分别在8、10d到达峰值,分别为0．851±0．030和0．771±0．031;两者蛋白水平于第10天达峰值,分别为4．573±0．015和1．562±0．029。体外TGF—B诱导FISCs分化,CK-7、CK-19mRNA在第12天达峰值,分别为15．454±2．152和10．675±1．822;两者蛋白水平于第14天达峰值,分别为3．4234±0．105和1．8924±0．081。在移植有FLSCs的肝切除小鼠体内可检测到表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的成熟肝细胞及胆管细胞。结论分离的绿色荧光蛋白转基因FLSCs能够稳定表达绿色荧光,具有显著的肝干细胞特征和向肝细胞和胆管细胞双向分化的潜能,且在体内研究中具有良好的示踪性。     

胰腺中段切除术治疗良性和低度恶性胰腺颈体部肿瘤：附32例报告

目的：探讨胰腺中段切除术（MP）治疗良性和低度恶性胰腺颈体部肿瘤的疗效。 方法：回顾性分析2005年8月—2013年2月收治的32例胰腺颈体部良性和低度恶性肿瘤行MP患者资料（MP组）,并与同期因良性和低度恶性胰腺肿瘤行胰十二指肠切除术（PD）的30例（PD组）和行胰体尾切除术（DP）的36例（DP组）患者资料进行比较。 结果：MP组、PD组、DP组平均手术时间分别为（180.8±56.4）、（279.6±79.2）、（190.4±62.3）min;平均术中出血量分别为（196.5±185.7）、（482.6±288.5）、（320.7±240.3）mL;胃肠道功能恢复时间分别为（3.6±1.6）、（5.2±2.3）、（4.1±1.9）d;新增糖尿病例数分别为1、5、9例;术后需要补充胰酶例数分别为0、8、5例,以上指标3组间差异均有统计学意义（均P<0.05）。MP组、PD组、DP组术后胰瘘发生率（18.8%、12.5%、25.0%）以及其他围手术期指标差异均无统计学意义（均P>0.05）。平均随访38个月,各组均无肿瘤复发。 结论：MP治疗良性或低度恶性胰腺颈体部肿瘤是一项合理的技术,能更好地保护胰腺外分泌和内分泌功能。

     

UBE2 O在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:研究泛素结合酶E2O(ubiquitin conjugating enzyme E2 O,UBE2O)在胃癌组织中的表达及临床意义,明确UBE2O对胃癌细胞增殖和侵袭的影响,并初步探索潜在分子机制.方法:利用癌症基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析UEB2O mRNA在胃...     

肝癌干细胞的研究进展

肝细胞癌(HCC)是常见的恶性肿瘤之一,是世界上第五大常见癌症,死亡率仅次于肺癌和结肠癌。预计未来20年,其发病率死亡率还会成倍上升[1-2]。目前关于肝癌发生的细胞学机制仍不明确。随着对肿瘤和干细胞的研究逐渐深入,Hamburger和Salmon提出肿瘤干细胞学说[3],该学说认为:肿瘤组织中仅有一小部分(<1.0%)肿瘤细胞有致瘤性,绝大多数肿瘤细胞没有或仅有有限的增殖能力,这小部分肿瘤细胞因具有一些与干细胞相似的自我更新、增殖、分     

CC趋化因子受体-2在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义

目的 研究CC趋化因子受体-2(CC chemokine receptor 2,CCR-2)在肝细胞癌组织中的表达及其与肝癌临床病理特征、预后的关系.方法 用免疫组织化学法(SP法)检测76例肝癌组织及其癌旁组织中CCR-2的表达情况,分析CCR-2表达与肝癌各项临床病理特征以及患者预后的关系.CCR-2染色结果与各项临床指标的关系采用x2检验或Fisher确切概率法检验.采用KaplanMeier法绘制生存曲线.生存情况分析采用log-rank检验.结果 14(18.4％)例癌旁组织CCR-2染色结果显示为弱阳性表达,其余均为阴性.在肝癌组织中,CCR-2表达明显高于癌旁组织:15(19.7％)例阴性表达,29(38.2％)例弱阳性表达,12(15.8％)例中等阳性表达,20(26.3％)例强阳性表达.肝癌组织中CCR-2阳性表达与肿瘤直径(X2=12.41,P＜0.01)、门静脉癌栓(x2=7.476,P=0.006)、转移(X2=7.227,P=0.007)、AJCC分期(X2=20.711,P＜0.01)明显相关.CCR-2高表达组患者术后五年生存率(6.3％)明显低于低表达组(38.6％),差异具有统计学意义(X2 =27.133,P＜0.01).经单因素及多因素分析显示,肝癌组织CCR-2高表达是影响肝癌患者总体生存的独立危险因素(P＜0.05).结论 CCR-2在肝癌组织中表达明显升高,可能参与了肝癌的发生发展过程,检测CCR-2表达水平对判断肝癌的预后具有一定的参考价值.