血管内皮生长因子D促进胃癌淋巴管生长

目的研究血管内皮生长因子D（VEGF-D）与胃癌淋巴管转移之间的关系。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）从人胃癌旁正常组织中扩增人VEGF-D全长cDNA，经T-A克隆酶切鉴定及测序得到完整的序列后，亚克隆并构建pEGFP／VEGF-D真核表达载体，转染低表达VEGF-D的胃癌细胞株SGC7901，通过体外G418抗生素筛选得到高表达VEGF-D的肿瘤细胞克隆，用这种高表达VEGF-D的胃癌细胞接种于裸鼠皮下，用淋巴管内皮细胞透明质酸盐受体（LYVE-1）行免疫组织化学染色观察肿瘤淋巴管密度和形态。结果对照组和转染pEGFP／VEGF-D组肿瘤的重量分别为（1．13±0．40）g和（2．24±0．82）g，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。肿瘤组织内的淋巴管密度分别为2．89±1．32和5．74±1．30，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。周边肿瘤组织存在扩张的功能性淋巴管。结论VEGF-D在胃癌中可能通过主动促进淋巴管生长来促进肿瘤生长和远处转移。     

血管内皮生长因子C与胃癌淋巴管生长关系的研究

目的：研究血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C）与胃癌淋巴管生长间的关系。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）,从人胃癌旁组织中扩增人VEGF-CcDNA全长,经T-A克隆酶切,鉴定并测序得到的完整序列后,进行亚克隆并构建pEGFP/VEGF-C真核表达载体,将其转染低表达VEGF-C的胃癌细胞株MKN45;另转染pEGFP空载体,作为对照组。通过体外G418抗生素筛选,得到高表达VEGF-C的肿瘤细胞克隆,用这种高表达VEGF-C的胃癌细胞与对照组细胞接种于裸鼠皮下（2组各为10只）,观察肿瘤组织内淋巴管密度及裸鼠瘤体质量。结果：对照组和转染pEGFP/VEGF-C组肿瘤质量分别为（2.64±0.92）g、（5.55±0.81）g,差异有统计学意义（P〈0.001）;2组肿瘤组织内的淋巴管密度分别为9.77±1.12,13.87±1.29,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：VEGF-C能在胃肿瘤中促淋巴管生长。     

大承气汤对大鼠胰腺纤维化的改善作用及Wnt/β-catenin通路的影响

目的探讨大承气汤对大鼠胰腺纤维化的改善作用及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路的影响。方法2020年7—9月在上海中医药大学附属龙华医院实验室进行实验。48只SD大鼠建立胰腺纤维化模型成功后,采用随机数字表法分成模型组、清胰利胆颗粒组(2.678 g/kg)、大承气汤低剂量组(6 g/kg)、大承气汤高剂量组(12 g/kg),每组12只;另取12只大鼠作为空白对照组。各药物组给予相应药物灌胃,空白对照组及模型组给予等体积的生理盐水,每天1次,给药周期为4周;干预结束后,测定各组血清淀粉酶、透明质酸水平,苏木精—伊红(HE)染色观察胰腺组织病理结构并判定胰腺纤维化指数、腺体破坏指数评分,测定胰腺组织中Wnt、β-catenin mRNA和蛋白表达水平。结果空白对照组胰腺结构正常;模型组胰腺出现导管增生,见大量纤维组织、空泡样变、嗜酸性粒细胞浸润明显,且胰腺组织间隔增宽,脂肪组织代替部分坏死腺体组织;清胰利胆颗粒组及大承气汤低、高剂量组胰腺组织纤维化程度减轻,炎性细胞、脂肪细胞浸润减少。与空白对照组比较,模型组纤维化指数评分、腺体破坏指数评分、血清淀粉酶、透明质酸、胰腺组织Wnt、β-catenin mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,清胰利胆颗粒组及大承气汤低、高剂量组纤维化指数评分、腺体破坏指数评分、血清淀粉酶、透明质酸、胰腺组织Wnt、β-catenin mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),且大承气汤高剂量组水平低于大承气汤低剂量组(P<0.05);清胰利胆颗粒组和大承气汤高剂量组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论大承气汤对大鼠胰腺纤维化具有明显改善作用,其机制可能与大承气汤抑制大鼠胰腺组织Wnt/β-catenin通路的激活有关。     

ROCK1在结直肠癌组织中表达及意义研究

[目的]研究Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK-1)在结直肠癌组织中的表达及其意义.[方法]测定200例结直肠癌及其癌旁组织ROCK1表达及其mRNA相对表达量,比较不同组织ROCK1阳性表达率及其mRNA相对表达量,并分析结直肠癌组织ROCK1表达与临床病理特征的关系.[结果]结直肠癌组织ROCK1阳性表达率、ROCK1 mRNA表达分别为70.00%、(0.935±0.253)显著高于癌旁组织的8.00%、(0.234±0.128),且差异有显著性(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤直径、分化程度结直肠癌患者ROCK1阳性率比较差异均无显著性(P>0.05);不同TNM分期、淋巴结转移、远处转移患者ROCK1阳性表达率比较差异有显著性(P<0.05).[结论]结直肠癌组织中ROCK1高表达,且ROCK1表达与结直肠癌TNM分期、淋巴结转移及远处转移有关.