急性热应激与夏季飞行对飞行员血浆热应激蛋白的影响

目的研究急性热应激和夏季飞行对飞行员血浆中主要热应激蛋白（ＨＳＰｓ）的影响。方法使用Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ方法，分别检测飞行员在急性热应激前后和夏季飞行前后血浆ＨＳＰｓ水平。结果与应激前相比，急性热应激和飞行应激后，飞行员血浆中ＨＳＰ７０明显增加（Ｐ＜０．０５）；飞行应激后ＨＳＰ２７明显增加（Ｐ＜０．０５）。结论ＨＳＰｓ变化在评价飞行应激中可能具有某些生物学意义     

热应激蛋白70在烫伤大鼠脑组织中的表达

目的 了解烫伤大鼠脑组织热应激蛋白70（HSP70）的表达规律及意义。方法 34只大鼠随机分为4组，分别为正常对照组，10％、30％及60％烫伤面积实验组。实验组烫伤后2小时、4小时、8小时、12小时及24小时各处死2只取脑组织送检，采用免疫组化法测定HSP70表达。结果 正常未烫伤大鼠脑组织无明显表达。各实验组脑组织伤后2－4小时开始出现不同程度阳性表达，随着实验大鼠烫伤面积的增大，其表达有逐步增强的趋势，但1例烫伤面积60％、伤后23小时死于休克大鼠表达明显减弱。表达阳性细胞的着色部位主要为神经细胞的核内及胞浆。伤后早期（4小时以前）以核内表达为主，伤后晚期（24小时）则多表达于胞浆。海马神经细胞及小脑蒲肯野细胞有较典型表达。结论 HSP70的产生作为对付不利环境因素损害的一种自然保护机制，可能在热力烧伤后的机体防御反应中具有重要意义。     

儿童白血病脑脊液P~(53)蛋白和ras癌基因蛋白表达及临床意义探讨

为探讨Ｐ(５３)蛋白和ｒａｓ癌基因蛋白在白血病儿童脑脊液（ＣＳＦ）中的表达水平及与白血病化疗的关系,应用Ｗｅｓｔｅｒｎ斑点印迹法检测５４例儿童急性白血病ＣＳＦ中Ｐ(５３)蛋白和ｒａｓ癌基因蛋白表达水平。结果显示：白血病儿童危象期ＣＳＦ中Ｐ(５３)蛋白明显高于非肿瘤对照水平（Ｐ＜０．０１）。缓解期Ｐ(５３)蛋白和ｒａｓ癌基因蛋白与危象期比有增高趋势（Ｐ＜０．０１）,同时高于非肿瘤对照水平（Ｐ＜０．０１）。白血病儿童ＣＳＦ治疗前Ｐ(５３)／ｒａｓ比值明显升高（Ｐ＜０．０１）,缓解期比值下降接近非肿瘤对照组（Ｐ＞０．０５）。１７例白血病儿童化疗前后双份ＣＳＦ中Ｐ(５３)／ｒａｓ比值动态观察发现,化疗前比值升高,化疗后比值下降,其临床表现及预后好,如化疗前后比值持续在高水平不下降,临床表现差,预后不佳,骨髓近期将复发。提示：检测急性白血病儿童ＣＳＦ中Ｐ(５３)蛋白和ｒａｓ癌基因蛋白,计算Ｐ(５３)／ｒａｓ比值变化有助于指导化疗、评定疗效、监测预后。     

应激原对热应激蛋白基因调控信号系统的影响

应激原对热应激蛋白基因调控信号系统的影响何骁生综述贺涵贞审校近年来的研究表明：无论是原核生物还是真核生物，无论是细菌还是人类受高温应激后都可发生热应激反应（ｈｅａｔｓｔｒｅｓｓｒｅｓｐｏｎｓｅ），此反应的特征是选择性地合成一组多肽——热应激蛋白（ｈｅ...     

郴州市儿童医院2010～2013年到达前死亡患儿的急救分析

目的探讨到达前死亡(DOA)患儿死亡发生原因及影响复苏的因素。方法回顾性分析2010年1月至2013年12月郴州市儿童医院56例DOA抢救不成功患儿的临床资料。结果该院急诊患儿人次及抢救患儿人次逐年增加,但急诊收治的DOA患儿占抢救患儿的比例逐年下降;家长自行抱送入院42例(75.0%),而外院120转运14例(25.0%);入院时均心搏呼吸停止,停止小于10 min 15例(26.8%),10~30 min 14例(25.0%),>30~60 min 7例(12.5%),另20例(35.7%)停止时间不详;DOA患儿的原发疾病以新生儿疾病、重症肺炎合并呼吸衰竭(或)心力衰竭、多脏器功能衰竭、颅内感染等为主;所有患儿均按心肺复苏抢救流程,但全都抢救无效死亡。结论完善儿科急诊医疗体系,提高家长的文化安全素质和健康保育方式,开展大众心肺复苏培训,可减少DOA发生及提高抢救成功率。     

大鼠脊神经后根部分切断吻合轴突再生的初步研究

[目的]将大鼠L3和L5脊神经后根部分切断吻合,观察轴突再生、脊髓后角纤维分布密度及轴浆运输恢复情况,为通过后根再生修复重建感觉传导通路及功能研究奠定组织学基础.[方法]动物随机分为实验组和假手术组.打开椎板暴露双侧L3和L5后根并各自等分为两束;取右侧为手术侧,随机选择其中一束切断,手术显微镜下将两远断端行端-端吻合;假手术组不予吻合;同时,将双侧L2、4、6前后根及L3和L5前根切断以免轴突侧索芽生.左侧L3.5后根不作任何处理作为正常对照侧.术后3个月,经L3、5脊神经节分别注射Neum-DiI和辣根过氧化物酶(HRP)进行神经示踪,取L3、5节段脊髓行降钙素基因相关肽(CGRP)免疫组化染色,取正常侧后根束中的任意一束、吻合段及未吻合段后根行Bielschowsky银染.[结果]术后3个月,实验组Neuro-DiI和HRP示踪均可发现阳性标记DRG神经元,荧光显微镜下可见吻合口轴突再生.脊髓右侧后角CGRP免疫阳性纤维分布密度:实验组,与左侧比较差异无统计学意义(P>0.05);假手术组,均明显低于左侧和实验组(P<0.05).神经纤维银染发现实验组轴突数量与正常侧比较差异无统计学意义(P>0.05),假手术组轴突数量明显少于正常侧和实验组(P<0.05).[结论]后根部分切断吻合后轴突能够再生并恢复轴浆运输,对神经递质向脊髓后角的传递无明显影响.     

菲立磁标记骨髓基质干细胞移植修复兔坐骨神经缺损

【背景】既往为明确细胞移植后对组织修复情况,多采用标本处死或取材等侵袭性方法,但此类方法创伤大且不适于人体研究。通过应用示踪剂标记移植细胞,采用无创伤性影像学技术活体识别、追踪移植细胞的存活及分化状态,观察组织再生修复情况,无疑对于提高细胞移植治疗有重要意义。 【目的】应用MRI影像学技术,体外追踪活体内菲立磁-多聚赖氨酸复合标记的骨髓基质干细胞移植后的存活、迁移变化及与宿主的整合情况。 【设计、时间及地点】细胞学体外观察,于2008年3月至12月在珠江医院神经外科实验室完成。 【材料】健康新西兰兔10只,由南方医科大学实验动物中心提供。菲立磁为Advanced Magnetic公司产品,多聚赖氨酸为Sigma公司产品。 【方法】无菌条件下抽取新西兰兔股骨骨髓,密度梯度离心法获取骨髓基质干细胞,收集细胞加入含白血病抑制因子、碱性成纤维细胞生长因子及胎牛血清的神经干细胞培养基诱导5天。将50mg/L菲立磁和1.5mg/L多聚赖氨酸混合震荡30分钟后加入到神经培养基中进行标记,细胞孵育24小时后移植至坐骨神经缺损处。分别在细胞移植后1周、2周、4周、8周和16周行移植处MRI扫描及组织学观察。 【主要观察指标】骨髓基质干细胞经诱导后向神经干细胞分化情况,细胞内铁的鉴定,菲立磁－多聚赖氨酸复合物对细胞增殖或分化的影响,利用MRI对标记后移植细胞观察的有效性。 【结果】1.骨髓基质干细胞体外培养能成功扩增、繁殖,经诱导分化成具有细长突起的神经干细胞。2.菲立磁-多聚赖氨酸复合物能在体外标记骨髓基质干细胞,标记效率达到98％且无明显渗漏。3.1周后MRI扫描可见坐骨神经细胞移植处局限性低信号改变,4和8周后信号区域改变增大,16周未见明显信号改变。HE染色发现细胞移植组神经纤维再生良好,体外菲立磁标记骨髓基质细胞移植后可在坐骨神经内存活并向神经两断端迁移。组织学改变基本上与核磁共振影像相对应。 【结论】1.骨髓基质干细胞经体外诱导能分化为神经干细胞并保持其增殖活性。2.菲立磁-多聚赖氨酸复合物可在体外高效标记骨髓基质细胞,且不影响标记后细胞的活性、增殖和分化能力。3.菲立磁标记的兔骨髓基质细胞源神经干细胞移植后,可在宿主坐骨神经内存活、迁移,T2WI序列成像可清晰显示Feridex标记的BMSCs所致的低密度影像改变。利用MRI可以对移植后的标记细胞进行活体追踪。     

菲立磁-多聚赖氨酸复合物体外标记兔骨髓基质细胞

背景：为明确细胞移植后症状改善是否由移植所致,既往多采用侵袭性方法,但是这种方法不适用于动态追踪及人体研究。如果能够在合适示踪剂的帮助下,采用无创伤性影像学技术在活体识别、跟踪移植后细胞的存活状态,将显著提高细胞移植疗法的学术价值。 目的：初步探讨菲立磁-多聚赖氨酸复合物体外磁性标记兔骨髓基质细胞的可行性。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2008-03108在珠江医院神经外科实验室完成。材料：2月龄新西兰大白兔8只,由广州中医药大学实验动物中心提供。菲立磁为Advanced Magnetic公司产品,多聚赖氨酸为sigma公司产品。方法：无菌条件下穿刺抽取兔股骨骨髓,梯度密度离心法分离获取骨髓基质细胞,收集第2代细胞,加入含白血病抑制因子、碱性成纤维细胞生长因子及胎牛血清的神经干细胞培养基诱导5d。将50mg／L菲立磁和1．5mg／L多聚赖氨酸混合,振荡30min后,将复合物加入到细胞培养基中进行标记,孵育细胞24h。主要观察指标：骨髓基质细胞向神经干细胞诱导分化情况,细胞内铁的鉴定,菲立磁多聚赖氨酸复合物标记对细胞增殖或分化的影响。 结果：骨髓基质细胞诱导后可见少量细胞的胞体变圆变大,突起缩短,随时间延长,圆形细胞逐渐增多,部分聚集成簇、成球,FITC荧光染色示巢蛋白呈阳性表达。普鲁士蓝染色结果显示99％以上骨髓基质细胞的胞质内出现细4、的蓝色铁颗粒。在含菲立磁-多聚赖氨酸复合物的培养基中,骨髓基质细胞可继续增殖和分化,但增殖分裂后细胞质内铁颗粒数量较增殖前有所减少,经鉴定部分为神经元特异性烯醇化酶阳性细胞。 结论：菲立磁-多聚赖氨酸复合物可在体外高效标记骨髓基质细胞,且标记后细胞的活性、增殖和分化能力不受影响。     

Ilizarov技术治疗骨髓炎后肢体畸形短缩17例临床分析

目的总结运用外固定器行牵拉成骨术治疗胫骨骨髓炎后肢体畸形短缩的疗效及经验。方法回顾性分析采用外固定器治疗胫骨慢性骨髓炎致肢体畸形短缩的17例患者的临床资料。男11例、女6例，年龄15-48（26．5±13．7）岁，术前患侧肢体短缩差值（6．3±3．8）cm。结果全部患者均获随访。术后随访（27±12）个月，外固定指数（47．0±8．5）days／cm。延长范围4．9-13．1（8．3±2．7）cm，骨愈合指数为39．2days／cm，骨愈合率100％，所有患者双下肢基本等长。结论外固定器行牵拉成骨术用于治疗下肢畸形和肢体短缩，具有创伤小、不需二次手术、并发症少、手术效果好的优点。     

菲立磁细胞内标记兔骨髓基质细胞的初步观察

目的:探讨利用菲立磁(Fefidex)和转染试剂体外标记兔骨髓基质细胞的可行性,为临床上应用磁共振成像(MRI)追踪标记细胞奠定基础.方法:9只2月龄新西兰大白兔无菌条件下行股骨穿刺取骨髓,梯度密度离心法分离获取兔骨髓基质细胞,用菲立磁-多聚赖氨酸复合物(FE-PLL)标记骨髓基质细胞,采用普鲁士蓝染色和台盼蓝拒染实验等方法鉴定FE-PLL标记兔骨髓基质细胞的效率和细胞的活力,并在增殖条件下用改良SABC法进行抗单克隆神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色(DAB-H<,2>O<,2>棕色法呈色)和普鲁士蓝(Prussian blue)染色.对FE-PLL标记骨髓基质细胞的增殖和分化能力进行评估.结果:菲立磁可以高效率地标记兔骨髓基质细胞,标记效率在99%左右.普鲁士蓝染色显示FE-PIJL标记骨髓基质细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒.标记的骨髓基质细胞与正常未标记细胞相比较,细胞的活力、增殖和分化等能力没有明显的差异.结论:菲立磁可以用来体外标记骨髓基质细胞,标记后对骨髓基质细胞活力、增殖和分化能力无明显影响.