乌头汤对膝骨关节炎大鼠软骨细胞焦亡相关基因表达的影响

目的：探讨乌头汤通过调控软骨细胞炎性焦亡途径延缓膝骨关节炎软骨退变的作用与机制。方法：将36只SD大鼠(雄性,8周龄)随机分为空白对照组、模型对照组和乌头汤组,每组12只。空白对照组不造模,模型对照组和乌头汤组采用改良Hulth法造模。空白对照组与模型对照组采用生理盐水(3 mg·kg^-1·d^-1)灌胃,乌头汤组采用乌头汤(生药浓度4.2 g·mL^-1)灌胃。干预8周后,麻醉状态下摘取大鼠膝关节软骨。采用Western blot检测不同组别关节软骨中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的蛋白含量表达;采用Real-time PCR检测不同组别关节软骨中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18的基因相对表达变化。结果：模型对照组和乌头汤组NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白含量与基因相对表达量均上调,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P <0.01);乌头汤组能够下调NLRP3、Caspa...     

乌头汤对膝骨关节炎大鼠细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3的影响

目的通过观察乌头汤对膝骨关节炎大鼠血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-3的影响,探讨其治疗膝骨关节炎的作用机制。方法采用随机数字法将60只SD大鼠分为空白组15只和造模组45只。造模组在第1、4、7天采用4%木瓜蛋白酶关节腔内注射复制膝骨关节炎模型。成功造模后,随机分为模型组、对照组和治疗组各15只。空白组和模型组灌服0.9%生理盐水;对照组灌服双氯芬酸钠缓释胶囊;治疗组灌服乌头汤。2周为1个疗程,疗程期间休息2d,共干预4个疗程。观察4组大鼠一般情况、关节液情况及血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3浓度变化。结果与空白组比较,模型组血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-3浓度明显升;与模型组比较,对照组与治疗组血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-3浓度均明显降;与对照组比较,治疗组血清和关节液中IL-6浓度明显升。结论乌头汤通过降低血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-3含量,抑制炎症反应,降低细胞外基质降解,减缓软骨退变,从而起到治疗KOA的目的。     

H型血管铁死亡对骨质疏松性骨关节炎的影响及调节机制研究

随着全社会人口老龄化的加剧,绝经后女性罹患骨质疏松性骨关节炎的风险亦呈现高发趋势,严重危害中老年人的健康。研究证实血管形成及功能异常是加剧骨质疏松、骨关节炎病理退变的重要事件。H型血管(内皮细胞)在骨与软骨损伤修复中兼具成骨和成血管偶联功能,其形态与功能异常将影响骨质疏松、骨关节炎的损伤修复。铁死亡作为近年来发现的一种新型细胞死亡模式,其主要由铁依赖性脂质过氧化和活性氧诱导损伤引起细胞膜断裂,线粒体变小等改变。而H型血管铁死亡对骨质疏松性骨关节炎病程的影响途径及调节机制尚需进一步探讨,旨在为今后以H型血管铁死亡为切入点进而防治骨质疏松性骨关节炎开辟新方向。     

狗脊的药理作用及其在原发性骨质疏松症治疗中的应用

原发性骨质疏松症临床较为常见,虽然治疗方法多样,但是效果不尽相同。狗脊是治疗骨质疏松症常用中药中的一种,具有促进成骨细胞增殖和抑制破骨细胞生成的双向调节作用,虽然关于其有效成分的提取及药理作用的研究逐渐增多,但其抗骨质疏松的作用机制仍尚不明确,运用分子生物学技术研究其抗骨质疏松作用机制是今后的研究方向。     

中医药调控骨代谢防治强直性脊柱炎的研究进展

骨代谢紊乱在加剧强直性脊柱炎的病理进程中扮演了重要角色。强直性脊柱炎出现局部过度骨化的同时,存在全身骨量的流失,此外免疫及炎症反应也与骨代谢紊乱密切相关。通过检索国内外文献,对中医药维持强直性脊柱炎骨代谢平衡的分子学机制进行综述,认为中医药通过抑制强直性脊柱炎成骨相关的异位骨化,延缓强直性脊柱炎破骨相关的骨量流失,调节免疫及炎症反应维持强直性脊柱炎骨代谢平衡,发挥防治强直性脊柱炎的作用。     

基于lncRNA MGC-Mirg与PERK通路探讨荣筋拈痛方延缓膝骨关节炎小鼠软骨退变

目的 基于长链非编码RNA(lncRNA) MGC-Mirg与PRKR样内质网激酶（PERK）通路探讨荣筋拈痛方延缓膝骨关节炎模型小鼠软骨退变的机制。方法 48只8周龄小鼠适应性喂养1周后,采用随机数字表法分为空白组12只和造模组36只,造模组采用改良Hulth法诱导建立KOA模型,将造模成功的小鼠分为模型组、荣筋拈痛方组和阳性对照组各12只。荣筋拈痛方组按9 g/（kg·d）给予荣筋拈痛方药液灌胃;阳性对照组按500 mg/（kg·d）给予特异性内质网应激抑制剂牛磺熊去氧胆酸溶液灌胃;空白组和模型组按10 mL/（kg·d）给予生理盐水灌胃,均连续灌胃8周。采用HE染色与番红O-固绿染色观察小鼠关节软骨组织病理改变;Western blot检测膝关节软骨组织PERK、激活转录因子4(ATF4)、结合免疫球蛋白（BIP）、ER降解增强α-甘露糖苷酶样蛋白1(EDEM1)、生长停滞与DNA损伤诱导蛋白（GADD153）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白表达量;qPCR检测膝关节软骨组织lncRNA MGC-Mirg RNA相对表达水平。结果 与空白组比较,模型...     

大鼠电针后血清对肿瘤坏死因子α诱导凋亡软骨细胞Erk1/2、C-Myc、C-Fos和C-Jun基因表达的影响

目的观察大鼠电针后血清对肿瘤坏死因子α诱导凋亡软骨细胞Erk1/2、C-Myc、C-Fos和C-Jun表达的影响。方法应用随机数字表法将2月龄大鼠分为3组,经干预后,制备正常组、电针15 min组和电针30 min组血清。用Ⅱ型胶原酶消化法获取4周龄SD大鼠膝关节软骨细胞,应用随机数字表法将软骨细胞分为正常组、模型组、电针15 min组、电针30 min组。正常组予正常组血清干预,模型组予含10 ng/m L肿瘤坏死因子α(TNFα)的正常组血清诱导软骨细胞凋亡,电针15 min组和电针30 min组分别予含10 ng/m LTNFα的电针15 min组和电针30 min组血清进行干预。Annexin V-FITC/PI双染法检测各组软骨细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法检测各组Erk1/2、C-Myc、C-Fos和C-Jun m RNA的表达。结果 (1)软骨细胞凋亡率:模型组细胞凋亡率较正常组明显增多(P0.05),电针15、30 min组凋亡率较模型组明显减少(P0.05)。(2)相关基因检测:与正常组比较,模型组Erk1/2、C-Myc、C-Fos、C-Jun m RNA的表达显著升高(P0.05);与模型组比较,电针15min组与电针30min组的Erk1/2、C-Myc、C-Fos、C-Jun m RNA表达显著降低(P0.05)。结论大鼠电针后血清能有效抑制TNFα诱导的软骨细胞凋亡,其机制与抑制Erk1/2、C-Myc、C-Fos、C-Jun m RNA表达有关。     

基于PERK通路探讨荣筋拈痛方对软骨细胞内质网应激反应抑制作用

目的 基于PERK通路探讨荣筋拈痛方（RJNTD）对毒胡萝卜素（TG）诱导的软骨细胞内质网应激反应的抑制作用。方法 将30只4周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠处死后，体外分离双膝软骨细胞置于低糖DMEM培养基培养，经Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色法鉴定后将软骨细胞分成空白组、对照组、模型组和中药组。空白组常规培养4 h，对照组常规培养4 h后更换300μg/mL RJNTD培养液培养12 h，模型组用25μmol/L TG培养液培养4 h后改为常规培养，中药组用25μmol/L TG培养液培养4 h后更换300μg/mL RJNTD培养液培养12 h。干预后采用Real-time PCR检测各组软骨细胞中miRNA-377-3p相对表达水平；Western blot检测各组软骨细胞中内质网降解增强子（EDEM1）、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、转录激活子4(ATF4)、免疫球蛋白重链结合蛋白（BIP）与DNA损伤诱导基因153(GADD153)蛋白表达水平。结果 对照组各指标与空白组比较均无统计学意义（P均>0.05）；与空白组比较，模型组及中药组miRNA-377-3p相对表...     

荣筋拈痛方对白细胞介素-1β诱导的体外大鼠软骨细胞自噬相关基因表达的影响

目的:观察荣筋拈痛方对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的体外大鼠软骨细胞自噬相关基因表达的影响,探讨其防治膝骨关节炎的作用机制.方法:取4周龄SD大鼠膝关节软骨,进行软骨细胞的体外分离培养,选取第2代软骨细胞甲苯胺蓝染色进行细胞鉴定.经IL-1β10 ng·mL-1诱导建立体外软骨细胞炎症模型,诱导成功后,给予荣筋拈...