食管癌细胞体外培养筛选个体化治疗方案的研究

本实验旨在观察不同食管癌患者对药物的敏感性,为食管癌的临床化疗提供个体化用药的实验依据. 一、材料与方法 1.材料:选择济南军区总医院经手术切除的食管癌患者共58例,其中男35例,女23例,年龄(56.2±4.6)岁.     

端粒酶基因在胃癌、胃黏膜异型增生和肠上皮化生组织中的表达及意义

目的:探讨Herceptin(Her)对宫颈腺癌HeLa、鳞癌SiHa细胞的抑制差异,以及与卡铂(carboplatin,CBP)的协同作用及其机制。方法:以Her5、10、20、40、80μg/ml和CBP0.5、1、2、4、8μg/ml分别组成单药组和Her CBP联合用药组[(10 1)、(20 2)、(40 4)μg/ml],另设不加药对照组,分别作用于HeLa和SiHa细胞。MTT法检测Her对HeLa、SiHa细胞增殖的抑制作用及与CBP的协同作用,透射电镜观察肿瘤细胞的超微结构改变,流式细胞术检测用药后的细胞凋亡率及细胞周期,RT-PCR法检测细胞用药后her-2/neu和rasmRNA的表达,Westernblotting和免疫组化方法检测HER-2/neu和Ras蛋白的表达。结果:Her能明显抑制宫颈癌细胞生长,与CBP联合具有协同作用或相加作用(P<0.05,P<0.01)。Her能诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G1期;与CBP联合作用后凋亡率更高,使细胞周期进一步阻滞于G2期,同时降低S期比例。用药后her-2/neu和rasmRNA及其蛋白的表达也显著降低(P<0.05)。药物的抑制作用在宫颈腺癌Hela细胞中更明显些。结论:Her单药或与CBP联合应用能明显抑制宫颈癌HeLa、SiHa细胞生长,Her与CBP的协同作用与细胞周期的双重阻滞有关,且在腺癌HeLa细胞中更明显;Her通过抑制Ras/MAPK通路抑制宫颈癌细胞的增殖。     

MTT法检测中分化胃腺癌对化疗药物的敏感性

目的了解中分化胃腺癌对化疗药物的敏感性。方法用MTT比色法对35例中分化胃腺癌新鲜瘤组织进行8种化疗药物的敏感性测定。结果中分化胃腺癌对氟尿嘧啶、CTX和MMC敏感性较高。结论个体体外药物敏感性实验有助于中分化胃腺癌的患者选择个体治疗方案。     

化疗药物对胃癌细胞的杀伤效应

目的 探讨化疗药物对胃癌细胞的杀伤效应.方法 收集2006年4月至2007年2月济南军区总医院手术切除的84例胃癌标本,新鲜胃癌组织制备单细胞悬液,分别加入羟基喜树碱、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶和丝裂霉素培养48 h.MTT法观察药物作用后癌细胞活性变化.免疫组织化学检测生存素及PTEN的表达.采用χ~2、秩和检验和Fisher确切概率法分析数据.结果 不同化疗药物对胃癌细胞杀伤效应不同,分化差的胃癌较分化好的胃癌对化疗药物敏感.在印戒细胞癌、黏液腺癌及低分化腺癌中生存素阳性率高于乳头状腺癌及管状腺癌,差异有统计学意义(χ~2=10.625,P<0.05);而FFEN表达与生存素相反,差异有统计学意义(χ~2=6.060,P<0.05).生存素与5-氟尿嘧啶及阿霉素的体外耐药有关(χ~2=6.609,6.350,P<0.05).结论 MTT体外药敏实验有助于筛选个体有效化疗药物.生存素参与了肿瘤细胞化疗耐受,生存素与PTEN的表达有关.     

非发酵革兰阴性杆菌的临床调查与耐药性监测分析

目的了解我院2000-2004年非发酵革兰阴性杆菌的分布及耐药谱的变迁,以便于临床对非发酵细菌感染的监控与治疗。方法采用VITEK-32型微生物全自动分析仪进行菌种鉴定及药敏测试, 部分菌株药敏测试采用KB法。结果 5年间从临床标本中共分离出非发酵革兰阴性杆菌1 407株,占临床分离菌的34．13％。其中假单胞菌属的分离占绝对优势。对各类常见抗生素的药敏监测结果显示:醋酸钙-鲍曼复合不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和铜绿假单胞菌的耐药率及多重耐药率均呈明显上升趋势。所监测的各类抗生素以喹诺酮类抗生素环丙沙星对三种病原菌的敏感率下降最为明显。非发酵革兰阴性杆菌中嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性最强,只有复方新诺明和阿米卡星的敏感率在50％以上。醋酸钙-鲍曼复合不动杆菌对碳氢霉希类抗生素亚胺培南敏感率最高,始终位居首位。铜绿假单胞菌则是对亚胺培南和头孢他啶的敏感率较高。结论非发酵革兰阴性杆菌已成为医院感染的重要病原菌之一。日常工作中应加强对非发酵革兰阴性杆菌感染的预防,对于感染的治疗要合理选用抗生素以提高治愈率。     

化疗药物对原代胃癌细胞的体外杀伤效应及其与Bcl－2表达的关系

目的观察化疗药物对原代胃癌细胞的体外杀伤作用，探讨其与胃癌组织中Bcl-2蛋白表达的关系。方法新鲜胃癌组织制备单细胞悬液，分别加入紫杉醇（Tax）、顺铂（DDP）、阿霉素（ADM）、氟尿嘧啶（5-Fu）和丝裂霉素（MMC）培养48h。四氮唑盐还原法（MTr）观察药物作用后癌细胞活力及代谢活性变化。免疫组织化学技术检测Bcl-2的表达。结果5种化疗药物平均抑制率依次为Tax（40．6±6．9）％、5．FU（38．9±9．2）％、CDDP（38．4±7．8）％、ADM（31．6±8．5）％、MMC（28．9±9．8）％。不同类型胃癌对5种化疗药物的敏感性由强到弱依次为印戒细胞癌、管状腺癌、黏液腺癌和乳头状腺癌。全组Bcl-2阳性率为80％，阳性者对5-FU、MMC和ADM有较强的耐药性。结论MTr比色法体外药敏试验。有助于筛选个体化有效治疗药物。Bcl-2的高表达可能是胃癌多药耐药的原因之一。     

三种多药耐药基因产物在胃癌组织中的表达及其与p16、p53蛋白的关系

目的：探讨三种多药耐药基因产物P-糖蛋白（Pgp）、胎盘谷胱甘肽-S-转移酶（GST-π）和拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）在不同类型胃癌组织中的表达及其与p16、p53蛋白的关系.方法：用免疫组化染色法检测各种物质表达情况。结果：Pgp、GST-π在各组胃癌中表达的阳性率无显著性差异（P〉0．05），但其阳性程度则不同（P〈0．05）：TopoⅡ在低分化腺癌和黏液细胞癌的表达显著高于高分化腺癌和黏液腺癌（P〈0．05）。抑癌基因产物p16、p53在不同类型胃癌组织中的表达无显著性差异（P〉0．05）：结论：抑癌基因的状态与肿瘤耐药性可能有关，p53阳性的肿瘤可能对化疗的敏感性较低。     

食管癌细胞体外培养药敏试验与P-gp、LRP表达的相关性研究

目的 研究不同食管癌患者对药物的敏感性及其与P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药相关蛋白(LRP)的关系,为食管癌的临床化疗提供个体化用药的实验室依据.方法 选取手术切除的新鲜食管癌组织标本,选用食管癌化疗常用的药物及化疗方案进行食管癌原代培养细胞MTT药物敏感试验,同时应用免疫组织化学方法检测食管癌细胞P-gp及LRP的表达情况.结果 单一用药对食管癌细胞的敏感性不同或不完全相同(P＜0.05).联合用药以紫杉醇联合顺铂效果最好,其次为顺铂联合长春瑞滨、顺铂联合5-氟尿嘧啶.顺铂的敏感性与P-gp表达程度无关(P＞0.05),与LRP表达的强弱有关(P＜0.05),长春瑞滨、紫杉醇的敏感性均与P-gp和LRP表达的程度有关(P＜0.05),5-氟尿嘧啶与P-gp、LRP的表达程度无关(P＞0.05).结论 采用食管癌体外药敏试验能筛选出对每个患者的敏感药物,指导肿瘤患者的个体化用药,P-gp和LRP表达与部分化疗药物的耐药存在相关性,可为指导临床个体化用药的选择提供依据.