一种简单分离、传代培养成年小鼠肝细胞的方法

目的寻找肝细胞分离、传代培养更简单方便的方法。方法应用不同胰酶浓度、不同消化时间消化成年小鼠肝组织后进行组织块培养,观察细胞的贴壁率、产量及活力。结果胰蛋白酶分离成年小鼠肝细胞,于MEM(含20%小牛血清)培养液中,37℃密闭培养,生长情况良好,12小时左右即可完全贴壁,并已传至第二代。胰酶浓度为0.15%,消化时间15min,细胞产量及活率较高,每10g体重细胞产量为0.84±0.08×107,细胞活力为(90.66±5.71)%,贴壁生长48小时细胞倍增PD值为0.86±0.05。结论胰蛋白酶消化、组织块贴壁法是成年小鼠肝细胞分离、培养传代的简便方法,不需要特殊装置,酶耗费少,细胞采集可满足一般实验要求。     

长期乙醇摄入对小鼠肝MDA,SOD及血脂含量的影响

目的：观察长期连续小剂量乙醇经口摄入对小鼠肝ＭＤＡ,ＳＯＤ及血脂含量的变化。方法：小鼠每天经口给予１２．５％乙醇２．５ｇ／ｋｇ一次,在连续给乙醇后第２、４、６、８周末随机取１２只断头取血,分离血清测定血脂,取肝测定ＭＤＡ含量及ＳＯＤ活性。结果：小鼠摄入２．５ｇ／ｋｇ乙醇第４、６、８周后肝ＭＤＡ含量显著增加,ＳＯＤ活性明显降低,与对照组比差异非常显著（Ｐ〈０．０１）;血清ＴＣＨ,ＴＧ,ＬＤＬ－ＣＨ也     

雷公藤内酯醇抗人肝癌SMMC-7721细胞活性研究

目的: 评价雷公藤内酯醇抗人肝癌SMMC-7721细胞的作用.方法: 采用体外细胞培养和SD大鼠体内肿瘤接种两种衡量方法,体外细胞培养检测指标包括细胞形态观察,台盼蓝染色,DAPI染色,DNA ladder;SD大鼠体内接种肿瘤指标检测用游标卡尺测量肿瘤体积大小.结果: 与对照组相比,体外培养肿瘤细胞在用药后活细胞大幅减少,体内接种肿瘤细胞在用药后,肿瘤块体积较小且增长缓慢,而对照组肿瘤体积却大幅增长.结论: 雷公藤内酯醇对体外和体内培养的人肝癌SMMC-7721细胞有明显的生长抑制作用和促凋亡作用.     

糖尿病人胰岛素泵围手术期强化治疗30例护理

临床资料 1一般资料选择在我院接受治疗的30例围手术期糖尿病患者，其中，男性20例，女性10例1年龄最大的82岁，最小的40岁；患病时间最长的18年，最短的2年；所要实施的手术包括脊柱手术、四肢手术、腹部手术等。所有患者均服用降糖药效果不理想。     

当归多糖对血瘀证动物免疫功能和抗氧化功能的影响

 目的：研究当归多糖(angelica polysaccharide,ASP)对血瘀证大鼠的影响。方法：采用阿霉素造大鼠血瘀证模型，观察当归多糖对血瘀证动物免疫功能和抗氧化功能的作用。结果：当归多糖可明显改善血瘀证大鼠免疫功能, 其胸腺指数和脾脏指数明显升高，免疫球蛋白IgG、IgM、补体C5含量明显升高，升高心、脑、肾、胰四脏器超氧化物歧化酶(SOD)活性，降低心、脑、肾、胰四脏器丙二醛(MDA)含量（P<0.05或P<0.01）。结论：当归多糖具有抗氧化效应和免疫促进效应。     

阿司匹林对结肠癌细胞株SW480生长增殖及癌胚抗原含量的影响

目的：观察阿司匹林对结肠癌细胞株SW480生长增殖及癌胚抗原含量的影响。方法：结肠癌细胞株SW480常规培养于含有10％小牛血清的RPMI1640培养液中，在37℃，5%CO2中贴壁培养。分别给予阿司匹林0、2．5mmol/L、5．0mmol/L、10．0mmol/L,于加药后2、4、6天微粒子捕捉免疫法测定癌胚抗原（CEA）；四甲基谷氮唑蓝实验（MTT）法测定SW480生长抑制率。结果：阿司匹林能减少CEA的生成，对SW480的生长抑制作用呈浓度依赖关系。在观察的药物浓度和时间范围内，共抑制最高达78．72％。结论：阿司匹林能抑制结肠癌细胞株SW480生长；CEA可能是监测结肠癌发生、发展、预后的有效指标。     

雷公藤片对小鼠睾丸组织的毒性作用及其分子机制研究

目的:探讨雷公藤片对小鼠睾丸组织毒性作用及其分子机制.方法:成熟雄性小鼠,分别于每天上午10:00左右灌胃给予雷公藤片105 mg/kg(含雷公藤甲素40 μg/kg),于给药4周后观察精子畸形率;HE染色,光镜观察睾丸组织的形态学变化;免疫组化法观察睾丸组织iNOS、eNOS和凋亡相关基因Fas-L、Bcl-2和Bax的表达;原位杂交观察睾丸组织核转录因子NFκB的表达.结果:给药4周后,与正常对照组相比,给药组精子畸形率明显升高(P＜0.05);组织形态学检查可见给药组小鼠睾丸生精小管内初级精母细胞和精子明显减少,生精细胞排列紊乱,精原细胞和支持细胞也有所减少;与正常对照组相比,给药组睾丸组织iNOS表达无明显改变,eNOS的表达明显下调;凋亡相关基因Fas-L和Bax的表达明显上调,而Bcl-2的表达无显著差异;雷公藤可明显抑制睾丸组织核转录因子NFκB的表达.结论:雷公藤长期毒性主要表现为对生殖系统的毒性作用,其毒性可能与核转录因子NFκB表达的过度抑制,引起睾丸组织凋亡相关基因表达上调,导致睾丸组织凋亡有关,提示预防睾丸组织凋亡将有助于降低雷公藤的生殖毒性.     

硫化氢对脂肪肝脂细胞脂联素分泌的调节

目的 观察硫化氢是否调节脂肪肝脂细胞脂联素的分泌。 方法 对32只雄性SD大鼠采用完全随机化法分成正常喂养组 (n=8)、 高脂饮食组 (n=8)、高脂+半胱氨酸组 (n=8)、高脂+炔丙基甘氨酸（胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂）组(n=8)。利用高脂饮食复制脂肪肝动物模型,加用1%L-半胱氨酸和炔丙基甘氨酸（PPG）喂养改变硫化氢的产生,观察8周后动物肝脏脂肪变性和血清内脂联素的含量。取动物大网膜脂肪组织,利用胶原酶Ⅰ消化法分离脂肪细胞,加用NaHS和PPG,体外刺激7 d后,检测细胞上清脂联素的含量变化。结果高脂饮食8周后脂肪肝形成,应用L-半胱氨酸后脂肪变性明显减轻;而应用PPG肝脏脂肪变性加重。高脂饮食组动物血清中硫化氢和脂联素含量分别为（21.13±7.06）mmol/L和（3.16±1.15）mg/L,较正常喂养组（29.13±13.06）mmol/L和 (8.98±2.84)mg/L明显减少（P=0.0229,P=0.0062）。与高脂饮食组比较,高脂+半胱氨酸组两者明显增加为（35.47±9.04）mmol/L和（6.54±1.38）mg/L（P=0.0032,P=0.0131）;高脂+PPG组两者明显减少为（16.65±8.79） mmol/L 和（2.50±0.91） mg/L（P=0.0191,P=0.0021）。正常喂养组与高脂饮食组分离脂肪细胞培养液中的硫化氢含量差异无统计学意义［（26.77±12.65）比(28.76±9.09)mmol/L,P=0.0927］。与高脂饮食组比较,高脂+硫氢化钠和高脂+PPG组的细胞上清液中硫化氢增高和减少明显（P=0.0000,P=0.0000）。高脂饮食组与正常喂养组分离脂肪细胞培养液中的脂联素含量差异无统计学意义［（4.21±1.61）比（4.49±1.09）mg/L,P=0.1076］,加NaHS和PPG细胞上清液中脂联素较高脂饮食组上清液中明显增高和减少［（5.77±0.86） 比 (4.21±1.61)mg/L, P=0.0094;(3.01±1.26) 比 (4.21±1.61)mg/L,P=0.0108）］。 结论硫化氢能促进脂肪肝脂细胞脂联素的分泌。     

肝硬化病人血清IL-10、IL-18水平变化的临床意义

目的探讨血清白细胞介素10（IL-10）、血清白细胞介素18（IL-18）在肝炎后肝硬化发病机制中的作用。方法采用ELISA法检测103例肝炎肝硬化病人和20例健康献血员血清IL-10、IL-18的水平,观察肝功能child-pugh分级、腹水、血清白蛋白和血清总胆红素水平与血清IL-10、IL-18水平之间的关系。结果肝功能child-pughA、B、C级组血清IL-18水平均明显高于对照组（P〈0．01）,肝功能child-pughA级组血清IL-10水平略高于对照组,但无显著性差异（P〉0．05）;肝功能child-pughB、C级组明显低于对照组（P〈0．05）;有腹水组、无腹水组血清IL-18水平均明显高于对照组（P均〈0．01）,有腹水组血清IL-10水平明显低于无腹水组、对照组（P〈0．05,P〈0．01）;血清IL-10水平与血清IL-18水平呈负相关（r=-0．51,P〈0．01）;血清白蛋白水平与血清IL10水平呈正相关（r=0．566,P〈0．01）,与血清IL-18水平呈负相关（r=-0．315,P〈0．01）;血清总胆红素水平与血清IL-18水平呈正相关（r=0．677,P〈0．01）,与血清几-10水平呈负相关（r=-0．339,P〈0．01）。结论IL-10、IL-18在肝炎肝硬化的发病机制中起一定的作用,其水平与肝损害程度密切相关。     

糖尿病酮症酸中毒合并下肢深静脉血栓形成一例

患者 ,女 ,5 5岁 ,既往有糖尿病病史 14年 ,平时口服降糖药治疗 ,空腹血糖波动于 8～ 14mmol L。入院前 3个月自行停用降糖药后多尿多饮等症状明显加重 ,于 2 0 0 2年 3月 2 3日至我院就诊 ,查随机血糖 >33 .3mmol L ,尿糖 ( +++) ,尿酮体 ( +++)。入院后实验室检查 :pH 6 .92 0 ,PO2 10 0mm Hg ,PCO2 12 .8mmHg ,碱剩余 2 8mmol L ,血钠 133mmol L ,血钾 5 .6 3mmol L ,血氯 94mmol L。血浆白蛋白 2 3g L ,血白细胞 17.3× 10 9 L ,中性 73.4%。诊断为 2型糖尿病并严重酮症酸中毒 (DKA)。经补液扩容、小剂量胰岛素静脉滴注维持( 3…