血清胸苷激酶1对Ⅳ期结肠癌化疗疗效评估的价值

目的 分析血清胸苷激酶1(S-TK1)对Ⅳ期结肠癌患者化疗疗效评估的价值.方法 采用免疫印迹增强化学发光法检测61例Ⅳ期结肠癌患者和41例健康体检者的S-TK1水平.结果 Ⅳ期结肠癌患者的S-TK1水平[(3.47 ±2.33) pmol·L-1]高于健康体检者[(1.07±0.87) pmol·L-] (P＜ 0.05);S-TK1水平与Ⅳ期结肠癌患者的ECOG评分有关(P＜0.05);与化疗前比较,化疗后获得疾病控制的Ⅳ期结肠癌患者S-TK1水平呈下降趋势(P＜0.05),PD患者S-TK1水平明显上升(P＜0.05).结论 监测S-TK1水平对预测Ⅳ期结肠癌的化疗疗效具有一定的价值.     

小鼠FABP3基因全长cDNA的克隆、真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的克隆小鼠FABP3基因的全长cDNA,构建其真核表达载体,并于COS-7细胞内表达。方法利用PCR技术扩增小鼠FABP3基因的开放阅读框序列,并在3′末端连接24bp的Flag标签,克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,构建表达质粒pcD-NA3.1-FABP3和pcDNA3.1-FABP3-Flag,并行PCR、双酶切及测序鉴定。将构建的重组质粒通过脂质体转染COS-7细胞,分别采用RT-PCR和免疫荧光法检测其FABP3mRNA及蛋白的表达情况。结果所构建的pcDNA3.1-FABP3和pcDNA3.1-FABP3-Flag重组载体可酶切出418bp的FABP3 cDNA片段和442bp的FABP3-FlagcDNA片段,经测序证实正确。转染后的COS-7细胞经RT-PCR可扩增出278bp的目的片段,且免疫荧光分析可见特异性的FABP3及Flag蛋白表达。结论构建了FABP3基因真核表达载体pcDNA3.1-FABP3和pcDNA3.1-FABP3-Flag,并于COS-7细胞中成功转录表达,为后续研究奠定了基础。     

微小RNA-203与肿瘤

微小RNA (miR)-203具有细胞干性抑制潜能,可通过抑制细胞干性相关转录因子的表达来调节细胞上皮样分化.研究表明miR-203在多种肿瘤组织中表达异常,包括膀胱癌、乳腺癌、结肠癌和胰腺癌等.miR-203通过调节细胞增殖、分化和凋亡在肿瘤的发生发展中发挥重要作用.     

先天性心脏病患者CHD7基因突变的研究

目的 筛查先天性心脏病(congenital heart fflsease,CHD)患者CHD7(chromodomsin helicase DNA-binding protein gene)基因的胚系突变,探讨其在先心病发生中的作用.方法 采集67例临床确诊的CHD患儿、100名正常对照的外周静脉血,提取白细胞基因组DNA,PCR扩增CHD7基因,变性高效液相色谱分析技术对PCR产物进行突变筛选,出现异常峰型的扩增片段进行DNA测序,明确突变位点和类型,并进一步结合病例对照和生物信息学分析探讨变异的功能意义.结果 67例先心病患者中共检出7种单碱基的替换,位于CHD7的不同内含子.其中,IVS11+127A＞G和WS12+21T＞G的等位基因频率均为0.0075,为罕见变异;而IVS2+34G＞A、IVS4+39C＞A、IVS12.5T＞C和IVS16+51C＞A等位基因频率为0.2635、0.2156、0.1505、0.3636,属于单核苷酸多态性;IVS12-5T＞C在CHD组的检出频率显著低于正常对照组(5.42%vs 9.57%,P＜0.05);而IVS14-35C＞G则仅见于CHD患儿.生物信息学分析显示,IVS12-5T＞C替换具有增强外显子剪切的效应.结论 CHD7基因单核苷酸多态性变异WS12-5T＞C对CHO的发生可能具有保护作用,而CHD7基因的突变并不是构成散发性先天性心脏病的主要原因.