细粒棘球蚴95抗原基因的克隆及原核表达质粒的构建

目的：克隆细粒棘球蚴95（Eg95)抗原基因，构建携带目的基因的原核表达载体，为细粒棘球蚴抗原的免疫保护机制研究提供材料。方法：应用PCR方法从细粒棘球蚴cDNA文库中克隆获得Eg95抗原基因，将其克隆至pUCm-T载体，测序确定其正确性。利用定向克隆技术将Eg95抗原基因片段克隆至原核表达质粒pET28上，根据选择标记的卡那霉素抗性基因筛选到阳性克隆，通过酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆，测序确定序列。结果：测序表明所有pET28-Eg95阳性克隆均为正确连接95抗原基因的重组质粒。结论：pET28-Eg95可以进一步用于重组蛋白的表达及抗细粒棘球蚴感染的实验研究。     

Caspase-7蛋白在中耳胆脂瘤中的表达及意义

目的:探讨Caspase-7蛋白在中耳胆脂瘤的发生、发展中的作用,为中耳胆脂瘤的临床诊断、治疗及预后提供新途径。方法:收集2016年12月-2017年7月佳木斯大学附属第一医院耳鼻咽喉科经病理科证实的术中标本45例。其中中耳胆脂瘤标本30例为试验组,正常外耳道皮肤组织15例为对照组。采用免疫组化SP法分别检测两组中Caspase-7蛋白的表达情况。结果:Caspase-7蛋白在试验组的阳性表达要明显高于对照组,差异有统计学意义(x~2=4.727,P0.05)。结论:在中耳胆脂瘤上皮组织中Caspase-7蛋白呈高表达趋势,其阳性表达率显著高于正常外耳道皮肤组织,提示Caspase-7蛋白在中耳胆脂瘤的发生发展中起到重要作用。     

热休克蛋白90与肿瘤的研究进展

热休克蛋白(Heat Shock Protein,HSP)是主要作为分子伴侣参与蛋白质的合成、折叠,维持细胞的蛋白质空间构象和保护细胞免受损伤等重要生物学功能的一种蛋白质。HSP90在维持分子伴侣结构、调控细胞周期及凋亡、协调激素信号传递、促进创面愈合方面发挥重要作用。并且HSP90在肿瘤的发生和演进中也发挥重要的作用。近年来,HSP90抑制剂针对恶性肿瘤进行相关研究,在分子靶向治疗方面取得一定的成果,但在临床应用还需进一步的研究。本文以热休克蛋白90为靶标对肿瘤的相互关系研究现状进行综述。     

胃癌相关基因表达与其生物学行为关系研究

目的探讨P21、细胞周期素D1(CyclinD1)及P53基因表达与胃癌生物学行为的关系。方法应用原位杂交免疫组化技术检测74例胃癌组织及癌旁正常粘膜P21和CyclinD1mRNA及P53蛋白表达,分析三者与胃癌生物学行为的关系。结果74例胃癌组织和癌旁正常粘膜中,P21、CyclinD1及P53表达阳性率分别为43.2%和55.4%、40.5%和78.4%、25.7%和1.4%,三者比较均有显著性差异(P<0.01)。P21、CyclinD1及P53表达与患者性别、年龄、分期无明显相关性(P>0.05),与淋巴结转移显著相关(P<0.05);胃癌分化程度与P21阳性表达呈正相关,与CyclinD1阳性表达呈负相关。结论胃癌中P21低表达、CyclinD1和P53过表达可能促使胃癌细胞增殖,且具有更强的侵袭力;多基因表达异常可作为评价胃癌预后的重要参考指标。     

PBL教学法在我国医学教育中的应用实践与思考

PBL教学法是以学生为主导的教育模式。文章深入探究PBL教学理念,分析PBL教学法在国内医学教育中的应用现状和差异及PBL教学在我国医学教育中优势和存在问题,并结合我国医学教育的实践和要求,提出相关思考与建议。     

小鼠感染泡球蚴后细胞因子水平的变化

目的　观察人工接种泡球蚴(EM)昆明小鼠体内6种细胞因子水平的动态变化,研究泡球蚴病的免疫学机制。　方法　实验组和对照组小鼠分别腹腔接种泡球蚴及生理盐水,持续观察260d,收集各组血清用ELISA法检测血清中白细胞介素2(IL2)、γ干扰素 (IFNγ)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、IL4、IL5、IL10水平。　结果　实验组6种细胞因子水平始终高于正常对照组,其中辅助性T细胞1(Th1)类细胞因子IL2水平在感染后 80d达到峰值,感染140d后迅速降低;TNFα水平在感染后40d较对照组明显上升,感染100d左右达到峰值,140d后迅速下降;IFNγ在感染80d后达到峰值,140d后缓慢下降;而在80d以前,辅助性T细胞2(Th2)类细胞因子IL4、IL5、IL10维持在较低水平;100d后,这3类细胞因子明显上升,其中IL4、IL10水平在100d达到峰值,IL5水平在140d达到峰值,以后维持在较高水平。　结论　Th2细胞介导的体液免疫与Th1细胞介导的细胞免疫共同参与了宿主抗棘球蚴免疫。感染早期以Th1细胞介导的细胞免疫应答为主,感染中晚期转化为以Th2细胞介导的体液免疫为主。     

细粒棘球蚴囊液对体外培养小鼠脾细胞Foxp3及Smad4基因表达的影响

目的观察细粒棘球蚴囊液对体外培养BABL/c小鼠脾脏细胞中调节性T细胞(Treg细胞)相对特异分子Foxp3(叉头蛋白3)及TGF-β1(转化生长因子-β1)下游信号通路Smad4表达的影响。方法以BABL/c小鼠作为脾细胞供者,用研磨法分离脾脏细胞,随机分为实验组(与细粒棘球蚴囊液共同培养)和对照组,取1×105个细胞接种于96孔板上,分别在1、3、6和12 h提取RNA,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Foxp3以及Smad4的基因表达。结果 qRT-PCR显示,细粒棘球蚴囊液处理1、3和12 h,实验组Foxp3表达量分别为4.577±0.317、8.517±0.978和7.406±0.822,对照组分别为9.274±0.451、3.297±0.408和2.464±0.328,差异均有统计学意义(P<0.05);细粒棘球蚴囊液处理1 h和12 h,实验组Smad4表达量分别为3.862±1.417和1.690±0.248,对照组分别为1.689±0.221和3.600±1.081,差异有统计学意义(P<0.05),且Foxp3与Smad4二者之间存在负相关(r=-0.991,P<0.05)。结论...     

白藜芦醇对人胃癌细胞凋亡及其与Survivin蛋白表达的影响

目的 探讨药用植物中提取的白黎芦醇对人胃癌SGC7901细胞增殖和凋亡的影响及其处理后人胃癌细胞凋亡与Survivin蛋白表达的影响,为寻求新的胃癌治疗策略提供理论依据.方法 实验于2003年4月～2004年5月在重庆医科大学完成.应用流式细胞仪检测白黎芦醇对胃癌细胞SGC7901增殖抑制、凋亡诱导及对细胞周期的影响,应用免疫组织化学法观察白黎芦醇对SGC7901细胞处理后Survin蛋白表达的影响.结果 流式细胞仪技术检测胃癌细胞SGC7901,其凋亡率分别为对照组为0.00%,白黎芦醇组为3.45%.同时白黎芦醇可以使胃癌细胞周期分布发生明显变化,表现为G0/G1期细胞比例上升,S期和G2/M期细胞比例下降.白黎芦醇处理细胞后Survivin蛋白表达降低,和对照组比较差异有显著性(P<0.01).结论 白藜芦醇可抑制人胃癌细胞株SGC7901的增殖作用,其机制可能与诱导人胃癌细胞株SGC7901细胞出现凋亡、改变细胞周期及下调人胃癌细胞株Survivin的表达有关.     

SDF-1和CXCR4在鼻内翻性乳头状瘤的表达及意义

目的 探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和趋化因子受体4(CXCR4)在鼻内翻性乳头状瘤(NIP)中的表达及其在该病发生、发展中的意义.方法 采用免疫组织化学方法检测41例鼻内翻性乳头状瘤、38例正常鼻腔黏膜(NM)、17例鼻鳞状细胞癌(NSCC)组织中SDF-1和CXCR4的表达.结果 SDF-1和CXCR4在NM、NIP、NSCC中的表达呈递增趋势,两两对比,其差异均有显著性(P＜0.05).SDF-1和CXCR4在NIP中的表达呈显著正相关(P＜0.01).结论 SDF-1和CXCR4均参与NIP的发生、发展过程,并且二者之间存在反馈调节机制,在NIP的发生、发展过程中起协同作用.