甲硝唑注射液的细菌内毒素检查

本文参照《美国药典》xxⅢ版及《中国药典》1995年版二部，“细菌内毒素检查法”中的干扰试验的基本原理，用细菌内毒素检查法对甲硝唑注射液进行了细菌内毒素检查方法的研究，实验结果表明，甲硝唑注射液（100ml：500mg）稀释3倍后无干扰作用。笔者认为，可用细菌内毒素检查法代替热原家兔法。     

影响细菌内毒素检查结果的因素

细菌内毒素检查法（凝胶法）已收载于《中国药典》 １９９５年版。该方法由于其灵敏、简便、快速、重现性好,正逐渐取代热原家免法,并被广泛应用于药品的质量控制,但是该法的实验结果受多种因素的影响。１鲎试剂的质量 《中国药典》 １９９５年版规定,该法使用由东方鲎的血液变形细胞溶液物制成的鲎试剂。新购用的鲎试剂要进行灵敏度复核,要将内毒素标准品制成４个浓度,即２λ,λ,０.５λ和０. ２５λ。每一浓度４管,最高浓度应为阳性,最低浓度应为阴性,反应终点浓度的几何年均值应在０．５λ～２λ之间,这样的鲎试剂才符合规定…     

DNA依赖性蛋白激酶催化亚基在电离辐射诱发HeLa细胞自噬中的作用

目的：了解DNA依赖性蛋白激酶催化亚基（ DNA-PKcs）在电离辐射诱发细胞自噬中的作用。方法通过慢病毒载体（ pSicoR ）构建DNA-PKcs短发夹RNA （ shRNA ）表达载体,并转染HeLa细胞敲低DNA-PKcs表达。CCK-8实验检测细胞增殖活性及细胞放射敏感性,免疫印迹检测自噬相关蛋白表达,免疫荧光实验检测自噬标志物GFP-LC3的表达。结果成功构建shRNA敲低DNA-PKcs表达的HeLa细胞模型,通过该细胞模型观察到抑制DNA-PKcs蛋白表达导致细胞增殖能力降低、放射敏感性增高。 P62和LC3蛋白表达变化,以及细胞内绿色荧光蛋白（ GFP）-LC3免疫荧光斑检测结果显示,DNA-PKcs基因敲低后,明显增加X射线诱发细胞自噬。抑制DNA-PKcs导致哺乳动物西罗莫司（雷帕霉素）靶蛋白（ mTOR）第2481位丝氨酸磷酸化水平降低。结论抑制DNA-PKcs增强受照射宫颈癌HeLa细胞的自噬及放射敏感性,mTOR信号通路可能参与DNA-PKcs对自噬的调节作用。