印迹基因H19对人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3侵袭能力的影响

目的探讨印迹基因H19对滋养细胞侵袭能力的影响,以期从分子遗传学角度来阐明滋养细胞侵袭行为的调控机制。方法含人全长H19 cDNA重组真核表达质粒pRc/CMV经测序鉴定正确后,转染滋养细胞株JEG-3,观察其H19 mRNA表达和细胞侵袭力的变化。结果质粒转染JEG-3细胞的转染效率〉50%,转染目的基因H19后mRNA表达较对照组显著升高;转染目的基因后JEG-3细胞穿膜细胞数明显少于未转染组和空载体转染组。结论H19基因过表达可抑制JEG-3的侵袭能力,为H19调控滋养细胞侵袭行为提供了直接的实验证据。     

RGS4在HUEVCs凋亡中的作用及地塞米松对其的影响

目的研究RGS4对常氧和低氧培养条件下HUEVC细胞凋亡的影响及地塞米松在其中的作用,以探讨RGS4在HUEVC细胞凋亡中的作用及地塞米松处理对其的影响。方法采用O2／N2／CO2三气培养箱模拟常氧和低氧条件培养HUEVC细胞,RGS4真核表达载体转染HUEVC细胞后采用流式细胞仪（Annexin-V-FITC-PI法）检测细胞凋亡。结果常氧条件下RGS4转染细胞和地塞米松处理对细胞凋亡无明显影响,低氧培养条件下细胞凋亡增加（P〈0．01）,RGS4转染后可使HUEVC细胞凋亡显著减少（P〈0．01）,地塞米松和RGS4同时处理后HUEVC细胞的凋亡与单纯RGS4转染无显著差别。结论RGS4不影响常氧条件下的HUEVC细胞凋亡,但可明显抑制低氧条件下的HUEVC细胞凋亡,地塞米松抑制细胞凋亡的作用可能与RGS4有关或者通过相同的细胞信号通路抑制低氧条件下的细胞凋亡。     

小鼠急性肺损伤后糖皮质激素受体的活性改变与热休克蛋白的关系

目的 研究急性肺损伤(ALI)后机体内糖皮质激素受体(GR)的配体结合活性显著下降与其分子伴侣热休克蛋白(Hsps)改变的关系.方法 以小鼠油酸急性肺损伤为模型,用Western blotting和受体的放射配体结合试验动态观察伤后GR、Hsp90、Hsp70和GR的结合容量和亲和力变化.结果 伤后小鼠肺组织水肿、肺体指数和肺含水量显著升高;GR在伤后1 h升高,然后显著下降,在12 h达最低点;Hsp90和Hsp70在伤后的表达逐渐升高,在12 h达最高点.配体结合试验显示在伤后GR Bmax逐渐下降,Kd值升高,与Hsp90/GR的变化趋势一致.结论 急性肺损伤后的GR配体结合活性的改变可能与Hsp90的变化有关.     

血液灌流抢救海洛神中毒一例

血液灌流抢救海洛神中毒一例空军天津医院陈星云患者冯风印，女、６６岁。近２月每晚服海洛神２片，发病前曾加量２片服用。之后出现意识不清，呼之不应。入院时呈深昏迷，双侧瞳孔等大、等园，光反射不存在。四肢反射消失。Ｔ３５．６℃，Ｐ９０次／分，Ｒ２５次／分，Ｂ...     

创伤和放创复合伤愈合过程中c-ski的变化及其与创面愈合结局的关系

目的观察c-ski在创伤和放创复合伤愈合过程中的表达规律，探讨其与创伤愈合和辐射伤组织修复延迟的关系。方法在大鼠创伤和放创复合伤后3，6，9，15d和愈合时，免疫组化和原位杂交检测肉芽组织c-ski表达．5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入检测组织增殖，TdT介导的dUTP缺口末端际记（TUNEL）检测细胞凋亡率、结果创伤后3d c—ski开始表达，9d达到峰值，愈合后显著下降；多种细胞均有高峰度表达．并以成纤维细胞最为显著；辐射侧伤后3～9d的表达显著低于创伤对照侧、辐射导致细胞增殖下降（3～9d）和高峰滞后（15d），与c—ski变化类似。辐射后3～9d的凋亡率显著高于对照侧结论c-ski可能是一新的组织修复相关基因，它可能通过凋节增殖和凋亡的平衡促进创伤愈合辐射导致c-ski表达下降可能是其延缓愈合的原因之一。     

汽车安全气囊破裂造成的手全层皮肤烧伤

ＶｉｔｅｌｌｏＷ等报道了1例由于汽车安全气囊破裂造成手全层皮肤烧伤病例。患者为18岁男性,被送到创伤中心时,患者左手复合伤、头皮撕裂伤和右手尺侧表面(包括小鱼际区和小指)全层皮肤烧伤。烧伤后3天对右手进行清创和裂口处全层皮肤(52ｃｍ2)移植。烧伤后32天,移植皮肤坏死,对患者右手坏死皮肤和外展小肌肉进行清创。18天后成功完成了裂口处皮肤移植和挛缩松解。该车的安全气囊罐内含有化学药品叠氮钠和氧化铜。水可以与叠氮钠反应形成剧毒和具有爆炸性的叠氮酸。当叠氮酸接触到打火线或温度高于300°Ｆ时可被引燃。作者推断该患者在该车…     

乳果糖对细菌移位的影响

通常生存于胃肠道的细菌,在特定情况下可以穿过粘膜上皮到肠系膜淋巴结和全身循环,这一过程称为细菌移位。细菌移位发生率的增加与多种病理过程有关。梗阻性黄疸与内     

5-杂氮脱氧胞苷对JEG-3细胞侵袭力的影响及相关机制探讨

目的研究甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-2-′deoxycytidine,ADC)对人绒毛膜上皮癌细胞株JEG-3细胞侵袭能力及其对JEG-3细胞H19甲基化状态的影响,从表观遗传学角度探讨滋养细胞侵袭行为的相关调控机制。方法Matrigel侵袭小室模型观察ADC处理JEG-3细胞24h后细胞侵袭能力的变化。亚硫酸氢盐修饰后测序法检测ADC对JEG-3细胞中H19基因甲基化的影响。结果经100μmol/L ADC作用24h后的JEG-3细胞侵袭能力明显降低,较对照组差异有统计学意义(P<0.01)。经ADC作用后的JEG-3细胞中H19基因甲基化程度降低。结论甲基化酶抑制剂ADC可降低H19基因甲基化程度,并抑制滋养细胞侵袭能力。H19甲基化状态改变可能参与调控滋养细胞侵袭能力。     

Smad3基因siRNA对TGF-β1双向调节成纤维细胞增殖的影响

目的 构建大鼠Smad3基因特异性siRNA沉默质粒,并探讨其在TGF-β1双向调节成纤维细胞增殖中的作用.方法 构建大鼠Smad3基因沉默质粒,荧光纤维镜观察转染效率,定量PCR、免疫组化法检测Smad3基因和蛋白的变化,BrdU ELISA法和EMSA法分别检测转染siRNA及联合大小剂量TGF-β1刺激后细胞增殖和Smad3结合活性变化.结果 沉默质粒转染效率为41.2%,瞬时转染后具有促增殖作用且与转染剂量成正比,并使其mRNA表达下调50%、蛋白表达明显降低,还可降低大小剂量TGF-β1双向调节细胞增殖和Smad3结合活性的变化程度.结论 pSUPERSmad3沉默质粒构建成功,TGF-β1可通过调节Smad3来达到双向调节成纤维细胞增殖作用.     

人rgs4真核表达质粒的构建和鉴定

目的构建人rgs4基因真核表达质粒。方法采用RT-PCR方法,扩增人rgs4基因片段,插入真核表达质粒pcDNA3．1中,转化大肠杆菌DH5a,通过琼脂糖电泳、双酶切挑选和测序验证阳性重组克隆。结果RT—PCR自人胚肾上皮细胞（HEK293）中扩增出目的基因片段,插入目的基因的真核表达载体的酶切谱与设计一致,测序结果证明为人rgs4基因。结论成功构建了人rgs4编码框全长的真核细胞表达质粒。