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1.
目的 探讨微小RNA-34家族(miR-34s)对结直肠癌细胞同源重组修复的作用及调控机制。方法 分别在2种结直肠癌细胞系(HCT116和HT29细胞)和2种非结直肠癌细胞系(HeLa和U2OS细胞)中过表达miR-34c-5p,应用蛋白质印迹法检测polo样激酶1(PLK1)蛋白表达水平。过表达miR-34a-5p、miR-34b-5p和miR-34c-5p以及回转PLK1,应用蛋白质印迹法检测PLK1和第139位丝氨酸磷酸化的组蛋白H2AX(γH2AX)蛋白表达水平,分析miR-34s与PLK1以及DNA损伤的关系。使用DR-GFP/Ⅰ-SceI报告质粒检测miR-34a-5p、miR-34b-5p和miR-34c-5p对同源重组修复效率的影响。qRT-PCR法检测miR-34a-5p、miR-34b-5p和miR-34c-5p对PLK1 mRNA表达水平的影响。生物信息学预测和双荧光素酶报告基因实验验证miR-34a-5p、miR-34b-5p和miR-34c-5p与PLK1 mRNA的结合位点。分别在p53wt和p53-/-HCT11...  相似文献   
2.
长链非编码RNA(lncRNAs)是一类新的功能分子,可通过影响基因转录、蛋白质翻译以及蛋白质稳定性等方式调节下游靶基因,在生长发育、免疫应答、代谢调控以及肿瘤形成等生物学事件中发挥重要作用。已有研究表明lncRNAs可以通过电离辐射诱导表达,并参与细胞对电离辐射的应答反应以及细胞损伤修复过程。通过对电离辐射相关lncRNAs的研究有助于加深对电离辐射损伤应答机制的认识和了解。笔者对lncRNAs的结构功能、调控靶基因方式以及对电离辐射相关lncRNAs的功能和作用方式进行综述。  相似文献   
3.
目的:探讨miR-34s对结直肠癌细胞放射敏感性的影响以及在电离辐射致DNA损伤中的作用。方法:利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative fluorescence PCR,qRT-PCR)检测miR-34a/b/c-5p在结直肠癌细胞中的表达水平,以及电离辐射后miR-34a/b/c-5p表达水平变化趋势。基于克隆形成法和单击多靶模型建立细胞存活曲线,分析miR-34a/b/c-5p对结直肠癌细胞放射敏感性的影响。过表达miR-34a/b/c-5p并进行照射,利用免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点形成情况,进而分析miR-34a/b/c-5p对电离辐射致DNA损伤的作用。结果:miR-34a/b/c-5p在HCT116细胞中的表达水平明显高于HT29细胞(P<0.05)。HCT116细胞经4 Gy照射后24 h内,miR-34a/b/c-5p表达水平呈双峰变化趋势。与miR-NC组相比,过表达miR-34a/b/c-5p可显著增加结直肠癌细胞的放射敏感性,miR-34a/b/c-5p组细胞平均致死剂量(D0)和准阈值剂量(Dq)均明显降低,且辐射增敏比(SER)明显增加。过表达miR-34a/b/c-5p可显著增加电离辐射诱导的DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)水平,照射后1 h和8 h γH2AX焦点数明显高于miR-NC组(P<0.05)。结论:miR-34s为放射响应miRNA分子,过表达miR-34s可增加电离辐射诱导的DNA损伤水平并增强结直肠癌细胞的放射敏感性。  相似文献   
4.
对我国2011—2021年间典型化学事故进行统计,分析事故原因及总结经验教训,探讨化学工业安全生产中的突出问题,提升对化工事故危害的认识,为降低化工行业职业风险和提高安全管理工作水平提供建议。  相似文献   
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