树鼩水动力转染方法的建立及在HBV模型探索中的应用

目的建立一种水动力注射将外源基因导入树鼩肝脏的方法,并用此方法建立HBV树鼩模型。方法用萤火虫荧光素酶（firefly luciferase,Fluc）和β-半乳糖苷酶（β-galactosidase,β-Gal）作为报告基因,通过树鼩大隐静脉将报告基因用水动力注射方法导入树鼩肝脏,活体成像和β-Gal染色观察水动力转染效果。将pHBV1.2质粒用水动力注射方法转入树鼩肝脏,检测树鼩血清中ALT、实时荧光定量检测血清中HBV DNA,ELISA检测血清中HBsAg、HBsAb。结果通过大隐静脉水动力注射,报告基因能够在肝脏特异性表达,转染HBV1.2质粒后树鼩血清中能够检测到相关阳性指标。结论大隐静脉水动力注射法能够作为树鼩肝脏外源基因导入的一种方法,并用此方法初步探索了树鼩的HBV模型。     

活体荧光成像监测HCV NS3/4A蛋白在小鼠体内的瞬时表达

目的建立HCV NS3/4A蛋白酶在小鼠体内可视化表达模型。方法利用水动力转染技术将融合基因NS3/4A-Fluc转染至小鼠肝脏,建立目的基因的瞬时表达模型,通过RT-PCR方法检测目的基因Fluc及NS3/4A的RNA表达水平,以及通过Western blot方法检测目的基因NS3/4A-Fluc的蛋白表达水平。结果建立了通过报告基因Fluc反映HCV NS3/4A蛋白酶的瞬时表达可视化小鼠模型。结论成功建立了可用于评价NS3/4A蛋白酶的可视化小鼠模型。     

血小板促进肝再生的作用机制及其研究进展

肝脏具有强大的再生能力,肝切除术或肝移植术的成功,主要取决于术后肝脏能否恢复正常的生理功能和体积。研究表明,血小板在促进肝再生中发挥着重要作用。然而,其作用机制尚未完全明确。本文就血小板促进肝再生的作用机制及其研究进展作一综述,以期为肝切除或肝移植相关术后肝再生提供新的治疗策略。     

不同尺寸、形貌金纳米粒子小鼠体内急性毒性研究

目的 考察不同尺寸、不同形貌的金纳米粒子的急性毒性.方法 采用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEC)对系列不同尺度、不同形貌的金纳米粒子进行修饰,通过测定zeta电位及表面等离子共振谱对修饰后纳米粒子的电性质及在生理盐水中的稳定性进行考察,最后将4种修饰后的金纳米材料通过腹腔注射入小鼠体内并在24h后进行血常规及急性时相反应蛋白检查.结果 PEG修饰后的金纳米颗粒能够在生理盐水环境中稳定存在.血常规结果表明,50 nm粒径的棒状金纳米粒子会引起白细胞数量的明显下降,50 nm粒径的球形金纳米粒子则引起血小板数量的减少,而粒径为10 nm及90nm的球形金纳米粒子组血常规指标无明显变化.而且,4种纳米粒子均不会引起小鼠体内急性时相反应蛋白的明显升高.结论 对于金纳米粒子来说,产生急性毒性与否似乎与其尺度之间并不存在所谓的线性依赖关系,而50 nm可能是生物体产生急性毒性的敏感尺度.