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选用陕北黑山羊的4-32细胞胚和萨能奶山羊的次级卵母细胞分别作核供体和胞质供体。在显微操作仪的控制下,将分离后的单个卵裂球注入去核次级卵母细胞的卵周隙。采用电融合法诱导卵裂球和去核次级卵母细胞融合。通过体外培养和移植,检查卵核移植的效果。本研究证明:(1)在4-32细胞期,核供体胚的发育阶段对山羊卵核移植胚的体外发育无显著影响;(2)由山羊4-32细胞期胚胎的卵裂球和去核次级母卵细胞构成的卵核移植胚在体内仍可发育为正常个体;(3)用注射LH后25-35小时的次级卵母细胞作胞质供体均可获得较高的卵核移植胚体外发育率;(4)用900伏/厘米的电场强度进行2个80微秒的电脉冲处理,诱导卵裂球和去核次级卵母细胞融合,可获得更好的电融合效果。根据山羊胚胎性RNA在2细胞期出现的事实和本研究的上述结果,作者认为,次级卵母细胞的胞质对移入的晚期卵裂胚细胞核可能有去分化作用。 相似文献
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山羊卵巢卵母细胞的体外受精 总被引:6,自引:0,他引:6
本试验选用10mMHepes缓冲的①TCM199+FCS(10%)+hCG(20微克/毫升);②TCM199+FCS+hCG+E_2 (1微克/毫升)和③Ham′sF_(12)+FCS+hCG+E_2三种培养基,研究了山羊卵巢卵母细胞的体外成熟和体外受精。252枚卵丘细胞层完整而致密的卵母细胞培养24—26小时,其成熟率分别为55.6%(25/45)、79.4%(104/131)和76.3%(58/76)。结果表明,TCM199和Ham′sF_(12)都是山羊卵母细胞体外成熟的合适培养基;雌激素的存在可显著地提高其成熟率;24小时的成熟培养可使山羊卵母细胞的核成熟。用17枚经①和②体外成熟的卵母细胞进行体外受精,受精率为70.6%(12/17)。将12枚受精卵(pbⅡ阶段)移植给5只受体山羊,2只妊娠,妊娠率达到40%(2/5)。其中一只妊娠受体于移植后52天因意外事故死亡,取得一只发育正常 的雄性胎羔,胎长8.5厘米。另一受体已妊娠4个月,预产期为1992年4月7日,属世界首例。 相似文献
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