以双下肢骨痛伴双肾结石为主要表现的库兴综合征1例

患者 ,女 ,3 0岁。因反复双下肢骨痛伴双踝部凹陷性水肿3年 ,于 2 0 0 0年 4月 2 0日入院。 3年前 ,反复出现双下肢、足跟部疼痛 ,尤以站立、行走时明显 ,间歇性加重 ,加重时须持杖行走 ,伴踝部轻度凹陷性水肿和腰痛不适 ,休息后自行缓解。在西安某大医院就诊 ,诊断不明。 3年中反复作了以下检查 :血、尿常规 (-) ,血抗“Ｏ”、类风湿因子 (-) ,ＥＳＲ 2ｍｍ ｈ ,未找见狼疮细胞 ,自身抗体检查 ,ＳＳＡ(-) ,ＳＳＢ(-) ,ＡＮＡ(-) ,Ｒｉｂ(-) ,ｓｓ ＤＮＡ(-) ,ｄｓ ＤＮＡ(-) ,Ｓｃｌ 70 (-) ,血电解质Ｋ+ 4 2ｍｍｏｌ Ｌ ,Ｎａ+ 14 2ｍｍｏ…     

雌二醇对骨髓基质细胞核结合因子α1基因表达的影响

目的: 研究骨髓基质细胞(MSCs)在向成骨细胞(OB)分化的条件培养体系中,17β-雌二醇(E2)对其核结合因子α1(core binding factor α1, Cbf α1)基因表达的影响,探讨E2对OB生成的作用及绝经后高转换骨代谢的可能机制. 方法: 取自3 mo龄雌性SD大鼠MSCs在生长培养基中传代后,用1,25(OH)2D3和地塞米松(DEX)诱导MSCs向OB分化. 应用半定量RT-PCR技术,观察不同浓度E2对MSCs分化过程中Cbf α1 mRNA表达的影响;以α-磷酸奈酚为底物,测定细胞碱性磷酸酶(ALP)的活性;Van Gieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量. 结果: E2能明显抑制MSCs分化过程中Cbf α1 mRNA的表达,从(23.4±1.8)%降至(15.8±1.5)%和(5.8±0.8)%(P<0.05);细胞ALP活性随E2浓度增加而降低,从 (706±37) nkat@g-1(protein)降至(63±5)nkat@g-1(P<0.05). E2降低细胞Ⅰ型胶原的合成,用Van Gieson染色细胞,随着E2浓度的增加,胞质染色由鲜红、淡红到黄色. 结论: E2能明显抑制MSCs分化过程中Cbf α1 mRNA的表达,减少OB的生成.     

雌二醇对大鼠骨髓基质细胞过氧化物酶增殖活化受体γ2基因表达的影响

背景:雌二醇能否改变骨髓基质细胞分化过程中过氧化物酶增殖活化受体γ2-mRNA的表达进而影响其向成骨细胞分化有待研究。目的:观察骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中,17β-雌二醇对其过氧化物酶增殖活化受体γ2mRNA及蛋白表达的影响。设计:对比观察实验。单位:成都军区总医院中心实验室,德阳市人民医院检验科,成都百奥生物技术有限公司。材料:选用1只雌性SD大鼠,3月龄,清洁级,体质量(200±20)g,由成都中医药大学实验动物研究中心提供(动物许可证号码11)。DMEM培养液购自Hyclone,1,25一双羟维生素D3、地塞米松和雌二醇购自Sigma公司,引物用Jellyfish软件设计,由大连宝生物技术有限公司合成。RT-PCR试剂盒和RNA提取试剂盒均由大连宝生物提供。兔抗山羊多抗(北京中山生物技术有限公司),山羊抗鼠PPARγ2抗体和Western Blotting增强化学发光试剂均购自Santa Cruz公司。方法:实验于2001-04/2002-07在成都军区总医院中心实验室和成都百奥生物技术有限公司完成。①无菌条件下分离大鼠骨髓基质细胞,1,25一双羟维生素D3和地塞米松诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化,观察细胞生长情况。②用0,0.1,10和1000nmol/L不同浓度雌二醇对细胞分化过程进行干预3d。培养细胞用Tris-Triton X-100缓冲液加超声粉碎裂解细胞,在Beckman CX-7生化分析仪上测定碱性磷酸酶的活性,观察不同浓度雌二醇条件下细胞产生碱性磷酸酶的情况。③100g/L中性甲醛固定培养于24孔板的骨髓基质细胞,Weigert苏木素染液染色10min,自来水冲洗,5g/L盐酸乙醇分化,Van Gieson染色,体积分数为0.95乙醇分化脱水,二甲苯透明,显微镜下观察并照相,观察细胞胶原合成情况。④应用半定量RT-PCR及Northern blot、Western blot技术,观察不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中PPAR-γ2mRNA及蛋白表达的影响。主要观察指标:①骨髓基质细胞生长情况、细胞胶原合成情况。②不同浓度雌二醇条件下细胞产生碱性磷酸酶的情况。③不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中PPAR-γ2mRNA及蛋白表达的影响。结果:①骨髓基质细胞接种后4h开始贴壁,24～72h可见贴壁细胞明显增大且分裂增殖,细胞呈三角形,多角形或梭形。3d后首次换液,贴壁细胞体积增大,呈集落生长,10d左右融合成遍。多次传代的骨髓基质细胞呈有序的成纤维细胞样分布。②随着雌二醇浓度的增加,胞浆染色越淡,由鲜红、淡红到黄色。胞浆呈红色说明有胶原合成,红色越深,表明胶原越多。③不同浓度雌二醇条件下细胞均能产生碱性磷酸酶,其活性随雌二醇浓度增加而降低,雌二醇浓度从0nmol/L增加到1000nmol/L时,碱性磷酸酶从(710.1±41.7)nkat/g降至(60.0±11.7)nkat/g(t=29.0,P<0.01)。④雌二醇浓度为0.1,10和1000nmol/L时,PPAR-γ2mRNA的表达量均明显高于雌二醇0mol/L组(t=6.1,7.2,11.5,P<0.01),Northern blot结果显示雌二醇浓度为0.1,10和1000nmol/L时PPAR-γ2mRNA表达量分别为(4.0±0.4)%,(1.7±0.2)%,(2.8±0.2)%,明显高于雌二醇0mol/L组[(1.5±0.1)%,t=5.4,105.0,14.2,P<0.01]。⑤Western Blot检测结果显示雌二醇能明显增加骨髓基质细胞PPAR-γ2蛋白的表达。雌二醇浓度为0.1,10和1000nmol/L时,PPAR-γ2蛋白的表达量分别为(2.2±0.2)%,(2.6±0.2)%,(4.1±0.2)%,明显高于雌二醇0mol/L组[(1.2±0.10)%,t=6.6,8.5,13.2,P<0.01]。结论:雌二醇能明显抑制体外培养的骨髓基质细胞碱性磷酸酶的表达,同时促进骨髓基质细胞内过氧化物酶增殖活化受体γ2mRNA和蛋白的表达。     

成都地区291名绝经后女性骨密度与维生素D水平

目的了解成都地区部分绝经后妇女维生素D水平,观察血清25(OH)D3与骨密度、年龄、绝经年龄、体重指数的关系。方法用整群随机抽样方法抽取成都地区291名绝经后女性,平均年龄(63.9±9.7)岁,按每10岁为1个年龄组分组。记录身高、体重、绝经年龄等基本信息,使用双能X线吸收骨密度仪(DXA)测量腰椎2-4椎体(L2-4)、左髋关节股骨颈和全髋骨密度(BMD),用酶联免疫法测定血清25(OH)D3水平。分析绝经后女性骨量及血清25(OH)D3分布情况。结果超过半数的受试者(52.2%)患骨质疏松症,发病率随年龄增加而增高,80岁老年女性发病率达76.47%。血清25(OH)D3水平平均为18.37 ng/mL,维生素D缺乏发生率为68.38%。血清25(OH)D3水平与骨密度、年龄、绝经年龄无关,与BMI呈负相关(P=0.000)。结论成都地区部分绝经后妇女普遍存在维生素D缺乏,绝经后妇女应及时补充维生素D。     

唑来膦酸治疗绝经后骨质疏松患者2年结果分析

目的 分析唑来膦酸（商品名：密固达）治疗绝经后骨质疏松患者2年后的疗效和不良反应.方法 统计我院2009~2012年中连续使用密固达治疗2年的绝经后骨质疏松患者47例的临床资料,分析治疗前后患者骨密度变化情况及不良反应发生率.结果 首次使用密固达患者中,出现发热3例（6.4%）,肌痛3例（6.4%）,发热合并肌痛9例（19.1%）.其中1例出现高热（最高体温40.5 ℃）;1例出现双侧大腿内侧出血点,1 w后消退;其余不良反应少见.第二次输注后出现发热5例（10.6%）,但无高热发生.左侧股骨颈骨密度、左侧全髋骨密度、L2~4椎体骨密度,治疗后与治疗前以及治疗第2年与第1年比较均明显升高（P＜0.05）.结论 密固达治疗绝经后骨质疏松对骨密度提升效果明显,且总体安全性好,主要不良反应为发热和肌痛.     

氟与羟乙膦酸钠联合用药对去卵巢大鼠骨计量学和生物力学性质的影响

目的评价抗骨吸收药物与促进骨形成药物联合应用对去卵巢大鼠骨质疏松的潜在治疗作用。方法观察单独用羟乙膦酸钠（１ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）和氟钙剂（０４５ｎｇＦ－＋１３５６ｍｇＣａ２＋）·ｋｇ－１·ｄ－１与两者联合用药对去卵巢大鼠胫骨近端次级松质骨骨计量学指标和股骨中段骨生物力学性质的影响。结果与去卵巢不处理组比较，去卵巢氟钙剂处理组、去卵巢羟乙膦酸钠处理组及两者联合用药组小梁骨面积百分比分别高出４２％、１０９％、１１０％；小梁骨的数量分别多２４％、９４％、９０％；小梁骨分离度分别低３５％、１４８％、１３８％；吸收侵蚀表面分别少４５％、５０％、６３％；刺激频率在后两组分别低６１％、５７％。与假手术组比较，上述三种处理使矿化延迟时间分别延长１６％、４２％、２９％；联合用药组股骨干力学强度明显增加。上述诸参数的改变差异均有显著性（Ｐ＜００５）。结论羟乙膦酸钠能显著抑制骨吸收，降低骨转换，其保护小梁骨显微结构作用优于单用氟钙剂处理，与氟钙剂合用明显增加股骨的力学强度。但三种处理均有潜在的抑制矿化作用     

低氧对小鼠成骨细胞OPG及RANKL基因表达的影响

目的:观察低氧对体外培养的小鼠成骨细胞护骨素(osteoprotegerin,OPG)及NF-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)基因表达的影响。方法:取出生24h内的新生小鼠40只,在无菌条件下取其颅盖骨,去除纤维组织,用胰蛋白酶-胶原酶消化法进行成骨细胞的原代培养。取第3~5代细胞分为常氧组和低氧组(3%O2),分别缺氧6、12、24、48和72h后,从培养液贴壁细胞中抽提总RNA,应用RT-PCR检测各组OPG和RANKL的基因表达变化。结果:低氧组各时间点OPG基因表达均较常氧组显著减弱,且随时间延长而减弱;而RANKL基因表达均较常氧组显著增强,以24h时最为明显。结论:低氧可以抑制小鼠成骨细胞OPG基因表达,同时刺激RANKL基因的表达。     

PPAR-γ_2基因Pro12Ala多态性与2型糖尿病患者动脉粥样硬化的关系

目的探讨过氧化物酶体增殖体激活受体-γ基因外显子2（PPAR-γ2）的Pro12Ala多态性与2型糖尿病患者动脉粥样硬化的关系。方法运用多聚酶链式反应-限制性片段长度基因多态性分析方法（PCR-RFLP法）,对56例伴动脉粥样硬化（动脉粥样硬化组）和120例无动脉粥样硬化（非动脉粥样硬化组）的2型糖尿病患者PPAR-γ2基因的Pro12Ala多态性位点进行基因分型。结果动脉粥样硬化组AA基因型频率显著高于非动脉粥样硬化组（7.14%vs.0.83%,P〈0.05）,Ala等位基因频率也显著高于非动脉粥样硬化组（40.18%vs.27.92%,P〈0.05）。结论 PPAR-γ2的Pro12Ala变异与糖尿病患者发生动脉粥样硬化有关。     

体重指数对男性糖尿病患者身体成份与骨密度关系的影响

目的探讨Ⅱ型糖尿病（DM）患者身体成分与骨密度（BMD）的关系。方法采用双能X线骨密度（BMD）检测仪对125例Ⅱ型DM患者进行腰椎（L1～L4）正位、左髋和全身BMD检测及身体成分检测,按体重指数（BMI）将DM患者分为非肥胖（BMI〈25 kg/m2）组（DMNO组）和肥胖（BMI≥25 kg/m2）组（DMO组）,分析各组身体成分与BMD的相关性。结果①DMO组所测部位BMD和身体成分质量及脂肪量百分比均显著高于DMNO组,但其所测部位肌肉量百分比显著低于DMNO组。②在DMNO组,左大腿肌肉质量分别与左髋各部（Wards三角除外）BMD,L1、L2、L3BMD等呈显著正相关。全身肌肉质量分别与股骨颈、股骨干、股骨全部、L2 BMD等呈显著正相关。躯干肌肉质量分别与大粗隆和L2 BMD等呈显著正相关。仅全身和躯干脂肪质量均分别与L1 BMD呈显著正相关。③在DMO组,左大腿肌肉质量分别与股骨颈、股骨干和股骨全部BMD等呈显著正相关;而与腰椎BMD无显著正相关。全身脂肪质量分别与L3BMD和L4BMD呈显著正相关,躯干脂肪质量仅与L4BMD呈显著正相关。余无显著相关关系。结论在男性2型DM患者,无论肥胖与否,肌肉质量主要与髋部BMD有明显相关性,脂肪质量只与腰椎BMD明显相关。