免疫系统人源化的非小细胞肺癌异种移植小鼠模型临床前研究应用

肺癌是世界上发病率和死亡率最高的癌症之一,而非小细胞肺癌则是肺癌中恶性程度和占比相对较高的亚型。近年来,非小细胞肺癌的免疫治疗成为热点方向,涌现出大量的免疫单药及联合治疗方案,这些方案的开展亟需临床前验证。因此,提供可靠的临床前实验动物模型以评估治疗效果、探索最佳用药方案以及推动个体化医疗是目前急需解决的问题。基于免疫系统人源化的异种移植小鼠模型由于同时具有人体免疫系统和肿瘤细胞,能够高度模拟人体内肿瘤免疫微环境,在肿瘤免疫治疗研究中具有广阔的应用前景。本文主要从人源化模型在非小细胞肺癌治疗的应用方面进行综述,为各种非小细胞肺癌免疫治疗方案的临床前实验提供指导,以期推进这些方案的临床试验。     

结肠癌中ALOX12表达与临床病理特征及预后的关系分析

目的：探讨花生四烯酸 12-脂氧合酶（arachidonate 12-lipoxygenase,ALOX12）在结肠癌患者癌组织中的表达及意义。方法：回顾性收集257例结肠癌患者肿瘤及瘤旁组织,免疫组化法检测ALOX12的表达,比较肿瘤及瘤旁组织内表达差异并分析其表达与患者临床病理特征的相关性。随访并探讨 ALOX12 表达与患者 5 年总生存率的关系,并采用 Kaplan-Meier 法绘制生存曲线。运用单因素及多因素Cox 回归综合分析影响结肠癌患者5年总生存率的因素。结果：与瘤旁组织相比, ALOX12在肿瘤中阳性表达率更高（63.8% vs. 33.1%）,差异具有统计学意义（P < 0.001）。ALOX12 表达与患者年龄、性别、肿瘤部位均无明显相关性（P > 0.05）,而与TNM分期、淋巴结转移有显著相关性（P < 0.05）。ALOX12高表达患者的5年总生存率明显低于低表达患者（P < 0.001）。此外,单因素和多因素Cox回归分析结果显示年龄、TNM分期、淋巴结转移、ALOX12表达是影响患者5年总生存率的独立影响因素（P < 0.05）。结论：ALOX12高表达与结肠癌TNM分期、淋巴结转移相关,可作为预测患者病情及预后的潜在指标。     

睾丸组织中ACRBP的表达及启动子CpG位点的甲基化分析

目的了解人睾丸组织中ACRBP的表达及其启动子CpG位点的甲基化状态,为探讨该基因表达机制奠定基础。方法运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位;结合生物信息学分析该基因启动子CpG位点序列;通过Bisulfite PCR测序法（BSP）分析目的基因CpG位点的甲基化状态。结果免疫组化显示精子与精子细胞及部分的精原细胞和精母细胞表达目的蛋白。对ACRBP启动子序列（转录起始点-127～＋110 bp）进行BSP扩增测序,发现该区域共有24个CpG位点,其中仅有3个出现甲基化,其甲基化频率为1.67%。结论生精小管中ACRBP蛋白呈区域性的阳性反应,可能与生精小管内精子发生的不同步性有关;ACRBP启动子CpG位点低甲基化可能与该基因表达的机制有关。     

姜黄素抗结直肠癌的线粒体生物学作用机制研究

摘 要：［目的］ 基于分子对接技术和体外细胞实验探讨姜黄素抗结直肠癌的线粒体作用机制。［方法］ SwissTargetPrediction、HERB、DisGeNET、GeneCards 数据库挖掘姜黄素抗结直肠癌的交集靶点后,利用cytoscapehubba_MCC、MCN方法筛选核心靶点;使用STRING、AutoDock分别构建靶点蛋白互作网络和姜黄素-核心靶点对接;体外培养细胞模型验证姜黄素线粒体功能核心靶点生物学作用。［结果］ 网络药理学预测共得到49个姜黄素抗结直肠癌的交集靶点,cytohubba计算互作关系获得9个核心靶点,为MMP2、IL-17A、HIF-1α、TNF、CYP19A1、 CD44、BCL-2L11、RICTOR和BECN1,其中2/3的靶点是线粒体功能关联靶蛋白。分子对接结果显示姜黄素与线粒通路蛋白结合稳定。体外细胞模型验证结果表明姜黄素以剂量依赖方式抑制SW480和HCT116细胞增殖。q-PCR实验证明姜黄素导致SW480细胞SIRT1、Hsp60基因表达升高（P＜0.05）,SIRT3、COX1、ND1、OPA1、MFN2、POLG、MTH1基因表达降低（P＜0.05）。Western blot 结果显示姜黄素可明显抑制VDAC、COXIV蛋白的表达（P<0.01）,升高ATG7蛋白表达（P<0.01）。［结论］ 姜黄素可多靶点介导线粒体功能障碍,促进结直肠癌细胞凋亡。     

恶性脑胶质瘤术后螺旋断层放射治疗联合替莫唑胺的疗效评价

目的：探究和分析恶性脑胶质瘤术后螺旋断层放射治疗联合替莫唑胺的治疗效果。方法：研究对象为60例恶性脑胶质瘤术后的患者,将患者随机分为对照组和治疗组,每组30例患者,对照组为单纯放疗组,治疗组为放疗联合替莫唑胺组。通过实验后对两组患者的总治疗有效率进行分析比较。结果：对照组30例患者的总治疗有效率为60.0％,相比较治疗组患者的总治疗有效率为90.0％,差异较为的明显,具有一定的统计学意义（P ＜0.05）。对于生存率的比较结果而言,治疗组的最近1、2年生存率为80.0％和50.0％,要明显的优于对照组患者,差异较为的明显（P ＜0.05）。结论：对于恶性脑胶质瘤术后的患者采用放疗联合替莫唑胺的联合治疗手段不仅能够有效的提高有效率,同时能够有效的提高患者的生存率,有较大的临床价值,建议临床上进行广泛的使用。     

体外诱导胰腺干细胞向胰岛样细胞团的分化***☆

背景：目前由于胰岛来源匮乏,使得胰岛细胞移植治疗糖尿病无法满足临床需求,故体外将胰腺干细胞诱导分化为胰岛成为研究焦点。 目的：于体外将小鼠胰腺干细胞诱导成胰岛样细胞团并对其进行相关检测,探寻一种胰腺干细胞体外诱导分化成胰岛及鉴定的技术和方法。 方法：体外获得纯化的小鼠胰腺干细胞,采用联合诱导剂对其进行成胰岛方向的诱导分化,并对诱导形成的胰岛样细胞团进行形态学观察、双硫腙染色、RT-PCR和Western blot检测。 结果与结论：实验通过细胞形态学和细胞生长特性的观察以及免疫细胞化学染色证实体外成功获得了小鼠胰腺干细胞,采用联合诱导剂将其诱导成胰岛样结构,呈球形,以较细长的蒂部与瓶底连接,双硫腙染色将其染成铁红色。RT-PCR和Western blot 法可分别检测到胰岛样细胞团的胰岛素mRNA和胰岛素蛋白。结果证实小鼠胰腺干细胞可体外诱导分化成含β细胞的胰岛样细胞团。 关键词：胰腺干细胞;诱导;胰岛样细胞团;干细胞培养;小鼠 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.020     

OY-TES-1诱导的树突状细胞对T淋巴细胞的增殖活化作用

目的通过癌-睾丸抗原OY-TES-1致敏树突状细胞(DC),研究其对T淋巴细胞的增殖活化作用。方法体外诱导培养人外周血DC,观察其细胞形态并经流式细胞仪进行表型鉴定;分别用OY-TES-1融合蛋白(OY-MBP)、麦芽糖结合蛋白(MBP)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)致敏DC,与T淋巴细胞共同培养。CCK-8法检测不同蛋白致敏DC后T淋巴细胞的增殖,ELISA检测致敏DC与T淋巴细胞共同培养后上清液IFN-γ的含量。结果诱导出高表达HLA-DR、CD86、CD83和CD80并具有典型细胞特征的DC。经不同蛋白致敏的DC均能促进T淋巴细胞的增殖活化,其中OY-MBP致敏的DC促进T淋巴细胞增殖的能力明显强于其他各组(P<0.05),IFN-γ分泌量也明显高于其他各组(P<0.05)。结论 DC在体外经OY-TES-1融合蛋白致敏后,可显著促进T淋巴细胞的增殖活化。