Rho相关激酶抑制剂Y27632对小鼠腔前卵泡体外发育的作用

目的 探讨Rho相关激酶（ROCK）抑制剂Y27632在小鼠腔前卵泡体外发育中的作用。 方法 取出生12.5 d的小鼠卵巢,机械法收集单枚腔前卵泡,采用超低吸附96孔板模拟3D环境对其进行培养。设置对照组和含有Y27632的实验组,通过形态学观察、卵泡直径的变化、成熟卵泡的数量、成熟卵母细胞纺锤体的变化等来评估卵泡的整体发育情况。采用Real-time PCR技术检测颗粒细胞中卵泡刺激素受体（FSHR）、卵母细胞中骨形态发生蛋白15（BMP15）、生长分化因子9（GDF9）等以及凋亡相关基因（Bad、Bax和Caspase-3）的表达情况,同时,用细胞存活染料检测卵泡发育过程中颗粒细胞的凋亡情况。 结果 ROCK抑制剂Y27632对卵泡直径增长和基本发育指标（存活数、成腔率和成熟率）无明显影响（P>0.05）,但对照组卵母细胞成熟后纺锤体组装出现异常。培养8 d后,与对照组相比,实验组颗粒细胞特异性基因FSHR上调;卵母细胞特异性基因BMP15和GDF9上调,而叉头框O3（FoxO3)下调;凋亡基因Bax、Bad和Caspase3表达下调,实验组卵泡内的颗粒细胞凋亡明显少于对照组。 结论 小鼠卵泡体外发育过程中,ROCK抑制剂Y27632能够抑制颗粒细胞的凋亡,防止卵母细胞纺锤体组装异常,进而提高卵泡体外发育质量。     

真菌性角膜溃疡32例治疗体会

真菌性角膜溃疡是一种严重的致盲性眼病,近10年来,发病率呈逐年上升趋势。其发病机制尚不清楚,临床诊断也缺乏有效手段。2003年1月～2006年4月,我们共收治真菌性角膜溃疡32例,疗效满意。现分析报告如下。     

三唑类药物联合手术治疗真菌性角膜溃疡的疗效观察

目的:探讨药物联合结膜瓣遮盖术治疗真菌性角膜溃疡的临床应用效果.方法:对患真菌性角膜溃疡的32例患者联合应用三唑类药物治疗,部分严重患者在药物效果不明显的情况下联合结膜瓣遮盖术.观察患眼的溃疡面、前房积脓、视力的变化,以研究疗效.结果:32例患者中19例(59.4%)单用药物治疗溃疡愈合,另有13例接受了结膜瓣遮盖术.28例患者溃疡愈合无复发,视力不同程度提高,2例患者复发,2例患者溃疡穿孔.结论:联合应用三唑类药物及结膜瓣遮盖术是一种较为安全有效的方法,可明显提高治愈率,改善患者的视力.     

真菌性鼻窦炎的影像学诊断分析

本文收集1996-2003年收治的11例经手术及病理证实的真菌性鼻窦炎病例，对11例真菌性鼻窦炎的影像学资料进行总结分析，现报道如下。 1资料与方法 收集308例鼻窦手术病例中经手术及病理证实为真菌感染的11例患者的影像学资料，11例中男7例，女4例；年龄33-64岁，平均49岁。[第一段]     

三唑类药物联合结膜瓣移盖术治疗真菌性角膜溃疡的疗效观察

2003年4月至2006年4月间我院收治的32例真菌性角膜溃疡患者,现报告如下。     

DDR2血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠的复制、鉴定及表型分析*

目的 应用Cre/LoxP系统复制盘状结构域受体2（DDR2）在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2i?EC（DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2）,并分析其在肝脏中的表型。方法 复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞（ES细胞）打靶,通过聚合酶链反应（PCR）+脱氧核糖核酸（DNA）印迹法鉴定筛选阳性ES细胞,将阳性的ES细胞注射到C57BL/6N小鼠囊胚,移植入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠。将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠回交得到F0杂合子,F0代杂合小鼠自交筛选获得F1代DDR2flox/flox小鼠,该小鼠与Cdh5-Cre/ERT2小鼠杂交,通过子代自交获得DDR2在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除（DDR2flox/flox, Cdh5-Cre/ERT2）小鼠。他莫昔芬诱导血管内皮细胞上DDR2基因敲除,对小鼠进行表型分析。结果 获得DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠DDR2i?EC（DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2）,DDR2i?EC小鼠出生时符合孟德尔遗传定律,发育良好,他莫昔芬诱导敲除小鼠血管内皮细胞DDR2基因表达后,小鼠出现自发性肝纤维化及黄体血管新生障碍等表型。结论 成功复制DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型。血管内皮细胞DDR2缺失能导致自发性肝纤维化。