献血员中巨细胞病毒感染的PCR检测

采用快速、敏感和特异性的聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１０８名献血员进行了人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）检测。结果表明，有８４例表现为ＨＣＭＶ阳性，占被检测对象的７７．８％。说明人群中ＨＣＭＶ的感染率是较高的。同时，从本文的ＨＣＭＶ的ＰＣＲ敏感性和待异性试验表明，ＰＣＲ技术可以检测样品中少到２０个拷贝的ＨＣＭＶ模板ＤＮＡ。因此，ＰＣＲ技术是可以替代或弥补目前繁琐的细胞培养技术及血清学方法而用于临床检测的。     

用套式PCR检测新生儿先天性巨细胞病毒感染

选取HCMV AD169棘EcoRI J片段区的IEA基因第四外显子为扩增靶序列，合成两对引物，外引物扩增242bp片段，内引物扩增146bp的片段，此方法很灵敏，可检测5-10fg HCMV DNA．我们随机采集51名新生儿脐带血，应用NaI法提取垒血DNA为模板进行扩增，结果表明；32名为HCMV DNA阳性，以口腔粘液DNA(40名)为模扳进行扩增，24名为HCMV DNA阳性。因此，套式PCR可用于临床上快速准确地检测HCMV。     

磷脂酰肌醇—3激酶研究概况

磷脂酰肌醇－３激酶（ＰＩ３Ｋｓ）磷酸化Ｄ３－磷脂酰肌醇及其衍生物。ＰＩ３Ｋｓ受生长因子或分化因子刺激，即刻活化，表明ＰＩ３Ｋｓ的分类、结构域和生物学功能。     

PCR检测婴儿肝炎综合征中巨细胞病毒感染

采用PCR技术对37例肝炎综合征患者进行了检测。结果表明,24例为HCMV阳性,占被检人数的64.9%,与已报导的资料相比,PCR方法的阳性检出率明显高于目前使用的其它方法.此外,灵敏性和特异性试验表明,HCMV—PCR方法足以能检测出0.1pg的HCMV的DNA,无非特异性带出现,因此,PCR技术具有高度敏感、特异性强、简单快速等优点,可以用于临床检测和诊断。     

磷脂酰肌醇-3激酶研究概况

磷脂酰肌醇 - 3激酶 (PI3Ks)磷酸化 D3-磷脂酰肌醇及其衍生物。 PI3Ks受生长因子或分化因子刺激 ,即刻活化 ,表明 PI3Ks参与刺激信号传导。本文综述了 PI3Ks的分类、结构域和生物学功能     

用套式PCR检测新生儿先天性巨细胞病毒感染

选取ＨＣＭＶＡＤ１６９株ＥｃｏＲＩＪ片段区的ＩＥＡ基因第四外显子为扩增靶序列，合成两对引物，外引物扩增２４２ｂｐ片段，内引物扩增１４６ｂｐ的片段，此方法很灵敏，可检测５－１０ｆｇＨＣＭｖＤＮＡ。我们随机采集５１名新生儿脐带血，应用ＮａＩ法提取全血ＤＮＡ为模板进行扩增，结果表明：３２名为ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，以口腔粘液ＤＮＡ（４０名）为模板进行扩增，２４名为ＨＣＭＶＤＮＡ阳性。因此，套式ＰＣＲ可用于临床上快速准确地检测ＨＣＭＶ。     

新型融合蛋白hIFNα1-CB表达载体的构建

目的：构建人干扰素α1（hIFNα1)和抗菌肽B（CB)融合蛋白表达质粒。方法：将人工改造后的hIFNα1基因与CB基因按正确的阅读框架融合，并定向克隆至大肠杆菌表达载体pBV220。结果：经PCR检测及质粒的限制性分析，所挑选的Amp抗性菌落均含有插入了hIFNα1-CB融合基因的重组质粒pHC。结论：以pBV220为载体，成功构建了hIFNα1-CB融合蛋白表达质粒pHC。     

经导管动脉输送转铁蛋白增强p53基因转染效率的研究

目的 研究转铁蛋白(Tf)对p53基因转染效率的影响,并探讨介入技术与Tf联合应用对基因治疗肝癌的双重靶向作用.方法 应用pCMV-myc-p53质粒与阳离子脂质体LipofectAMINE复合物,转染3种肝癌细胞株LM6、Hep3B、YY以及正常肝细胞株L02,以不同浓度Tf(0、10、25、50及100 μg)介导转染,蛋白印迹法检测各细胞株中p53表达情况,并对Tf影响p53转染效率的关系进行分析.再建立兔VX2肝癌动物模型,经介入导管输注Tf-质粒-脂质体复合物,提取肿瘤组织蛋白,蛋白印迹法检测P53表达.结果 4种细胞应用p53-脂质体复合物以及不同浓度Tf转染后48 h的蛋白印迹法检测,发现Tf在10～100 μg可明显增强p53-脂质体的转染效率,且转染效率随Tf浓度增加而增强.动物模型组织提取蛋白检测结果,显示Tf明显增强P53蛋白表达.结论 Tf能增强脂质体-基因转染,介入技术与Tf联合双重靶向对肝癌的基因治疗具有相当的应用前景.     

Investigation of SRY Gene in Sex Reversed Syndrome Patients

SRY (sex-determining region Y chromosome) is considered as a strong candidate for the TDF (testis determining factor) and has been cloned following another candidate ZFY (zinc finger protein gone). In this study,eight cases of sex reversal, including four 46, XX males and four 46, XY females were examined for the presence of SRY sequence and a Y-repeated DNA locus. Our data indicated that the genomie DNA of the four classical 46,XX males had the SRY sequences. On the other hand, both SRY sequences and Y-repeated DNA sequences were present in aii four 46, XY females.These results suggest that SRY sequences were responsible for the sex reversal of 46, XX males whereas there may be other genetic mechanisms for the sex reversal of 46, XY females without the lack of SRY sequences.     

性反转综合征病人中SRY基因的PCR筛查

SRY基因是继ZFY基因之后新近克隆的TDF的最佳候选基因。本文采用SRY/Y—重复DNA双重PCR对8例性反转综合征患者进行了 SRY基因的筛查。结果表明,在4例典型的46,XX男性患者的基因组中均存在有 SRY基因序列,但无Y重复DNA存在。表明 SRY基因所在的Y-DNA序列与46,XX男性综合征的发生相关。在4例46,XY女性中,其SRY基因均未发生缺失,说明其性反转的发生不是因SRY基因的缺失所致,而可能存在有其它的遗传机制导致其性反转的发生,如SRY基因的突变等。