881例疑似耐多药肺结核患者的耐药性分析

分析北京市结核病防治机构(简称“结防机构”)和结核病定点医院疑似耐多药肺结核患者的耐药状况,为耐多药肺结核的临床诊断、治疗和防控工作提供参考。     

人羧基肽酶H不同区段抗原的克隆表达及其初步应用

目的 构建人羧基肽酶H不同区段抗原的原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,初步验证人羧基肽酶H不同抗原区段在羧基肽酶H自身抗体检测中的应用价值。方法 应用RT-PCR方法调取目的基因,构建相应的原核表达质粒,转化大肠埃希氏菌诱导表达重组蛋白,用重组蛋白作为包被抗原建立人羧基肽酶H自身抗体的间接ELISA方法,评价羧基肽酶H抗原在检测新诊断2型糖尿病患者抗羧基肽酶H自身抗体中的应用价值。结果 获得了羧基肽酶H三种不同区段抗原,其中42～476氨基酸区段为较理想的抗原。以该全长抗原作为包被抗原检测95例新诊断2型糖尿病患者,羧基肽酶H自身抗体阳性率为8.42%。结论 原核克隆表达的人羧基肽酶H 42～476氨基酸区段抗原具有良好的抗原性,可作为成人隐匿性自身免疫性糖尿病鉴别诊断的候选抗原。     

2009和2019年北京市非结核分枝杆菌流行特征比较

目的 分析北京市非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)分离率及菌种分布情况,为科学制订北京地区分枝杆菌病的预防和控制策略提供理论依据.方法 采用回顾性调查方法,采用微阵列基因芯片法对本实验室2009和2019年度经对硝基苯甲酸(PNB)鉴别培养基鉴定为非结核分枝杆菌的菌株进行菌...     

初治病原学阳性肺结核患者细菌学与免疫学指标动态变化分析

目的 分析初治病原学阳性且利福平敏感肺结核患者不同阶段T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核抗体与痰涂片+培养检测动态变化及临床意义。方法 收集2020年8月至2021年5月北京结核病控制研究所门诊收治的肺结核患者34例，分别于治疗前、治疗2月和6月行以上方法检测。结果 34例患者，疗前痰涂片+培养、T-SPOT.TB、结核抗体阳性检出率分别为85.29%、100%、76.47%;治疗2月阴转率分别为89.66%、5.88%、11.54%;治疗6月阴转率分别为100%、23.53%、26.92%。治疗前、治疗2月和6月之间T-SPOT.TB试验结核特异性抗原与植物血凝素(TBAg/PHA)比值差异均有统计学意义(P值均<0.05),治疗前与治疗2月或6月痰涂片+培养差异有统计学意义(P值均<0.05),结核抗体差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论 在有效抗结核治疗6月后，肺结核患者的T-SPOT.TB试验TBAg/PHA比值显著降低；结核抗体不能很好地反映疗效情况；痰涂片+培养亦能够很好地反映疗效。     

荧光PCR探针熔解曲线技术检测痰标本结核分枝杆菌利福平耐药性的研究

目的:评价荧光PCR探针熔解曲线(fluorescent polymerase chain reaction probe melting curve, MeltPro)技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌耐药性的临床应用价值。方法:收集2021年5月至2022年5月北京市疾病预防控制中心结核病门诊收治的GeneXpert MTB/RIF检测阳性的初治肺结核患者的痰标本,对每份标本同时进行涂片镜检、分枝杆菌分离培养、MeltPro技术利福平耐药性检测。分析痰标本荷菌量对MeltPro技术耐药性检测结果的影响;培养阳性菌株行利福平比例法药物敏感性试验(简称“药敏试验”),比较比例法药敏试验、GeneXpert MTB/RIF和MeltPro技术检测利福平耐药率的差异;并以培养阳性菌株利福平比例法药敏试验结果为参考标准,评价MeltPro技术耐药性检测的效能。结果:研究共收集结核分枝杆菌阳性合格痰标本158份(例),经分枝杆菌分离培养获得阳性菌株130株。MeltPro技术检测痰标本结核分枝杆菌利福平耐药的成功率为79.1%(125/158),且随着痰涂片结果等级的升高,检测成功率由“阴性...     

新诊断2型糖尿病患者GADA和ZnT8A自身抗体检测意义研究

目的 分析新诊断2型糖尿病患者中谷氨酸脱羧酶自身抗体(GADA)和锌转运子8自身抗体(ZnT8A)阳性情况。方法 通过ELISA法检测2014年5月～10月收集的101例新诊断2型糖尿病患者血清样本GADA和ZnT8A水平。结果 GADA阳性率为21.78%,ZnT8A阳性率为17.82%,两种自身抗体共同阳性率为8.91%,且GADA和ZnT8A阳性与否与患者的性别(t=-0.724,-0.550; 0.903,1.359,P值均＞0.05)、年龄(r=-0.185,-0.158; 0.367,0.084,P值均＞0.05)、血糖(r=0.290,0.110; -0.264,-0.047,P值均＞0.05)、胆固醇(r=-0.047,0.004; 0.154,-0.138,P值均＞0.05)、三酰甘油(r=-0.092,-0.054; -0.217,-0.023,P值均＞0.05),以及低密度脂蛋白(r=-0.045,-0.027; 0.202,-0.025,P值均＞0.05)水平不存在明显相关性。结论 为了早期诊断成人迟发型自身免疫性糖尿病患者,应该对新诊断的2型糖尿病患者及时进行自身抗体的筛查。     

结核分枝杆菌ESAT-6＋CFP-10融合抗原克隆表达及其生物学活性

目的：克隆表达结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）融合抗原ESAT-6＋CFP-10（EC）,评价融合抗原EC刺激THP-1细胞培养上清中特定细胞因子分泌水平的变化。方法构建融合抗原EC原核表达载体,用纯化后的不同浓度融合抗原EC （10,20μg／ml ）刺激THP-1细胞,分别收集刺激12和24 h细胞培养上清,采用Bio-PlexProTM Assays细胞因子测定试剂盒检测细胞培养上清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、GM-CSF、TNF-α和IFN-γ的分泌水平。结果成功克隆表达此菌EC融合抗原;经过融合抗原EC刺激THP-1细胞培养上清中IL-6、IL-8和TNF-α的分泌水平明显升高,差异具有统计学意义（ P＜0．05）,其余细胞因子的分泌水平在刺激前后没有显著变化。结论克隆表达的融合抗原EC具有生物学活性,能使THP-1细胞分泌的IL-6、IL-8及TNF-α水平升高。     

北京市肺结核病人耐药筛查实施效果的研究

目的 分析北京市利福平耐药结核病(RR-TB)诊断流程实施效果,为进一步完善耐药结核病的快速筛查和治疗提供依据。方法 选取2019年1月至2019年12月在北京市结核病防治机构及定点医院就诊的表型药物敏感性试验为利福平耐药的86例肺结核患者,评价其诊疗过程中北京市耐药筛查工作的开展情况,并分析其临床分离株对利福平(RFP)、异烟肼(INH)、左氧氟沙星(LFX)的表型药敏试验的耐药情况。结果 2019年86例RR-TB中Xpert检出62例利福平耐药,Hain检测补充检出3例,另外3例阳性培养物直接进行了表型药敏试验,通过耐药筛查工作RR-TB患者的发现率为79.07%(68/86),漏诊率为20.93%(18/86)。其中,8例Xpert为利福平敏感而表型药敏为利福平耐药,漏筛率为11.63%(10/86)。RR-TB中准广泛耐药率为23.26%(20/86),初复治在3种不同耐药类型中差异无统计学意义。结论 北京市耐药筛查工作在RR-TB诊断中具有快速高效的特点,存在一定的分子耐药与表型不一致现象,且实施中工作落实有待提高,需进一步加强督促管理。pre-XDR-TB处于较高水平,应...     

免疫学检测联合痰涂片和痰培养检测在活动性肺结核临床诊断中的价值

目的 分析结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核抗体、痰涂片与痰培养联合检测在活动性肺结核诊断中的临床意义。方法 收集2014年1月至2019年12月北京结核病控制研究所门诊收治的疑似活动性肺结核患者715例,最终诊断为活动性肺结核患者412例(肺结核组),非结核病患者303例(非结核组)。715例患者均行T-SPOT.TB检测、结核抗体检测及痰涂片、痰培养检查;以临床诊断结果为标准,分析4种方法单独及联合检测的临床意义。结果 肺结核组患者中,T-SPOT.TB阳性检出率为83.7%(345/412);非结核组患者中,T-SPOT.TB阳性检出率为20.8%(63/303);两组阳性检出率差异有统计学意义(χ²=2.823,P=0.000)。T-SPOT.TB对活动性肺结核检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为83.7%(345/412)、79.2%(240/303)、84.6%(345/408)、78.2%(240/307)、81.8%[(345+240)/715];4种方法联合诊断的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为93.7%(386/412)、50.8%(154/303)、72.1%(386/535)、85.6%(154/180)、75.5%[(386+154)/715]。T-SPOT.TB检测、结核抗体检测及痰涂片、痰培养检查的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.815、0.575、0.593、0.715,四项联合检测的AUC为0.894。结论 T-SPOT.TB检测的敏感度、阴性预测值较好,T-SPOT.TB检测联合结核抗体、痰涂片和痰培养检测的敏感度、AUC较高,联合检测可提高对肺结核的诊断效能。     

四种结核分枝杆菌检测方法临床诊断效能的评价

目的 评估痰涂片抗酸染色镜检(简称“涂片法”)、L-J培养基(Lowenstein-Jenden medium)固体培养(简称“L-J法”)、BACTEC MGIT 960液体培养(简称“MGIT 960法”)及GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert法”)等4种结核分枝杆菌检测方法检出结核病病原菌的能力。方法 搜集2018年1月1日至2018年12月31日北京结核病控制研究所451例疑似肺结核患者的痰标本,同时使用涂片法、L-J法、MGIT 960法及GeneXpert法进行检测。对上述4种方法的检测结果以临床诊断情况(总体分为“肺结核患者”与“非肺结核患者”)为参考标准,计算各种检测方法的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、一致率;同时计算4种方法联合检测结果的病原学阳性率(其中任何一种方法检测结果为阳性,即判断为联合检测结果为阳性)。结果 451例疑似肺结核患者中,临床最终诊断依据《WS 288—2017肺结核诊断》标准进行,诊断为肺结核患者227例(肺结核225例、肺结核并发结核性胸膜炎2例),非肺结核患者224例[非结核分枝杆菌(NTM)肺病11例,陈旧性肺结核6例,肺部阴影待查181例,胸腔积液3例,肺纤维化1例,肺炎3例,肺癌1例,密切接触者筛查18例]。以临床诊断结果为参考标准,涂片法、L-J法、GeneXpert法、MGIT 960法检测敏感度分别为22.5%(51/227)、32.2%(73/227)、37.9%(86/227)、43.2%(98/227),特异度分别为96.0%(215/224)、96.4%(216/224)、100.0%(224/224)、95.1%(213/224),一致率分别为59.0%(266/451)、64.1%(289/451)、68.7%(310/451)、69.0%(311/451)。涂片法和L-J法联合检测,以及涂片法、L-J法和GeneXpert法联合检测,4种方法联合检测的敏感度分别为34.8%(79/227)、43.6%(99/227)、49.8%(113/227),特异度分别为96.0%(215/224)、96.0%(215/224)、93.8%(210/224),一致率分别为65.2%(294/451)、69.6%(314/451)、71.6%(323/451)。结论 以临床诊断为参考标准,MGIT 960法检测的敏感度最高;GeneXpert法检测的特异度最高;4种方法联合检测能够显著提高诊断敏感度,与临床诊断的一致率也显著提高。