雷公藤有效成分制备的研究进展

简要介绍了近年来有关中药雷公藤有效成分的制备方法及研究进展，提出应将液相色谱应用在雷公藤有效成分纯品的制备上。     

黏附分子在血小板诱导肿瘤转移中的作用

恶性肿瘤是目前威胁人类生命和健康的主要疾病之一,它的浸润和转移是其恶性化的特征和标志,也是目前临床上大多数肿瘤患者治疗失败和死亡的主要因素.肿瘤的血行转移是肿瘤远处散播的主要途径,能够造成多器官组织的广泛转移.血小板在肿瘤血行转移中起关键作用,它能够与肿瘤细胞形成癌栓(cancer embolus),从而介导肿瘤细胞与内皮细胞的黏附,形成转移.因此抑制血小板与肿瘤细胞的黏附将有助于减少肿瘤转移.我们对介导血小板与肿瘤细胞黏附的相关黏附分子进行了总结,并针对这些粘附分子在抗肿瘤转移方面的研究进行了综述.     

高渗氯化钠右旋糖酐70注射液的血管刺激性溶血性和过敏性研究

目的 研究高渗氯化钠右旋糖酐70注射液(Hypertonic saline dextran70 injection,HSD)是否具有血管刺激性、溶血性和过敏性作用.方法 对中试产品进行了血管刺激性实验、全身过敏实验和溶血实验.结果 HSD对血管没有明显的刺激作用;不引起豚鼠的过敏反应;不引起溶血和红细胞凝集作用.结论 制剂的安全性得到确证.     

急进高原高海拔地区高原反应发生情况分析及紧急献血可行性初步探讨

目的：调查185名从平原急进高原地区人员高原反应发生情况,以及海拔约4600 m地区试验性紧急献血人员健康状况,为高原高海拔地区紧急采血的实施提供科学依据。方法依照GJB1098-1991《急性高原反应的诊断和处理原则》测定不同海拔高度高原反应变化,填写调查表,分析海拔约3600 m和4600 m环境下高原反应发生情况以及海拔4600 m地区献血者紧急献血前后身体健康状况。结果不同海拔高度高原反应发生率变化不明显,但高海拔地区中重度高原反应发生率明显增加;航空机动模式（2～5 h）和铁路机动模式（6～9 d）入藏人员高原反应发生率基本一致,分别为70．00％和74．40％;健康者紧急献血后未发生献血反应和高原反应。结论高原海拔4600 m地区在一定条件下可以开展紧急献血,但仍需加大样本量继续进行深入研究。     

雷公藤有效成分制备的研究进展

简要介绍了近年来有关中药雷公藤有效成分的制备方法及研究进展，提出应将液相色谱应用在雷公藤有效成分纯品的制备上。     

明胶酶在脑胶质瘤大鼠中的活性

目的:通过观察脑胶质瘤大鼠动物模型中明胶酶的活性变化,为以明胶酶为靶点的脑胶质瘤治疗奠定实验基础。方法:实验于2004-10/2005-12在解放军军事医学科学院野战输血研究所干细胞生物学研究室完成。9L大鼠胶质瘤细胞购自广州南方医科大学。①选取清洁级健康成年雄性Fisher344大鼠27只,24只建立大鼠脑胶质瘤模型,造模后随机数字表法分为建模后7,14,21,28d组,6只/组,每组3只用于灌注固定做免疫组化分析,另3只用于反转录多聚酶链反应和明胶酶谱分析。剩余3只大鼠作为正常对照。②采用反转录多聚酶链反应技术、免疫组织化学和明胶酶谱等方法检测胶质瘤中明胶酶2(matrixmetalloproteinase2,MMP-2)和明胶酶9(matrixmetalloproteinase2,MMP-9)的活性变化。结果:实验选取清洁级健康成年雄性Fisher344大鼠27只,全部进入结果分析。①MMP-2和MMP-9mRNA的表达:9L胶质瘤细胞中均可见MMP-2和MMP-9mRNA的表达,MMP-2的表达量高于MMP-9;大鼠脑胶质瘤组织中可见两者mRNA的表达,而正常脑组织MMP-2mRNA低表达,检测不到MMP-9mRNA的表达;随着肿瘤的生长,MMP-9mRNA的表达量增高。②MMP-2和MMP-9免疫组织化学观察结果:9L胶质瘤细胞的免疫组化显示,MMP-2和MMP-9均呈现阳性染色,主要为胞浆和胞膜染色;肿瘤组织MMP-2和MMP-9染色阳性,为胞浆染色,在血管内皮和肿瘤侵袭边缘细胞胞阳性染色明显。随脑胶质瘤的生长,MMP-2和MMP-9染色程度加深。③MMP-2和MMP-9酶活性检测结果:9L细胞无血清培养上清中可见Pro-MMP2(Mr72000)与Pro-MMP9(Mr92000)及其活化形式activeMMP-2(Mr66000)与activeMMP-9(Mr83000)的表达,MMP-2的表达量较高;MMP-2酶原与活化的MMP-2在脑胶质瘤组织中明显表达,而在正常脑组织低表达。MMP-9酶原与活化的MMP-9在脑肿瘤组织中表达,正常脑组织中未检测到其表达。④MMP-2和MMP-9在肿瘤组织中的定位情况:脑胶质瘤组织冰冻切片原位明胶酶谱结果显示,肿瘤组织因表达活性的明胶酶降解载片上的明胶,致使不被染色,肿瘤部位很透亮。对侧脑组织因不表达明胶酶,不能降解明胶,被染黑。结论:脑胶质瘤模型中表达高活性的MMP-2和MMP-9,且与胶质瘤生长速度密切相关。     

活体成像观察骨髓间充质干细胞向胶质瘤的趋化

目的 观察大鼠BMSCs在颅内的分布及向肿瘤的趋化能力.方法 分离、纯化、培养大鼠BMSCs,检测其表面抗原,并构建稳定表达海肾荧光素酶(RL)的BMSCs(BMSCsRL);采用立体定向手术,在Fischer大鼠脑实质接种PKH26标记的9L胶质瘤细胞:接种胶质瘤细胞后7d应用立体定向仪于胶质瘤对侧脑实质接种BMSCsRL.通过Xenogen活体动物体内成像系统监测BMSCsRL在颅内的分布情况,同时通过Transwell板观察体外BMSCs向肿瘤迁移的情况.结果从大鼠骨髓分离的BMSCs的CD90和CD44阳性率为99%;BMSCs有向肿瘤组织趋化的能力,体外实验发现迁移的细胞数量随9L细胞的增多而增多,在体实验中通过生物发光成像技术观察到在接种后0,7,14 d BMSCs向肿瘤组织迁移,且在肿瘤与正常脑组织交界处最为明显.结论 BMSCs对胶质瘤有明显趋化性,能从远处向胶质瘤组织迁移并定位于其中,提示BMSCs可作为一种潜在的细胞载体用于神经胶质瘤的靶向治疗.     

猪血小板膜糖蛋白的纯化与鉴定

目的：分离纯化猪血小板膜糖蛋白并对其进行鉴定。方法：差速离心法分离猪血小板，1％TritonX-100溶解膜糖蛋白，麦胚凝集索亲和层析纯化糖蛋白(0．3mol／L N-乙酰葡萄糖胺洗脱)，用鼠抗人GPⅠb单抗PHN89作点印迹，聚丙烯酰胺凝胶电泳，考马斯亮蓝(Coomassie blue，CB)和过碘酸-Schiff(PAS)染色鉴定糖蛋白，腺苷二磷酸钠盐(ADP)和瑞斯托菌素(ristocetin)诱导的人血小板聚集测定其体外活性。结果：用GPⅠb单抗PHN89为一抗的点印迹表明0．3mol／L N-乙酰葡萄糖胺能充分洗脱结合到凝集素上的GPⅠb。PAS法糖定性有2条显色条带，SDS-PAGE纯化后有2条蛋白区带。ADP阳性对照血小板聚集率为74％，纯化前后的样品血小板聚集率分别为42％和4％，ristocetin阳性对照血小板聚集率为100％，纯化前后的样品血小板聚集率分别为25％和3％，表明制备的血小板糖蛋白具有生物学活性。结论：得到了较纯的血小板膜糖蛋白，为血小板膜糖蛋白的进一步研究及应用奠定基础。