烧伤患者气管切开置管全国专家共识(2018版)

大面积烧伤、头面颈部深度烧伤、吸入性损伤等易出现气道水肿、狭窄、梗阻甚至窒息,危及生命,及时行气管切开置管是重要的救治措施,而部分医院存在认识不足与处理不当,导致患者气道梗阻发生。经皮穿刺气管切开置管技术为危重症烧伤急救与成批烧伤的救治提供了便利,中国老年医学学会烧创伤分会组织国内部分专家,就烧伤患者气管切开置管的指征、时机、方法、拔管及注意事项进行讨论,撰写了《烧伤患者气管切开置管全国专家共识(2018版)》,为临床治疗提供参考标准。     

β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成的实验研究

目的探讨β4整合素结合蛋白（ITGB4BP）对成纤维细胞胞外基质生成的调控作用。方法分别构建、包装能在哺乳动物细胞中促进和抑制ITGB4BP表达的腺病毒表达载体pAdEasy-ITGB4BP-EGFP和慢病毒表达载体Lentivirus-FIV-H1／U6-copGFP-ITGB4BP-RNAi,经筛选鉴定有效后,分别感染人正常皮肤成纤维细胞和增生性瘢痕（HTS）成纤维细胞,利用ELISA检测细胞培养上清内基质金属蛋白酶（MMP-9）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和I型胶原蛋白（collagen I）的表达情况。结果正常皮肤成纤维细胞内IT—GB4BP高表达后,引起MMP-9、TGF-β1和collagen I表达降低;反之HTS成纤维细胞内ITGB4BP表达抑制后,MMP-9、TGF-β1和collagen I表达增高。结论ITGB7BP对MMP-9、TGF-β1和collagen I表达具有重要调节功能。提示ITGB4BP可能具有抗纤维化的重要功能,为下一步深入探讨HTS的形成机制提供了重要依据。     

HT036是纤维化相关基因P311的相互作用蛋白

目的利用激光共聚焦显微镜观察未知蛋白（HT036）与纤维化相关蛋白（P311）的细胞内表达与共定位。方法构建带绿色荧光的HT036真核表达载体,经鉴定正确后,与前期构建带红色荧光的P311真核表达载体共转染人胚肾上皮细胞株（HEK293）,同时共转染空载体做对照,激光共聚焦显微镜下观察蛋白在细胞内表达、分布和共定位。结果HT036真核表达载体经聚合酶链反应（PCR）、双酶切和测序鉴定正确,与P311共转染HEK293细胞后,激光共聚焦显微镜观察到绿色和红色荧光表达。HT036和P311主要分布在细胞胞浆,两者在HEK293细胞中存在共定位,而对照组则无该现象。结论通过酵母双杂交筛选出的P311相互作用蛋白HT036,在活体细胞内存在空间上的共定位,进一步证明它们之间的相互作用,为探讨P311纤维化机制提供新的切人点。     

胎猪皮肤前体组织异种移植研究

目的 系统筛选猪胚胎皮肤前体组织异种移植的最佳妊娠时间窗,了解其创面修复能力. 方法 取胎龄35、42、56、70 d的胎猪皮肤前体组织,制成微粒后移植于BABL/c裸鼠背部创面,以整形患者术后剩余皮肤或者成年猪皮覆盖.观察术后移植物生长发育特性,并于移植后6、12周取材,用组织学方法观察其形态结构及成瘤性. 结果 胎猪皮肤前体组织移植后具有如下特点:(1)能成活并继续生长发育,微粒可融合成片;胎龄35、42、56、70 d的前体组织移植后12周,新生组织面积分别为(18±8)、(47±6)、(31±12)、(20±8)mm2,其中胎龄42 d的组织与其余三者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)新生(猪)皮肤组织具有表皮层和真皮层,真皮乳头明显.(3)能生长成为具有毛发、皮脂腺及汗腺等皮肤附属器的"完整"皮肤,且表皮层有黑索细胞.(4)胎龄56、70 d的胎猪皮肤前体组织移植后未出现畸胎瘤. 结论 胎龄56 d的胎猪皮肤前体组织可用于异种移植修复皮肤创面.     

肾移植术后尿蛋白二维电泳图谱的建立

目的近年来诊断急性排斥反应的发生，一直朝着寻找非侵入性的检测方向努力，尿液中的蛋白可以为肾脏疾病病理变化提供线索。本次实验的目的旨在建立肾移植术后病人尿蛋白二维电泳图谱。方法利用二维凝胶电泳（Two-dimensional Gel Electrophoresis，2-DE）技术，以固相pH梯度等电聚焦为第一向，改良等电聚焦的电压在3500V，总伏小时为14000Vh；12％的SDS-PAGE进行第二向电泳，银染显色。结果得到了令人满意的肾移植术后发生急性排斥反应患者尿蛋白二维电泳图。结论此方法，可为后续利用蛋白质组技术，研究急性排斥反应诊断标志物提供可靠的技术支持。     

重视烧伤康复评定

随着烧伤康复治疗的蓬勃发展, 国内众多烧伤单位越来越重视烧伤康复治疗手段在烧伤患者中的应用, 但是在烧伤康复治疗过程中不能忽视烧伤康复评定的开展。烧伤康复评定具有评定时间跨度大和评定内容多且复杂的特点, 这造成不能制订符合所有烧伤患者的标准化评定表。并且, 国内部分单位存在的烧伤康复评定专业人才短缺、客观化的评估仪器数量偏少以及各种制度限制等因素, 也导致烧伤康复评定存在开展动力不足、评定质量较低的问题。基于此, 该文主要分析了我国烧伤康复评定的特点和主要内容, 并针对国内烧伤康复评定的不足提出部分改进意见, 以期为烧伤康复从业人员提供参考。     

序贯式护理在面颈部深度烧伤后新生皮肤管理中的临床应用效果

目的探讨序贯式护理在面颈部深度烧伤后新生皮肤的管理中的临床应用效果。方法采用回顾性病例对照研究方法。陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院2019年1—12月收治109例符合入选标准的面颈部深度烧伤创面愈合后1周内患者, 将1—6月收治的采用综合治疗+常规护理的55例患者纳入常规护理组, 其中男27例、女28例, 年龄21～65(40±17)岁;将7—12月收治的采用综合治疗+序贯式护理的54例患者纳入序贯护理组, 其中男29例、女25例, 年龄18～57岁(37±11)岁。统计2组患者首次治疗(以下简称治疗)前及治疗3个月、6个月、1年温哥华瘢痕量表(VSS)中色泽、血管分布、柔软度、厚度评分和VSS总分及四项目瘙痒量表(FIIQ)中瘙痒对睡眠的影响评分及FIIQ总分, 治疗1年的治疗有效率和患者对治疗效果的满意度及治疗期间的不良反应发生情况。对数据行独立样本t检验、Mann-WhitneyU检验、χ2检验。结果 2组患者治疗前VSS中的色泽、血管分布、柔软度、厚度评分及VSS总分均相近(P>0.05)。序贯护理组患者治疗3个月VSS中的柔软度评分及VSS总分, 治疗6个月V...     

荧光共振能量转移技术检测ITGB4BP与P311间的相互作用

目的 利用激光共聚焦显微镜中的荧光共振能量转移(FRET)技术来验证整合素4结合蛋白(ITGB4BP)和P311间的相互作用.方法 分别构建能在哺乳动物细胞中表达ITGB4BP的绿色荧光融合蛋白ITGB4BP-EGFP和表达P311的红色荧光融合蛋白P311-DsRed的重组载体pITGB4BP-EGFP和pP311-DsRed,经酶切与测序鉴定正确后,共转染人胚肾293(HEK293)细胞48 h后,采用受体漂白方法(P311-DsRed),检测ITGB4BP和P311间的能量转移率(E)和相互间的作用距离(R).结果 重组载体pITGB4BP-EGFP和pP311-DsRed经双酶切鉴定正确,转染293细胞后经激光共聚焦显微镜观察能分别表达融合蛋白ITGB4BP-EGFP和P311-DsRed,在细胞质和细胞核中存在着共定位,FRET检测结果显示其能量转移率为14%,两个分子间的作用距离为6.3 nm.结论 成功构建了ITGB4BP-EGFP和P311-DsRed融合蛋白真核表达重组载体,在哺乳动物细胞中进行了表达后,利用FRET技术证实了活体细胞内ITGB4BP和P311间存在着相互作用.     

ITGB4BP对Wnt/β-catenin信号通路活性的下调作用

目的 探讨β4整合素结合蛋白ITGB4BP 对Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 将对照组空载体pCMV-3B质粒和实验组pCMV-ITGB4BP质粒分别转染至HEK293细胞中,用Western blot和激光共聚焦技术检测细胞中β-catenin含量的变化,用含TCF/LEF启动子的荧光素酶TOPFlash质粒和内参pRL-TK质粒共转染对照组和实验组的HEK293细胞,用荧光素酶活性分析法检测ITGB4BP转染后HEK293细胞TCF/LEF活性的变化.设不转染质粒组为正常组,对照组和实验组均分别设未加LiCl组和加LiCl组.结果 Western blot检测结果:与正常组或对照组比较,实验组细胞β-catenin表达显著减少(P<0.05).加LiCl之后,β-catenin的表达显著增强(P<0.05),与未加有LiCl的正常组或对照组比较,加LiCl的实验组细胞内β-catenin仍有较高的表达,但差异无显著性.激光共聚焦技术观察:实验组β-catenin(绿色荧光)表达较对照组降低.加LiCl之后,β-catenin(绿色荧光)表达增强,与未加LiCl的对照组相比,加LiCl的实验组仍有较强的荧光强度.荧光素酶活性分析法检测:实验组的荧光素酶活性较对照组显著降低(P<0.05).LiCl作用之后,Wnt/β-catenin信号通路活性明显增强(P<0.05),与未加LiCl的对照组相比,加LiCl的实验组仍有较强的荧光素酶活性(P<0.05).结论 ITGB4BP可以下调Wnt/β-catenin信号通路的活性.