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1.
成年大鼠心肌细胞培养方法的建立和形态学观察 总被引:9,自引:0,他引:9
许秀芳 李温斌 陈宝田 吕燕宁 赵莉敏 陈燕 Xu Xiufang Lü Yanning Zhao Limin Chen Yan Li Wenbin Chen Baotian 《首都医科大学学报》2000,21(2):104-107
为探索稳定的成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法 ,应用生物酶 ( 5g/L胰蛋白酶及 1 g/L胶原酶 )灌注法分离成年大鼠心肌细胞 ,用形态学及台盼蓝染色法鉴定分离的心肌细胞 ,并在光镜和电镜下观察和摄像记录。结果 :心肌细胞的存活率为 91 .7% ;存活的心肌细胞静止地贴在培养板底上 ,细胞完整 ,呈杆状 ,长宽比约为 4~ 6∶1。结果提示 :该方法是比较理想的心肌细胞培养法。 相似文献
2.
目的:证实去除细胞外基质蛋白多糖对提高脱细胞猪肺动脉带瓣管道抗钙化性能的作用,为研制组织工程化肺动脉带瓣管道做准备。方法:实验分为3组,即A组:为新鲜猪肺动脉带瓣管道组织,B组:用胰蛋白酶+Triton X-100处理的脱细胞猪肺动脉带瓣管道组织和C组:在B组处理的基础上再经透明质酸酶消化,去除细胞外蛋白多糖基质成分的猪肺动脉带瓣管道组织,每组4份(n=4)。方法:实验室:将3组样本分别进行HE染色后,用光镜和扫描电镜观察肺动脉管壁及瓣膜组织的变化。采用盐酸胍抽提结合阿利新蓝染色法测定蛋白多糖的含量。同时将3组样本包埋于大鼠皮下,于6周后取出标本进行Van Kosaa银染色法(钙盐染色)和原子吸收分光光度计法分别定性、定量分析组织的钙化程度。结果:光镜和电镜检查结果显示,猪肺动脉管壁和瓣膜组织的细胞可以较完整的去除,纤维网架结构可以完整保持。蛋白多糖含量的测定显示,与A、B组相比,C组细胞外基质蛋白多糖的含量显著下降(P<0.05)。大鼠皮下包埋实验显示,与A、B两组相比,C组的钙化反应更少,管壁组织钙的含量显著下降(P<0.05)。结论:采用胰蛋白酶+Triton X-100脱细胞方法可以达到去除细胞的目的。通过大鼠皮下包埋实验证明,采用透明质酸酶消化减少细胞外基质蛋白多糖的含量可以进一步减少脱细胞组织的钙化反应,为组织工程肺动脉带瓣管道的构建提供较为理想的脱细胞基质材料。 相似文献
3.
目的 通过介入护理交接单的设计与应用,优化介入护理流程,减少护理不良事件,提高介入患者的安全.方法 针对医院回访中心在2011年进行介入治疗的929例住院患者满意度的调查结果,分析由于介入流程与交接环节引起的影响患者满意度的因素,对其进行汇总研究.遵循实用、有序、规范、简捷、方便记录的原则,将交接相关项目及顺序优化排列,制定介入护理交接单.结果 使用“介入护理交接单”后,有助于护士养成按固定的合理顺序行事习惯,缩短了手术准备时间;对2013年交接单使用后进行介入治疗的950例介入患者的满意度回访结果及与介入有关的影响因素,与使用前2011年的929例住院患者满意度的调查结果,进行分析比较.术中资料完整性、管路安全性、患者的满意度等均明显提高.结论 介入护理交接单的设计合理,实用性较强,使用后,提升了介入患者交接及转运的安全性,有利于介入手术护士与病房临床护士一体化培训,提高了介入手术室的效率和效益,增加了家属对医院的安全感、信任感,提高了患者的满意度. 相似文献
4.
目的 探讨经皮经肝胆汁引流术(PTBD)迷走神经反射的预防与护理.方法 观察103例PTBD患者术前、术中和术后迷走神经反射,对2011年3月-2012年5月DSA引导下行PTBD治疗的未使用阿托品的梗阻性黄疸患者48例(对照组)和2012年6月-2013年7月应用阿托品的处理的梗阻性黄疸患者55例(观察组)进行比较.记录心率、血压,将数据应用SPSS19.0统计学软件处理.结果 两组患者心率减慢、血压降低以及支架植入成功率比较差异有统计学意义.结论 PTBD术前、术中和术后能及时发现迷走神经反射,可以及时处理.术前应用阿托品可以预防迷走神经反射的发生,降低手术风险,提高手术安全性,提高患者的手术耐受性,减少手术意外,应予以提倡. 相似文献
5.
目的探讨适用于小鼠肾小管上皮细胞(mRTECs)分离培养及鉴定的技术方法。方法采用机械研磨肾脏组织分离肾小管节段并结合Ⅱ型胶原酶消化分离培养法进行mRTECs原代培养,利用倒置显微镜观察细胞生长情况;锥虫蓝法、绘制生长曲线法、3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法、DNA周期检测法分别测定和观察mRTECs传代成活率、生长情况及增殖特征;免疫荧光染色法鉴定细胞。结果获得的细胞3 d后从贴壁的肾小管节段边缘长出,7 d后呈铺路石样,生长迅速可传代;传代细胞成活率达96%以上;第1代(P1)、第3代(P3)细胞生长曲线近似"S"形,MTT法显示P1、P3细胞生长至第3~5天光密度值变化较明显;随传代次数的增加,第5代细胞生长曲线近似平缓,光密度值无明显变化,细胞逐渐衰老;P1细胞G0/G1和(S+G2)/M分别为78.9%和21.1%,P3细胞G0/G1和(S+G2)/M分别为82.1%和17.9%;P3细胞行免疫荧光染色细胞角质蛋白-18及上皮型钙黏素显示细胞质内蛋白表达阳性,细胞阳性率均达98%。结论机械研磨并结合Ⅱ型胶原酶消化培养法能成功培养mRTECs,建立稳定、高效的细胞分离和培养技术方法,为肾脏疾病与心血管功能相关性研究提供理想的细胞来源。 相似文献
6.
目的 建立一种快速而特异的肺癌辅助诊断方法。方法 制备特异性识别肺癌细胞的鼠单克隆抗体,通过细胞免疫化学和ELJSA方法检测抗体与痰液中脱落细胞的反应情况。结果 两种方法都显示,抗体2C25可选择性结合肺癌患者痰液中的脱落细胞,而不与肺炎患者和正常人痰液中的细胞发生反应。结论 抗体2C25在肺癌痰液免疫诊断中具有潜在的临床应用价值。 相似文献
7.
目的:观察应用体外循环灌注技术保存离体猪肢体实验中先天性抗体含量的变化。方法:10例实验用小型猪前肢为实验对象,于32℃下应用体外循环灌注技术保存样本12 h,进行普通病理检查和免疫荧光法测定先天性抗体含量,同时设立对照组,为4℃冰箱内保存猪的另一前肢12 h。结果:普通病理HE染色显示实验组标本肌肉、血管组织无明显的水肿;免疫荧光检查结果显示实验组肌肉、血管组织内先天性IgG抗体和IgM抗体荧光强度较对照组明显增强。结论:应用体外循环灌注技术保存离体猪肢体实验中先天性抗体被激活,含量增加。 相似文献
8.
1983年3月~1984年2月我们用肝素治疗7例肺心病急性发作期病人,对照组10例,就临床表现及血液流变学、血气分析等实验检查进行了临床观察,现报道如下:一般资料病例采取随机抽样,均系住院病例,具有典型病史及 X 线、心电图等检查,符合1977年全国第二次肺心病会议制定的诊断标准。肝素组:17例中男13例,女4例,年龄40~77岁。病程<10年3例,10~20年2例,>20年12例。对照组:男7例,女3例,年龄40~68岁。病程<10年2例,10~20年3例,>20年5例。 相似文献
9.
10.
目的探讨不良妊娠结局与妊娠早期TORCH感染的关系。方法选取我院2009年6月~2011年6月收治的46例妊娠妇女,分为正常妊娠组24例与不良妊娠组22例,应用ELISA法检测其血清当中TORCH一系列病原体的特异性抗体IgM。结果不良妊娠组妇女的TORCH-IgM总阳性率为63.64%,其中TOX-IgM、RV-IgM、CMV-IgM、HSVⅠ-IgM、HSVⅡ-IgM的阳性率均明显高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠早期TORCH感染是导致不良妊娠结局的重要因素,应该重视妊娠早期TORCH感染的检测和诊治。 相似文献