热打击联合脂多糖刺激对人肠上皮细胞SW480释放细胞因子的影响

目的：观察脂多糖（LPS）与热打击分别单独作用与联合作用对人肠上皮细胞SW480释放细胞因子的影响。方法：于37℃、5％CO2标准培养箱中培养人肠上皮细胞株SW480。实验分4组：空白对照组直接收集细胞上清;LPS单独刺激组（LPS组）分别使用0、0．01、0．1、1和10μg／ml的LPS刺激SW480细胞,24h后收集细胞上清;热打击组将SW480细胞进行热打击（42℃,1h）后在标准孵箱分别培养1h和24h后收集细胞上清;LPS＋热打击组将SW480细胞42℃热打击1h后给予上述浓度的LPS刺激,再重新置于标准孵箱中培养,24h后收集细胞上清。各组细胞上清用LiquiChip液相蛋白芯片系统分别检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）、7干扰素（IFN-7）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等10种细胞因子／趋化因子的表达分泌水平。结果：单独LPS刺激时呈剂量依赖性诱导SW480表达分泌IL-8,对其余9种细胞因子／趋化因子的表达分泌水平影响不明显。单纯热打击仅诱导SW480细胞表达分泌IL-8的水平升高,且与空白对照组比较,仅热打击24h后IL-8的水平显著增加（P〈0．01）。热打击联合不同浓度的LPS刺激SW480细胞,LPS浓度低时并不影响SW480表达分泌IL-8的水平（P〉O．05）,而高浓度LPS可以显著减少其表达分泌水平（P〈0．05）。结论：人肠上皮细胞SW480作为脏器实质细胞,对炎性刺激仅能产生单一种类的细胞因子,其中LPS单独刺激和一定强度的热打击均可上调SW480分泌IL-8;但高浓度LPS在热环境下可抑制SW480细胞的IL-8表达分泌水平。     

不同复温时点的热打击人骨骼肌细胞损伤情况观察及其机制

目的 观察不同复温时点的热打击人骨骼肌细胞(HSKMC)损伤情况，并探讨其可能的机制。方法 将对数生长期的HSKMC分为热打击组和对照组，对照组正常培养，热打击组建立热打击细胞损伤模型后置于37℃、5%CO2细胞培养箱中复温，复温时间分别为0、6、12、24 h。采用CCK-8法检测细胞存活率，透射电镜下观察细胞超微结构，Western blotting法检测瞬时感受器电位香草酸受体亚型4(TRPV4)蛋白相对表达量，实时荧光定量PCR法检测TRPV4 mRNA相对表达量。将对数生长期的HSKMC分为HS组、GSK+HS组、HC+HS组和NC组，NC组正常培养，其他三组建立热打击细胞损伤模型，复温时间均为12 h,GSK+HS组、HC+HS组在热打击前0.5 h分别给予TRPV4激动剂GSK1016790A 500 nmol、TRPV4抑制剂HC-067047 5μmol，采用流式细胞术检测细胞内Ca²⁺浓度。结果 与对照组比较，复温0、6、12、24 h的热打击组细胞存活率均降低(P均<0.05)；随着复温时间的延长，热打击组细胞存活率依次降低，两两比较P...     

帕纳替尼及联合化疗治疗伴T315I突变的Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病4例

目的探讨帕纳替尼及联合化疗治疗伴T315I突变的Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia, Ph~+ALL)患者的临床疗效及不良反应。方法伊马替尼或达沙替尼联合化疗治疗后复发,且治疗期间发生T315I突变Ph~+ALL患者4例,均给予帕纳替尼30 mg/d或45 mg/d,口服,视治疗情况给予联合化疗,随访观察治疗效果,记录总生存期及并发症发生情况。结果 1例应用帕纳替尼45 mg/d治疗1个月达分子生物学完全缓解,后BCR-ABL基因转阳但处于完全缓解状态;1例应用帕纳替尼30 mg/d治疗25 d后达完全缓解,复发后联合鞘内注射甲氨蝶呤+阿糖胞苷+地塞米松治疗再次达完全缓解;2例应用帕纳替尼45 mg/d治疗1个月后达完全缓解,其中1例3个月后复发,帕纳替尼联合Hyper-CVAD(环磷酰胺+表阿霉素+长春地辛+地塞米松)治疗后仍为部分缓解,后失访;末次随访时3例未失访者中位总生存期为16.4个月;4例患者均出现Ⅳ级骨髓抑制,2例出现肺部感染,1例出现心功能不全,经对症治疗后缓解,无治疗相关死亡。结论帕纳替尼及联合化疗治疗伴T315I突变的Ph~+ALL疗效确切,不良反应可耐受。     

MICED方案治疗复发难治性多发性骨髓瘤的临床效果

目的观察MICED(米托蒽醌+异环磷酰胺+卡铂+依托泊苷+地塞米松)方案治疗复发难治性多发性骨髓瘤(RRMM)的临床效果。方法选取2011年7月至2018年3月郑州市第一人民医院和河南省肿瘤医院收治的72例RRMM患者,采用MICED方案进行化疗。分析临床疗效和预后,观察不良反应发生情况,并进行影响总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的单因素和多因素分析。结果接受MICED方案化疗后,总有效率(ORR)为70.83%(51/72),其中完全缓解(CR)6例,非常好的部分缓解(VGPR)23例,部分缓解(PR)22例,疾病稳定(SD)15例,疾病进展(PD)6例。死亡32例。CR、VGPR的29例患者中,随访中16例维持原有缓解状态,持续缓解时间2～75个月,中位持续缓解时间18个月。1、2、5年总生存率分别为67.53%、46.42%、27.09%,1、2、5年无进展生存率分别为52.27%、33.33%、17.70%。主要不良反应为骨髓抑制和胃肠道反应,其次为细菌或真菌感染。单因素分析显示,年龄、肾功能是否受损、疗效是否达CR和VGPR、前期治疗是否加用新药、前期化疗的疗程数是OS的影响因素(均P<0.05),年龄、合并髓外病变与否、末次治疗至复发时间、前期治疗疗程数是PFS的影响因素(均P<0.05)。多因素分析显示,前期化疗疗程数≤3个和无肾功能异常是OS的独立影响因素(均P<0.05),年龄<60岁和无髓外病变是PFS的独立影响因素(均P<0.05)。结论 MICED方案治疗RRMM临床效果确切,可作为RRMM的挽救治疗方案。     

CLAG方案治疗复发难治急性髓系白血病六例并文献复习

目的 分析CLAG方法治疗复发难治急性髓系白血病(AML)患者的临床疗效及不良反应.方法 对河南省肿瘤医院血液科6例复发难治AML患者采用CLAG(克拉屈滨+阿糖胞苷+粒细胞集落刺激因子)方案治疗,分析6例患者临床资料,并结合文献进行复习.结果 6例复发难治AML患者中,男性5例,女性1例;中位年龄45岁(13～ 63岁);复发和难治各3例.应用CLAG方案后5例达完全缓解,1例未缓解;6例患者均出现骨髓抑制,但是治疗期间无严重不良反应发生.结论 CLAG方案治疗复发难治AML疗效确切,不良反应耐受性较好,并需后续行异基因造血干细胞移植等积极治疗.     

CHAG预激方案诱导缓解治疗14例初治急性髓系白血病患者疗效分析

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二十碳五烯酸对热打击后肠上皮细胞的影响

目的：探讨二十碳五烯酸（EPA）对热打击后肠黏膜上皮细胞通透性改变的影响.方法：使用Caco-2细胞株建立肠上皮细胞紧密连接模型,加入25、50、100、150 μmol/L EPA培养96 h,进行43 ℃ 1 h的热打击.分别使用CCK-8法检测细胞增殖,transwell测定单层跨膜电阻抗（TEER）值和对大分子物质辣根过氧化物酶（HRP）的通透性,Western blot法检测occludin蛋白的表达水平,显微镜下观察考马斯亮蓝染色细胞骨架的变化.结果：50 μmol/L的EPA促进细胞增殖的效果最强,升高TEER和防止HRP通透性升高的作用最大（与其他各浓度组比较,P均〈0.01）,对occludin表达的增加作用最明显,并有益于维持细胞骨架的正常结构.结论：50 μmol/L的EPA能够保护肠上皮紧密连接,对肠黏膜屏障有一定的保护作用.