羊成骨蛋白对L929纤维母细胞DNA合成和细胞分裂作用的观察

本文报告羊成骨蛋白(sBMP)对L929纤维母细胞培养的DNA合成和细胞分裂作用结果。所加sBMP浓度为1～10μg/ml时,L929纤维母细胞培养72小时后,细胞计数明显高于对照组,可达对照组的1.5～1.8倍,其细胞DNA合成过程中~3H胸腺嘧啶摄入量显著增加,可为对照组的145～164％。sBMP浓度5μg/ml和10μg/ml组中,细胞连续培养10天,未见其形态发生异常变化。实验结果表明sBMP对纤维母细胞DNA的合成和细胞的有丝分裂有显著的促进作用,但无促分化的作用。     

α_2-巨球蛋白的提纯及其抗血清制备

<正> α_2-巨球蛋白(Alpha-2-macroglobulin,简称α_2M)是血中具有生物活性的大分子糖蛋白,分子量725,000,沉降系数17～20s,人体正常含量200±60mg/dl,在一定条件下可解离成四个亚单位。最近十年来,α_2M 在人     

基因工程技术制备人源抗HBsAg抗体Fab片段

将从抗体文库中筛选出的抗HBsAg Fab阳性克隆转化大肠肝杆菌 ,IPTG诱导表达 ,经Western blot鉴定 ,证实上清中含有可溶性抗HBsAg Fab片段 ,应用自制的羊抗人免疫球蛋白片段抗体 (anti Fab )与Gama bind交联制备的亲和层析柱纯化表达产物 ,所得纯化产物在SDS PAGE中形成单一条带 ,经Western blot证实具备良好抗原特异性 ,Dot blot证实具备良好抗原结合活性。     

抗人GPC3单克隆抗体在肝脏肿瘤组织学检测中的应用

目的应用抗人GPC3单克隆抗体检测肝脏良、恶性肿瘤组织中GPC3蛋白的表达。方法采用自制鼠抗人GPC3单克隆抗体及免疫组织化学技术检测19例正常肝组织、94例肝细胞癌(HCC)组织、20例胆管细胞癌组织、42例肝脏良性肿瘤组织中GPC3蛋白的表达,并分析GPC3蛋白表达水平与HCC患者临床病理参数的关系。结果 GPC3蛋白在肝细胞癌组织中阳性率达到79.8%,而血管瘤旁正常肝组织、胆管细胞癌组织和肝脏良性肿瘤组织中均不表达,差异具有统计学意义(P<0.001)。HCC组织中GPC3蛋白的表达与血清AFP水平(P=0.020)、是否伴有门静脉癌栓(P=0.050)、有无包膜等因素相关(P=0.043)。结论抗人GPC3单克隆抗体可特异性检出肝细胞癌组织GPC3蛋白的表达,值得进一步研究以应用于临床诊治。     

血清鳞状细胞癌抗原在肺鳞癌诊断中的价值

本实验采用全自动快速荧光酶分析系统（ＩＭｘ），用微粒子酶免疫测定法（ＭＥＩＡ）测定了１０５人血清鳞状细胞癌抗原（ＳＣＣＡｇ）水平，其中３４例肺鳞癌（ＳＣＣ），２６例肺非鳞癌（ＮＳＣＣ）患血清ＳＣＣＡｇ水平，以２０例肺良性肺疾病和２５例健康人为对照组。取２μｇ／Ｌ为正常值上限，超过此值为阳性，结果显示：血清ＳＣＣＡｇ水平在肺ＳＣＣ组（３．６６０±３．０２７μｇ／Ｌ）明显高于正常对照组（０．７５５±     

二种用于环孢霉素A放射免疫测定闪烁液的配制

随着器官移植在我国的广泛开展,血中环孢霉素A(Cyclosphorin A,CsA)浓度的动态测定已经成为临床指导用药不可缺少的检查。目前国内大都采用Sandoz公司单克隆抗体测定CsA药盒。但最终进行放射免疫测定之前,需用1ml水溶物,与实验室常用的闪烁液不相溶,而进口     

人源乙型肝炎病毒表面抗原抗体Fab片段与IFN-α融合蛋白表达载体的筛选

目的探讨如何在无药物抗性改变;无转化细胞生物指示系统改变的情况下准确快速地筛选出人源抗乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）抗体Ｆａｂ片段／ＩＦＮ－α融合蛋白原核表达载体。方法在 ＩＦＮ－α基因两端加上 ＸｂａⅠ酶切位点后用 ＰＣＲ法扩增,再重组入以抗体库技术筛选得到的人源抗ＨＢｓＡｇ－Ｆａｂ片段表达载体的相应位点上,构建 ａｎｔｉ－ＨＢｓＡｇ－Ｆａｂ／ＩＦＮ－α融合蛋白表达载体。取 ＰＣＲ扩增得到的 ＩＦＮ－α ＤＮＡ,用地高辛标记系统进行化学标记,制备 ＩＦＮ－α ＤＮＡ探针。取构建的融合蛋白表达载体转化受体菌．增菌后,以溶菌酶加煮沸法批量制备载体 ＤＮＡ,点样于硝酸纤维膜上, ８０℃烤２ｈ,预杂交液 ４２℃,２ｈ膜预杂交,标记探针 ４２℃, ４ｈ杂交,洗膜后用酶标抗地高辛抗体显色。同时设单纯人源抗 ＨＢｓＡｇ－Ｆａｂ片段表达载体为阴性对照, ＩＦＮ－α质粒为阳性对照。阳性克隆再以 ＳａｃＩ和 ＸｂａⅠ酶切,琼脂糖电泳鉴定。结果４０株转化细胞中筛选出７个阳性克隆,酶切鉴定显示两者符合率达１００％,成功地筛选出了ａｎｔｉ－ＨＢｓＡｇ－Ｆａｂ／ＩＦＮ－α融合蛋白表达载体。结论人源ＨＢｓＡｇ抗体Ｆａｂ片段／ＩＦＮ－α融合蛋白表达载     

一步亲和纯化制备基因工程人源抗HBs单克隆抗体Fab片段

目的：探索亲和纯化人源单克隆抗体片段的简便实用方法。方法：应用自制的抗人免疫球蛋白片段抗体（Ａｎｔｉ－Ｆａｂ）与链球菌蛋白Ｇ亲和胶（Ｇａｍｍａ Ｂｉｎｄ）交联制备亲和层析柱,用一步法从工程菌培养上清中纯化人源抗ＨＢｓ单克隆Ｆａｂ片段。经依沙吖啶沉淀、离子交换、分子筛纯化人混合血清提取ＩｇＧ组分,木瓜酶处理后分离,纯化出Ｆａｂ,免疫绵羊制备高效价抗表。用Ｇａｍｍａ Ｂｉｎｄ一步纯化出抗血清中的ＩｇＧ     

良性M蛋白血症的实验室诊断(附38例分析)

本文对临床出现M蛋白血症的212例患者,经实验室分析后有38例确定为良性M蛋白血症,占17.9％。其中有IgG17例,IgA17例,IgM4例。平均M蛋白含量分别为IgG 1.42、IgA0.88、IgM 1.84(g/dl)。 还讨论了M蛋白血症良性与恶性的鉴别诊断要点。提出确定良性M蛋白血症实验室鉴定的5个程序:1.总蛋白定量;2.醋纤膜区带电泳;3.尿蛋白分析;4.免疫球蛋白定量;5.免疫电泳或选择免疫电泳。     

原发性肝癌患者外周血细胞和体液免疫反应变化

本文对原发性肝细胞癌(HCC)外周血白细胞、淋巴细胞及其亚群数量和淋巴细胞转化率、血清IgG、IgA、IgM、C_3、循环免疫复合物(CIC)进行了测定。并与正常人组和肝硬化组进行了分组对比研究。结果表明,HCC病人外周血白细胞、淋巴细胞、T淋巴细胞总量无明显变化,但Ea玫瑰花形成细胞和淋巴细胞转化率明显降低。血清IgG、IgA、IgM、C_3较正常对照组显著升高。Ⅲ期肝癌组血清免疫球蛋白、C_3,CIC阳性率高于肝硬化组(P<0.01)。肝癌病人外周血细胞,体液免疫指标变化与病期有关。动态观察病人细胞、体液免疫指标有助于临床判断病情、正确选择综合治疗方案。