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一种新的血管生成抑制因子-TSF的设计及表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 选择PF4和TSP1的高活性片段设计融合基因-TSF,在大肠肝菌表达,细胞水平上检测表达产物的生物学活性。方法 PF4的C-末端13肽和TSP1的429-459片断31肽通过Gly-Pro-Gly肽桥设计为融合蛋白-TSF。采用pGEX-2T载体在E.coli JM109中表达TSF蛋白。采用MTT方法测定TSF及其相关性GST-TSF,PF4(58-70),TSP1(429-459)等对血管内皮细胞,平滑肌细胞,QGY7721人肝癌细胞,HLF人肺成纤维细胞等生长的抑制效应。结果 合成的TSF融合基因,克隆到pGEX-2T载体,转化E .coli JM109,获得了TSF蛋白的高效表达。建立了TSF蛋白的纯化复性方法,获得了GST-TSF融合蛋白及TSF蛋白。TSF,GST-TSF,PF4(58-70)和TSP1(429-59)均特异抑制血管内皮细胞的生长,其中TSF的活性最强,活性大小次序为TSF>GST-TSF>PF4(58-70)>TSP1(429-459)。结论 融合表达蛋白-TSF在细胞水平上能高效特异抑制血管内皮细胞的生长。 相似文献
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目的 选择PF4,TSP1的高活性片段及肿瘤细胞靶向肽,设计合成融合基因—tTSF,进行酵母表达及小鼠基因治疗研究。方法 根据PF4和TSP1的抑制血管生成高活性片段设计合成TSF基因,并在N-端接上肿瘤细胞靶向肽,设计合成了tTSF。将tTSF基因构建到pPIC9质粒,重组质粒pPIC9/tTSF转化GSll5酵母菌株进行表达,并检测表达产物对血管内皮细胞生长的抑制作用。将tTSF基因克隆到pcDNA3.1(+)载体,重组质粒pcDNA3.1(+)/tTSF通过皮下注射治疗C57BL/6小鼠移植肿瘤Lewis肺癌。结果 重组质粒pPIC9/tTSF转化GSll5酵母菌株后,获得了tTSF的高效表达,表达产物对血管内皮细胞生长产生明显的抑制作用;皮下注射重组质粒pcDNA3.1(+)/tTSF后,C57BL/6小鼠移植肿瘤Lewis肺癌的生长受到明显抑制。结论 tTSF基因设计成功,其酵母表达产物对血管内皮细胞生长产生具有明显的抑制作用,tTSF基因的体内基因治疗也具有显著的抗肿瘤效应。 相似文献
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若干疾病的判别函数与判别方程 总被引:1,自引:0,他引:1
在建立了脉图曲线方程组、状态方程与反馈方程体系、体循环动力结构的表述方程组及一系列参数式的基础上,虽然可以利用脉搏讯息研究心血管血流动力学诸特性的定量性变化,但是,由于系统特性太多,而且特性之间互为因果形成网络,因而指标参数也多,而且是互相影响纵横交错的,一种疾病过程的发生,会引起一系列指标参数的改变,采用单因素分析法,对单个指标参数进行(t)检验时,在正常组与病理组之间,或这个病理组与另一病理组之间,会出现许多指标有显著差异(P<0.05)或差异非常显著(P<0.01),但是这些差异显著的指标中,谁是两组研究对象之间的判别函数呢?单因素分析法是无法知道的,因为单因素分 相似文献
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对讯息的处理分析,是现代科学领域中的一个重要课题,中医切诊和脉象学,实质上是一门古老的经验丰富的处理分析脉搏讯息的学问。我们可以用现代观点来摸拟中医切脉过程:三个手指是生物传感器,它将脉搏讯息转化为生物电讯息,经输入线路(传入神经)进入高性能的电子计算机(大脑)产生感觉,与贮存器中贮存(记忆)的中医理论与临床经验所编程序(逻辑思维过程)进行分析,依据脉象形态变化的不同特性分为廿八脉和各种兼脉,但归根结底是由浮沉、迟数、大小、弦软、滑涩、虚实、诸种属性排列组合而成。从生物力学角度来看,中医手指在挠动脉上所拾取的到底是些什么讯息呢?这些脉象属性到底意味着什么? 相似文献
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前言在我们所建立的脉图曲线的基本方程中,若忽略生理特性,把阻尼粘滞系数(b)与血管壁弹性系数(c)看成常系数,那么基本方程只是四种力相互作用的机械运动方程。在我们所建立的脉搏讯息的主方程组中,若忽略生理特性,把BK、DK、VWK看成常系数,EtK看成物理反射系数,那么主方程所表述的,只是将体循环系统分为左心室,动脉系,微循环及静脉系三个分系统,并且系统的成分式分系统之间无反馈途径(神经体液的调节),系统的输入(左心室喷血)是独立变量,不受输出(静脉回心血量)和输入装置自身生理特性和动脉系的生理特性所控制的一个无生命的机械系统。 相似文献
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口服丙型肝炎复合多表位DNA减毒鼠伤寒沙门活菌苗的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 利用减毒鼠伤寒沙门菌作为载体,探讨丙型肝炎病毒(HCV) 口服DNA 疫苗的可行性。方法 把HCV 复合多表位抗原基因PCX 克隆到真核表达载体pcDNA3(CMV 启动子) ,构建HCV 真核表达载体pcDNA3/PCX,转化减毒鼠伤寒沙门菌SL3261 ,获得HCV 重组口服DNA 活菌苗SL3261 (pcDNA3/PCX) ,免疫小鼠及家兔后,检测特异性免疫应答及安全性。结果 SL3261(pcDNA3/PCX) 在小鼠及家兔中均可诱发低水平的特异性体液免疫及细胞免疫应答,免疫动物未见明显的毒性反应。结论 HCV 口服减毒鼠伤寒沙门菌DNA 疫苗可诱发特异性的免疫应答,为HCV 疫苗的研究提供新的理论及实验依据 相似文献
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将合成的丙型肝炎病毒(HCV)复合多表位抗原基因PCX及恶性疟原虫(Pf)多价抗原基因AB(SPf66+SPf105)克隆到表达载体pWR450 l中,以β 半乳糖甘酶(GZ) HCV Pf复合多肽抗原的形式在大肠杆菌中高效融合表达了目的蛋白GZ CAB,表达量约30%。所表达的重组抗原可被HCV患者血清及鼠抗Pf抗体特异识别,显示了该融合蛋白质具有HCV和Pf的免疫原性。该蛋白免疫小鼠后,诱发针对GZ CAB、GZ PCX及PfAg的特异性体液免疫应答及针对GZ CAB、GZ PCX的迟发性超敏反应,CD8+T细胞明显升高,提示该复合抗原作为HCV Pf双价疫苗的可行性。 相似文献