应用四环素调控系统建立可调控抗恶性疟原虫DNA疫苗的初步研究

目的 :应用四环素 (tetracycline,Tet)可调控系统建立可调控的抗恶性疟原虫的DNA疫苗。方法 :首先构建恶性疟原虫顶端膜抗原 1(AMA 1)基因和转录激活因子 (tTA或rtTA)基因的真核表达质粒pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA) ,并大量制备这两种质粒及表达转录抑制子 (tTS)的质粒pUHS6 1。以pTL 8/AMA 1、pTL 8/AMA 1(rtTA)和pTL 8/AMA 1(rtTA)加pUHS6 1/tTS免疫小鼠后 ,用四环素类似物强力霉素 (doxcycline ,dox)诱导或抑制上述DNA载体内AMA 1的表达 ,并分离小鼠血清检测针对AMA 1抗体的表达情况。结果 :①构建了真核表达质粒pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA) ;②pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA)在没有被诱导表达时 (仅基础表达 ) ,可诱导明显的免疫应答。在以pTL 8/AMA 1(rtTA)与含tTS的pUHS6 1共同免疫后 ,可极大地降低其免疫应答。应用dox诱导pTL 8/AMA 1(rtTA)中的AMA 1基因表达后 ,可明显引起免疫应答。结论 :pTL 8/AMA 1(rtTA)附加pUHS6 1构成了可调节的DNA免疫系统。该系统的建立将对进一步深入研究DNA疫苗的免疫机制和调控基因表达 ,减少不良免疫反应以及进行可精确调控的基因治疗打下一定的基础     

QIAGEN质粒DNA纯化柱的再生利用

1　材料和方法1.1　材料　 QIAGEN Plasmid Maxi kit (QIAGEN- tip 5 0 0 ) ,纯化专用试剂 (P1,P2 ,P3,QBT,QC,QF,具体配方见 QI-AGEN质粒纯化手册 ) . pc DNA3.1(- ) /MSP1 - 1 9为将 PCR扩增的恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1(MSP1)的 17区基因片段(30 0 bp)以 Eco RI和 Bam HI酶切位点克隆入 pc DNA3.1(- )中 [2 ] ,pc DNA3.1(- )为 Introgen公司的真核表达质粒 .在研究 pc DNA3.1(- ) /MSP1 - 1 9作为 DNA疫苗效果时 ,需大量纯化该质粒 ,故本研究在纯化该质粒的同时 ,同样用该质粒进行纯化柱再生研究 .菌株为大肠…     

九江市庐山区农村医疗机构干预前后消毒效果调查简

农村医疗机构系指农村地区县级以下医疗卫生机构,是农村疾病控制的第一道防线和基本医疗的首诊场所。本辖区2009~2010年监测资料显示,县级以下医疗卫生机构消毒质量合格率远低于县级以上医疗机构[1]。为全面了解九江市庐山区农村医疗卫生机构消毒卫生现状,探索有效干预措施,庐山区疾病预防控制中心于2012年11月至2013年5月对辖区内69家农村医疗卫生机构卫生消毒状况进行现场调查,现将结果报道如下。     

成功救治1例溺水并发吸入性肺炎及急性呼吸窘迫综合征报道

随着社会的发展,交通事故、工伤及其他意外损伤经常可导致溺水,溺水患者病情凶险且发展迅速,治疗困难,死亡率极高,现就我科成功救治的1例溺水患者治疗体会汇报如下。     

肺动脉高压对肺叶切除术风险及临床结局的影响

目的评估肺动脉高压对肺叶切除术风险及术后并发症的发生情况。方法对253例肺叶切除术治疗患者的临床资料进行分析肺叶切除术后并发症与手术死亡率,观察肺动脉高压(12例)与肺动脉压正常(241例)行肺叶切除术后48 h心律失常、血流动力学紊乱、机械通气时间延长、以及重症监护的入住时间、死亡率及住院时间,进行统计学分析肺叶切除术风险及其临床结局的影响。结果肺动脉高压组的并发症发生率、重症监护的入住时间均高于正常组(P0.05),有统计学意义。结论肺动脉高压对肺叶切除术的风险及临床结局有较大影响。     

插入四环素操纵子对恶性疟原虫血型糖蛋白结合蛋白130基因启动子活性的影响

目的　构建四环素操纵子 (TetO)修饰的恶性疟原虫血型糖蛋白结合蛋白 13 0基因 (GBP13 0 )启动子 ,并探讨TetO插入后对启动子活性影响的位置效应。　方法　将 7个拷贝的TetO ( 7cot)序列分别克隆入GBP13 0启动子转录起始点附近的 4个位点 ,上、下游各两个 ,产生 4个衍生质粒pG/ 7T( -5 ) ,pG/ 7T( -2 ) ,pG/ 7T( +2 )和pG/ 7T( +5 )。瞬时转染后通过CATELISA检测和分析pGBPCATΔ2和 4个衍生质粒中CAT报告基因的表达水平。　结果　限制性酶切、PCR扩增和DNA测序证明质粒构建成功。转染和CAT检测表明 ,7cot插入到GBP13 0启动子的 4个位点中均可提高启动子的活性 ,并且定位于启动子下游比定位于上游具有更高的活性 ,其中于 +5位点启动子活性最高。　结论　在疟原虫四环素诱导性转基因表达系统中质粒pG/ 7T( +5 )可作为反应质粒加以应用。     

细胞因子表达质粒对恶性疟原虫顶端膜抗原1DNA免疫的调节作用

目的　探讨细胞因子表达质粒对小鼠DNA免疫的促进和调节作用。　方法　构建编码恶性疟原虫顶端膜抗原1(AMA1)完整胞外域的DNA免疫质粒VR1020/E,构建编码小鼠细胞因子(GMCSF)、白细胞介素(IL)如IL4和IL12的真核表达质粒pcDNA3/GMCSF、pcDNA3.1( ) /IL4和pIL12以及双顺反子质粒pGM CSF/pTPA E,分组免疫小鼠,ELISA检测血清中特异性IgG及其亚类的水平,取小鼠脾细胞进行体外增殖。　结果　 3种细胞因子质粒均有效增强了小鼠针对VR10 20/E的免疫应答,抗体水平增加7至10倍,其中pcDNA3/GMCSF质粒和pIL12质粒分别显著促进了小鼠的IgG1和IgG2a应答,小鼠脾细胞的体外增殖水平亦有明显提高。　结论　利用编码GM CSF、IL4和IL12的表达质粒作为佐剂可有效增强小鼠针对AMA1DNA的免疫应答,并对免疫应答的类型产生调节作用。     

恶性疟原虫顶端膜抗原1基因转染伯氏疟原虫模型的建立

目的：建立恶性疟原虫顶端膜抗原1（AMA-1）基因转染伯氏疟原虫的模型．方法：将含有恶性疟原虫AMA-1基因的重组转染质粒pDB.DTm. DB./AB. AF. DB．用Bgl Ⅰ酶切线性化．伯氏疟原虫经体外培养和分离后进行电转化,转化的原虫经药物筛选后进行PCR检测．结果：PCR检测显示转染伯氏疟原虫存在恶性疟原虫AMA-1基因．结论：成功建立了恶性疟原虫AMA-1基因转染伯氏疟原虫的模型,为进一步研究提供了基础．     

对医学英语教学影响因素的探讨

文章分析了目前在大学英语的重点由基础英语向专业英语转向的趋势下，影响医学英语教学的几种关系，如：医学英语与基础英语、医学英语与双语教学、英语教师与医学教师等，并提出处理以上关系的若干建议。     

基于随机行走模型分析不同年龄段瘢痕妊娠患者经子宫动脉栓塞术治疗的疗效

目的探讨不同年龄段瘢痕妊娠(CSP)患者经子宫动脉栓塞术(UAE)治疗的疗效及安全性。方法选择2016年7月至2020年7月江阴市中医院收治的120例CSP患者为研究对象, 根据年龄分为观察组(≤35岁, 75例)和对照组(>35岁, 45例), 收集所有患者临床资料并随访6个月, 对比两组患者的临床观察指标、手术疗效、视觉模拟量表(VAS)评分、卵巢恢复情况、术后并发症和不良反应、术后6个月生活质量评分。采用随机行走模型评价两组患者卵巢功能改善情况。结果观察组术中出血量、手术时间、术后β绒毛膜促性腺激素(β-HCG)值、β-HCG值转阴时间和月经恢复时间明显少于对照组(均P<0.05)。观察组总有效率为96.00%, 对照组总有效率为91.11%, 差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者术前、术后48、72 h的VAS评分差异无统计学意义(均P>0.05), 观察组术后12、24 h的VAS评分明显高于对照组(均P<0.05)。观察组患者治疗后血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、睾酮素(T)、黄体生成素(LH)水平均优于对照组(均P<0....