肿瘤标志物联合检测诊断恶性胸腔积液的应用价值

目的探讨联合检测胸腔积液中CEA、CA15-3、CA19-9、β-HCG、TPA5种肿瘤标志物对鉴别诊断良恶性胸腔积液的价值。方法采用化学发光法检测恶性组、结核组和良性组患者胸腔积液中CEA、CA15-3、CA19-9、β-HCG、TPA的含量;并与CT和脱落细学检查进行比较,分析肿瘤标志物的诊断敏感性、特异性及其临床应用价值。结果恶性组胸腔积液中CEA、CA19-9、CA15-3、β-HCG含量明显高于结核组、良性组(P<0.01),其阳性检出率分别为:52.83%、47.17%、41.51%、43.40%;TPA在恶性组和结核组含量显著升高,明显高于良性组(P<0.01),TPA与任一项肿瘤标志物同时阳性诊断恶性胸腔积液敏感性为84.9%,特异性为87.69%,与CT和脱落细胞联合检测相当。结论胸腔积液中肿瘤标志物联合检测是CT和脱落细胞检查的有益补充,对恶性胸腔积液诊断具有良好的临床应用价值。     

梅毒感染人群血清学检测结果的相关性分析

目的通过对梅毒感染人群血清学检测项目之间及与年龄的相关性分析,为临床评价梅毒感染提供更可靠的实验室依据。方法用化学发光法(CMIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别对梅毒特异性抗体(Anti-TP)和特异性IgM抗体(TP-IgM)进行半定量检测,用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)对梅毒非特异性反应素滴度进行检测,并运用SPSS统计软件对Anti-TP、TP-IgM和TRUST滴度之间以及其与年龄的相关性进行统计学分析。结果 410例Anti-TP阳性病例中,TP-IgM阳性占26.82%,TRUST阳性占54.14%;TP-IgM阳性病例中,88.18%TRUST阳性,Anti-TP index≥10.01同时TP-IgM阳性的病例中,95.87%的病例TRUST阳性;相关性分析发现TP-IgM和TRUST滴度与Anti-TP之间及TRUST滴度与TP-IgM之间明显相关,而Anti-TP、TP-IgM和TRUST滴度与感染者年龄无关。结论 Anti-TP、TP-IgM和TRUST滴度之间存在明显的相关性,临床在评价梅毒感染情况时应充分对比分析3项结果之间的关系。     

化学发光法定量检测抗双链DNA 抗体的临床应用

目的探讨定量检测抗双链DNA（dsDNA）抗体对系统性红斑狼疮（SLE）疾病诊疗的价值。方法将SLE疾病患者68例分为SLE疾病活动组43例和SLE无明显疾病活动组25例;非SLE的其他自身免疫性疾病33例,健康对照组26例。采用化学发光法检测各组血清中抗dsDNA抗体,比较该抗体在4组研究对象血清中的差异,探讨抗dsDNA抗体定量检测在SLE疾病活动组与SLE无明显疾病活动组间的应用。结果抗dsDNA抗体在SLE疾病活动组、SLE无明显疾病活动组、非SLE的其他自身免疫性疾病组和健康对照组间均值分别为126．41&#177;99．62、36．57&#177;65．10、10．87&#177;22．37和6．82&#177;11．09IU／mL;疾病活动组抗dsDNA抗体水平与其他组之间差异有统计学意义（P〈0．01）;该抗体在SLE中与血沉、疾病活动指数呈正相关,与补体C3、C4水平呈负相关。结论抗dsDNA抗体定量检测对于SLE疾病活动性判断具有良好的应用价值,但不适合临床病程监测,即诊断的价值大于其监测价值。     

狼疮性肾炎患者血清抗C1q自身抗体在肾损评判中的应用

目的探讨血清中抗C1q自身抗体水平在系统性红斑狼疮性肾炎(LN)组与非系统性红斑狼疮性(SLE)肾炎组之间的关系;解析抗C1q自身抗体对LN的诊疗价值。方法研究对象:来自该院就诊的LN患者82例,无合并狼疮指针的肾炎患者38例,门诊正常体检者35例。试验方法:抗C1q自身抗体采用ELISA法检测;24h尿蛋白、血清肌酐(Cr)采用全自动生化分析仪定量检测。方差分析比较各组抗C1q自身抗体、24h尿蛋白和Cr含量等指标的均值差异,χ2分析组间阳性率或异常百分比。结果与正常对照组相比,各指标在肾炎2组中均有较高的阳性率;肾炎2组间,仅抗C1q抗体单指标LN组阳性率高于非SLE肾炎组(P0.01),而24h尿蛋白水平与Cr水平在肾炎2组间的差异均无统计学意义(P值均大于0.05)。结论抗C1q自身抗体与SLE合并肾损密切相关,抗C1q抗体水平可为临床判断SLE患者有无肾损及病程估算提供良好依据。     

黄芪总黄酮对人体正常细胞和肿瘤细胞辐射防护作用的差异性研究

目的 研究黄芪总黄酮(total flayonoids of astragalus,TFA)对60°Co γ射线辐射损伤的人体正常骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)和肝癌细胞HepG-2辐射防护作用的差异性.方法 MTT法检测TFA处理组与单纯照射组hMSCs和HepG-2的细胞活性;HepG-2细胞克隆形成实验检测细胞的辐射敏感性;流式细胞技术分析细胞凋亡率;Western blot技术分析凋亡相关蛋白Fas,Bcl-2,Bax的表达.结果 MTT检测结果显示,当给予6 Gy γ射线一次性照射后,TFA预处理组hMSCs细胞活性分别比单纯照射组提高了1.15～1.95倍;经相同浓度TFA预处理的肝癌细胞HepG-2的细胞活性仅为单纯照射组的53%～23%;TFA的给药浓度与细胞存活率(survival rate)之间显现出良好的量效关系.细胞克隆形成实验结果显示:TFA+照射组能够明显抑制HepG-2细胞增殖,作用强于单纯TFA给药组和单纯照射组.流式细胞分析表明,经6 Gy γ射线一次性照射6、24和48 h后,TFA预处理组hMSCs的细胞凋亡率分别为23.3%,11.2%和2.9%.单纯照射组hMSCs的细胞凋亡率相应为29.3%,24.9%和13.6%;TFA预处理组肝癌细胞HepG-2的细胞凋亡率分别为11.6%,17.3%和20.1%,单纯照射组HepG-2的细胞凋亡率分别为6.9%、9.3%和15.8%.Western blot分析显示,在肝癌细胞HepG-2中,TFA预处理照射组促凋亡蛋白Fas和Bax 的表达量显著高于单纯照射组和对照组(t=11.17～-2.8,-12.35～3.4,P＜0.05);凋亡抑制蛋白Bel-2的表达量,TFA预处理照射组明显低于单纯照射组和对照组(f<6.36～17.61.P<0.05).结论 TFA对人正常骨髓间充质细胞具有明显的放射防护作用,对肝癌细胞不仅没有放射防护作用反而具有凋亡促进作用;TFA对肝癌细胞的促凋亡作用,主要通过上调促凋亡蛋白Fas和Bax的表达与下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,从而大大增强了60 Co γ射线对肝癌细胞的凋亡诱导作用.

Abstract：

Objective To investigate the different radioprotective effects of total flavonoids of Astragalus (TFA) on human normal mesenchymal stem cells(hMSCs) and hepatoma cells injured by 60 Coγ-ray radiation.Methods hMSCs and HepG-2 cells were cultured and randomly divided into TFA-treated and untreated groups.The cells of different groups were irradiated with 60 Co γ-rays at the dose of 6 Gy.MTT method was utilized to detect the survival rates of the hMSCs and HepG-2 cells pretreated or untreated with TFA before irradiation.Cell clone formation test was used to measure the cellular radiosensitivity.The apoptosis rates of different groups were determined by flow cytometer assay.The expression rates of the apoptosis-promoting proteins Fas and Bax and the apoptosis-inhibiting protein Bcl-2 were analyzed by Western blotting.Results MTT showed that the survival rates of hMSCs pretreated by TFA were 1.15-1.95 times higher than that of the pure irradiation group.On the contrary,the survival rates of the TFA pretreated HepG-2 cells were only 0.53-0.23 times that of the pure irradiation group.There was a good dose-effect relationship between the cell survival rate and the TFA concentration.Cell clone formation rate indicated that combined treatment of TFA and radiation inhibited the cell proliferation more effectively than single TFA or pure radiation.Flow cytometry showed that 6,24 and,48 h post-irradiation to 6 Gy,the apoptosis rates of the hMSCs were 23.3% ,11.2% ,and 2.9% ,respectively in the TFA pretreated group and were 29.3% ,24.9% ,and 13.6% in the pure radiation group.However,the apoptosis rates of the HepG-2 cells at 6,24,and 48 h post-irradiation to 6 Gy were 11.6% ,17.3% ,and 20.1% ,respectively in the TFA pretreated group and were 6.9% ,9.3% ,and 15.8% ,respectively in the direct radiation group.Western blotting showed that the expression levels of Fas and Bax proteins in the HepG-2 cells were significantly higher in the TFA pretreated group than in the pure radiation group.On the contrary,the expression level of the apoptosis inhibiting protein Bcl-2 was significantly lower in the TFA pretreated group than in the pure radiation group.Conclusions TFA has obvious effects of radiological protection on human hMSCs and has no effects of radiological protection but effects of apoptosis enhancement on hepatoma cells.The promotion of apoptosis of TFA on hepatoma cells is primarily through increasing the expression of apoptotic proteins such as Fas and Bax and reducing the expression of anti-apoptotic protein Bcl-2.     

甲基转移酶样因子3 通过调控GLUT4-mTORC1 轴影响食管鳞状细胞 癌细胞的糖酵解及增殖

目的：探讨甲基转移酶样因子3（METTL3）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织和细胞中的表达水平及其对ESCC 细胞糖 酵解和增殖能力的影响和潜在的分子机制。方法：基于TCGA 数据库分析METTL3 在ESCC 细胞中的表达及可能的富集通路。 收集2021 年1 月至2021 年6 月间在北川医学院附属医院外科手术切除的34 例ESCC 组织及相应癌旁组织,采用免疫组化法验证 ESCC 组织中METTL3 的表达。采用CCK-8 法和平板克隆形成实验检测干扰METTL3 后ESCC 细胞增殖能力的变化,利用比色 法检测干扰METTL3 后ESCC 细胞总RNA 中m6A 的表达水平,采用甲基化RNA 免疫沉淀定量PCR（MeRIP-qPCR）检测METTL3 对葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）基因mRNA 的m6A 修饰水平的影响,采用WB 和qPCR 等技术探索METTL3 参与ESCC 细胞糖酵解 的生物学机制。结果：METTL3 在ESCC 组织以及细胞中均呈高表达（均P<0.001）。干扰METTL3 表达后,ESCC 细胞的增殖能 力明显减弱、细胞内总RNA 的m6A 修饰水平显著降低（均P<0.001）。此外,干扰METTL3 可显著抑制KYSE150 和TE-1 细胞中 GLUT4 基因mRNA 的m6A 修饰水平（均P<0.01）,并通过下调GLUT4 的表达抑制葡萄糖的摄取以及乳酸的释放（均P<0.01）,最 终下调mTORC1 通路活性并抑制ESCC 细胞的增殖;在干扰METTL3 的ESCC 细胞同时联合运用mTORC1 通路抑制剂显示有协 同的抗癌作用。结论：METTL3 介导的m6A 修饰通过调控GLUT4-mTORC1 信号轴影响ESCC 细胞的糖酵解及增殖。     

长链非编码RNA THOR在食管鳞状细胞癌中的表达及作用机制研究

目的:探究睾丸相关的高保守的致癌长链非编码RNA(LncRNA THOR)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及对ESCC细胞功能的影响.方法:利用生物信息学结合qRT-PCR分析LncRNA THOR在ESCC中的表达情况.在ESCC细胞系TE1中,siRNA沉默LncRNA THOR后,使用CCK-8和划痕试验分别检测细胞增殖及迁移,qRT-PCR和Western blot检测IGF2BP1依赖基因GLI-1和MYC mRNA及蛋白质的表达.结果:UALCAN分析结果显示,LncRNA THOR在食管癌患者的表达显著高于正常人.qRT-PCR验证发现LncRNA THOR在ESCC组织的表达显著高于癌旁组织,在ESCC细胞系TE1和EC109中显著高于正常人食管鳞状上皮细胞HET-1A.在TE1中敲减LncRNA THOR后,CCK8实验显示细胞增殖被抑制,划痕实验显示细胞迁移能力降低.qRT-PCR和Western blot实验显示GLI-1和MYC mRNA及蛋白质都显著下调.结论:Ln-cRNA THOR在ESCC癌组织和细胞中的表达显著升高,沉默LncRNA THOR可以抑制ESCC细胞增殖及迁移,暗示LncRNA THOR可能作为ESCC治疗的新靶标.     

人附睾蛋白4评价慢性肾脏病患者肾功能的价值

目的探讨人附睾蛋白4(HE4)用于评价慢性肾脏病(CKD)患者肾功能水平的意义。方法采集333例非肿瘤CKD住院患者和50例表观健康人空腹静脉血,用电化学发光免疫法检测血清HE4,用全自动生化分析仪检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)、肌酐(Cr)、尿素(Urea)、尿酸(UA),用CKD-EPI方程估算e GFR;比较表观健康人群、CKD不同分期患者间血清HE4、Cys C、Cr、Urea、UA浓度及e GFR的差异,分析HE4与Cys C、Cr、Urea、UA及e GFR的相关性。结果血清HE4、Cr、Urea、Cys C水平随CKD分期进展而增高(P均0.05),CKD患者血清HE4水平与Cr、Urea、Cys C、UA均正相关(P均0.05),与e GFR负相关(P0.05)。结论血清HE4水平可用于评价早期非肿瘤CKD患者的肾脏功能。     

SLE患者血清抗C1q抗体浓度与其活动性及肾损伤实验指标的关系

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中抗C1q抗体水平与其肾损的关系.方法 将118例SLE患者分为SLE活动组81例和SLE稳定组37例;非SLE的其他自身免疫性疾病56例,正常对照组35例.抗C1q抗体采用ELISA法检测,抗ds-DNA抗体测定采用化学发光法,β2-微球蛋白(β2-MG)测定采用速率法测定,24 h尿蛋白定量检测采用邻苯三酚红法.比较各组抗C1q抗体、抗ds-DNA抗体、β2-MG和24 h尿蛋白定量等指标的均值差异和阳性率或异常百分比,并分析118例SLE患者血清中抗C1q抗体浓度与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、抗ds-DNA抗体、β2-MG和24 h尿蛋白定量的相关性.结果 抗C1q抗体浓度在SLE活动组为54.12±47.64 RU/ml,明显高于SLE稳定组9.87±19.36 RU/ml,非SLE的其他自身免疫性疾病组(16.24±14.06 RU/ml)和正常对照组(0.84±1.28 RU/ml)(均P<0.01).抗C1q抗体在SLE活动组、SLE稳定组、非SLE的其他自身免疫性疾病组和正常对照组的阳性率分别为80.2%,10.8%,30.4%和0.0%.SLE活动组的抗ds-DNA抗体浓度也明显高于SLE稳定组、非SLE自身免疫性疾病组和正常对照组(P<0.01).SLE活动组的β2-MG和24h尿蛋白定量水平均高于SLE稳定组(P<0.05).以抗C1q抗体为变量,以SLEDAI、抗ds-DNA抗体、β2-MG和24h尿蛋白定量为因变量,分别进行相关分析,SLE病人血清中的抗C1q抗体与SLEDAI(r=0.483,P<0.01)、抗ds-DNA抗体(r=0.372,P<0.01)和β2-MG(r=0.277,P<0.01)呈正相关,而与24 h尿蛋白定量无相关性.结论 抗C1q抗体水平是判断SLE疾病活动性的重要指标,其浓度变化可作为临床判断SLE患者有无肾早期损伤的敏感指标.     

两种β-HCG检测的方法比较

目的评价微粒子酶免化学发光法和免疫胶体金试纸法检测β-HCG的方法优劣。方法收集104例患者血清同时用微粒子酶免化学发光法和免疫胶体金试纸法检测血浆中β-HCG并对结果进行分析比较。结果微粒子酶免化学发光法检测血浆中β-HCG阳性率明显高于免疫胶体金试纸法,两种方法检测结果有显著性差异(P<0.01)。结论微粒子酶免化学发光法测β-HCG灵敏度高、更精确、更具有临床应用价值。