E-cad基因表达与胃癌发生及预后的关系研究

为探讨上皮钙粘附蛋白（E-cad)基因表达与胃癌发生发展及预后的关系，应用免疫组织化学方法检测了65例胃癌，25例胃癌前病变患者及20例胃粘膜正常者标本中的E-cad表达。结果显示，胃癌E-cad异常表达率（53．85％）显著高于胃癌前病变（24．0％），E-cad表达异常与胃癌的临床分期，分化程度，浸润深度及淋巴结转移密切相关，E-cad表达正常胃癌患者的3年，5年生存率显著高于E-cad表达异常者（P＜0．05）。提示E-cad基因表达与胃癌发生发展密切相关，检测E-cad表达有助于胃癌的早期诊断及转移潜能与预后的判断。     

采用SEREX方法筛选和鉴定消化道肿瘤抗原及其编码基因

肿瘤抗原及其编码基因的理论研究和实验技术使肿瘤抗原的筛选和肿瘤免疫的研究进入一个新阶段[1].肿瘤抗原的筛选与鉴定是临床特异性免疫治疗的前提和关键,随着对肿瘤生物学和肿瘤免疫学的深入认识,设计了基于体液免疫的重组cDNA文库的血清学分析(serological analysis of recombinant cDNA expression libraries,SEREX)方法,简便易行[2].本文对SEREX方法的原理、技术步骤、肿瘤基因筛选的应用及研究现状作一简要介绍.     

急性肺不张1例报告

1　病历报告患者 ,女 ,45岁 ,主因腹痛、腹胀伴恶心、呕吐 1ｄ于 2 0 0 0年 4月 17日入院。该患者 5年前曾因外伤至右肾切除。1997、1998年分别因肠扭转和肠梗阻行腹部手术 ,无肿瘤病史。查体 :心肺未见异常 ,腹部膨隆 ,腹软 ,压痛 ,可见肠型和蠕动波 ,听诊肠鸣音减弱。入院第 2ｄＸ线透视腹腔可见多个大小不等阶梯状液平。 4月 2 1日患者出现鼻腔流血 ,量多、胸痛、咳痰时带有血丝。拍正侧位Ｘ线胸片示右肺上叶后段见 3ｃｍ× 3.6ｃｍ大小 ,密度均匀、边缘清楚类圆形影。 4月 2 4日患者咯血 70ｍｌ,色鲜红 ,内有少量痰液 ,胸闷、胸痛、气急…     

开好基因工程实验课,提高研究生科研技能

山东大学免疫学研究所从1986年开始,为研究生开设了基因工程学实验技术课。在教学实践中,注重基础素质培训,将教学和科研工作密切结合,不断将新技术、新方法引入实验教学,经过多年的积累,现已经形成较为完备的教学体系。     

肝细胞癌相关肿瘤抗原基因的筛选与分析

目的 筛选和分析肝细胞癌相关的肿瘤抗原。方法 用肝细胞癌组织构建cDNA表达文库，通过重组cDNA表达文库血清学分析法，用自体患者和异体患者的血清对文库进行筛选。将所得阳性噬菌体克隆体内剪切获得其pBK-CMV噬菌粒。通过限制性核酸内切酶鉴定插入cDNA片段，并作测序和生物信息学分析。同时将阳性克隆中的LIMS1插入片段进行原核表达。结果 自体血清筛选得到14种基因，异体筛选获得11种基因，两组中均筛选到kinectin，共有24种肝细胞癌相关的肿瘤抗原基因。其中有8种基因目前还不清楚其功能，其余16种基因根据确定的或者推断的功能可以分成8组。LIMS1原核重组蛋白表达成功。结论 本研究为肝细胞癌的免疫治疗提供了候选基因，并为理解肝细胞癌发生和发展的机制提供了线索。     

免疫负调控基因A20在肝癌中的表达及其真核表达载体的构建

目的 探讨免疫负性调控基因A20在肝癌中的表达并构建A20真核表达载体。 方法 采用免疫组化技术, 检测46例肝癌患者癌组织和癌旁组织中A20的表达情况, 并进一步构建A20真核表达载体, 测序正确后以脂质体法转染至SMMC-7721肝癌细胞系中, RT-PCR和Western blot检测转染后A20的mRNA和蛋白表达。结果 免疫组化结果显示, A20在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织, 差异具有统计学意义（P＜0.05）。A20的表达与肝癌分级分化和肿瘤大小有关（P＜0.05）, 成功构建A20真核表达载体, 并在SMMC 7721肝癌细胞系中获得高表达。结论 免疫负调控基因A20可能参与了肝癌的发生机制, 成功构建的A20真核表达载体可作为进一步研究的重要工具。     

CD70在肝癌中的表达及其对淋巴细胞增殖抑制作用的研究

目的探讨CD70基因在肝癌中的表达及其在肝癌免疫逃逸中的作用。方法采用RT-PCR检测CD70在肝癌细胞系和肝癌组织的表达；构建CD70真核表达载体，瞬时转染HepG2细胞，与Jurkat细胞共培养，通过细胞增殖试剂(CCK8)检测对其淋巴细胞增殖的抑制作用。结果① 肝癌细胞系BEL-7402、SMMC-7721 中CD70表达呈阳性，HepG2细胞中CD70表达呈阴性；10例肝癌组织中3例CD70表达呈阳性，2例癌旁组织CD70表达均呈阴性；② 成功构建CD70的真核表达载体,瞬时转染HepG2细胞，与活化的Jurkat细胞共培养。转染CD70后的HepG2与Jurkat共培养后,Jurkat增殖抑制率（65.03%）与空细胞对照组和空载体对照组（38.01%、30.15%）相比显著升高（P＜0.01）。结论CD70基因在肝癌中呈阳性表达，并可抑制淋巴细胞的增殖活性，在肝癌细胞免疫逃逸中起了重要作用。